贵州省优秀科技教育人才省长资金项目(2009C457)
- 作品数：4 被引量：29H指数：4
- 相关作者：秦安东徐林任涛李颖罗军敏更多>>
- 相关机构：遵义医学院同济大学附属东方医院遵义医学院附属医院更多>>
- 发文基金：贵州省优秀科技教育人才省长资金项目博士科研启动基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 微小RNA-7对人肺癌95D细胞体外增殖的作用被引量：20
- 2010年
- 目的:探讨微小RNA-7(microRNA-7,miR-7)对人肺癌95D细胞体外增殖的作用。方法:采用体外转染法将miR-7瞬时转染95D细胞后,应用Real-time PCR特异探针法检测95D细胞中miR-7的表达情况,应用MTT法检测95D细胞的生长情况,FCM法分析细胞周期变化,并用Western印迹法检测95D细胞中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)表达的变化。结果:与对照组相比,miR-7转染组95D细胞的miR-7表达水平显著增加(P<0.05),细胞生长明显受抑(P<0.05),且主要阻滞在G1期(P<0.05),而EGFR表达显著下调。结论:miR-7可以抑制人肺癌95D细胞的体外增殖,可能作为后续肺癌生物治疗的新靶点。
- 徐林任涛周涯秦安东郑静
- 关键词：人肺癌体外增殖WESTERN印迹法体外转染瞬时转染EGFR表达
- miRNA-7真核表达载体的构建与鉴定被引量：6
- 2013年
- 目的构建miR-7真核表达载体并观察其对人肺癌细胞体外生长的影响。方法以人肺癌细胞系95D细胞基因组DNA为模板,PCR法扩增miR-7前体序列,经BamHⅠ和HindⅢ双酶切后将其亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1(-),并进行酶切及测序鉴定;将构建成功的pcDNA3.1(-)-pri-miR-7载体(命名为p-miR-7)体外瞬时转染95D细胞,应用Real-time PCR特异探针法检测miR-7成熟体的表达水平,并利用MTT法检测细胞生长的改变。结果酶切和测序验证成功构建了miR-7真核表达载体p-miR-7;表达载体p-miR-7瞬时转染95D细胞后可有效表达miRNA-7成熟体,并显著抑制95D细胞的体外生长(P<0.05)。结论成功构建了miR-7的真核表达载体,为后续深入研究miR-7在肺癌发生中的作用及机制提供了前期实验基础。
- 宋永祥李颖秦安东廖珍媛李永菊罗军敏任涛徐林
- 关键词：真核表达肺癌MTT法
- miRNA-7在小鼠不同组织器官中表达的检测及其意义被引量：11
- 2012年
- 目的采用Real-time PCR方法来检测miRNA-7在小鼠12种不同组织器官中的表达情况并探讨其意义。方法首先分别提取小鼠12种组织器官总RNA,用miRNA-7特异性引物逆转录为cDNA,采用Real-timePCR探针法检测miRNA-7在12种组织器官中的表达水平。结果成功应用Real-time PCR方法检测miRNA-7在小鼠12种组织器官中的表达水平,结果显示,miRNA-7在肺组织中的表达水平最高,而在淋巴结中的表达水平最低。此外,在小肠、脑、胸腺、脾脏中也存在miRNA-7的高表达。结论 miRNA-7在小鼠的肺、小肠、脑、胸腺、脾脏中呈较高水平的表达,提示该分子可能在上述器官的发育、分化、功能维持及相关疾病发生中具有重要作用,为后续深入研究miRNA-7的生物学功能提供了前期试验依据。
- 郑静李颖秦安东秦娜琳罗军敏徐林
- 关键词：MIRNAS小鼠
- microRNA-7对人肺癌95D细胞体外侵袭的作用被引量：14
- 2011年
- 目的探讨微小RNA-7(microRNA-7,miR-7)对人肺癌95D细胞体外侵袭的作用。方法采用体外转染法将miR-7瞬时转染95D细胞后,应用Real-timePCR特异探针法检测95D细胞中miR-7的表达情况,应用划痕法检测95D细胞的迁移情况,Invasion实验检测95D细胞侵袭能力的变化;用Western印迹法检测95D细胞中胰岛素样生长因子1受体(Insulin growth factor 1 receptor,IGF1R)表达及下游信号的变化。结果与对照组相比,miR-7转染组95D细胞体外侵袭能力明显削弱(<0.05),而IGF1R表达则显著下调,其信号途径分子Akt的磷酸化水平也明显降低。结论 miR-7可以抑制人肺癌95D细胞的体外侵袭,可能作为后续肺癌生物治疗的新靶点。
- 徐林任涛秦安东周涯罗军敏姚新生李颖
- 关键词：肺癌MIRNAS体外侵袭胰岛素样生长因子1受体生物治疗
