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国家自然科学基金(30070809)

作品数:13 被引量:21H指数:2
相关作者:孔维佳汪绪武陈敏李隽吴婷婷更多>>
相关机构:华中科技大学解放军第456医院华中科技大学同济医学院附属协和医院更多>>
发文基金:国家自然科学基金国家杰出青年科学基金国家教育部博士点基金更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 13篇中文期刊文章

领域

  • 11篇医药卫生
  • 2篇生物学

主题

  • 6篇细胞
  • 5篇前庭
  • 3篇缘细胞
  • 3篇边缘细胞
  • 2篇蛋白
  • 2篇电生理
  • 2篇受体
  • 2篇前庭内侧核
  • 2篇细胞癌
  • 2篇鳞状
  • 2篇鳞状细胞
  • 2篇鳞状细胞癌
  • 2篇膜片
  • 2篇膜片钳
  • 2篇内耳
  • 2篇基因
  • 2篇钾通道
  • 2篇喉鳞状细胞
  • 2篇喉鳞状细胞癌
  • 2篇耳蜗

机构

  • 11篇华中科技大学
  • 2篇解放军第45...
  • 1篇华中科技大学...

作者

  • 12篇孔维佳
  • 3篇汪绪武
  • 2篇张丹
  • 2篇郭长凯
  • 2篇吴婷婷
  • 2篇陈敏
  • 2篇李隽
  • 1篇李擎天
  • 1篇李冠乔
  • 1篇张松
  • 1篇李家荔
  • 1篇王彦君
  • 1篇陈雄
  • 1篇王琼
  • 1篇李之望
  • 1篇杨成章
  • 1篇毕胜斌

传媒

  • 2篇听力学及言语...
  • 2篇The Ch...
  • 2篇中华耳科学杂...
  • 2篇中华耳鼻咽喉...
  • 1篇中国耳鼻咽喉...
  • 1篇第三军医大学...
  • 1篇上海实验动物...
  • 1篇中国眼耳鼻喉...
  • 1篇中国听力语言...

年份

  • 2篇2008
  • 2篇2007
  • 2篇2006
  • 3篇2005
  • 3篇2004
  • 1篇2002
13 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
大鼠内耳组织微量核酸的提取及PCR扩增被引量:1
2002年
分别用提质粒法 ,SDS-蛋白酶 K法 ,TRIZOL 法提取大鼠内耳组织微量核酸 ,对所提核酸进行紫外吸收光谱分析及 PCR扩增。结果表明 ,提质粒法可制备不含核 DNA的线粒体 DNA;SDS-蛋白酶 K法可制备总 DNA ;TRIZOL法可同时制备总 DNA和总RNA。
王琼孔维佳
关键词:耳聋动物模型内耳组织PCR扩增
K-ras基因在人喉鳞状细胞癌细胞株(Hep-2)中的表达及其意义
2006年
目的 K-ras基因的突变激活,最常见于胰腺癌、结肠癌和肺癌等肿瘤。国外有人报道人喉鳞状细胞癌的发生与K-ras基因的突变激活没有相关性。本文旨在探讨K-ras基因在喉鳞状癌细胞株Hep-2中的表达及其意义,为喉癌发生与K-ras点突变的相关性研究奠定坚实的基础。方法采用RT-PCR技术检测K-ras基因mRNA在喉癌细胞株Hep-2和胰腺癌细胞株MIAPaCa-2中的表达。结果人胰腺癌细胞株MIAPaCa-2和人喉鳞状癌细胞株Hep-2中K-ras mRNA表达均为强阳性。结论人喉鳞状细胞癌细胞株Hep-2中K-ras基因表达阳性,喉癌的发生可能与其点突变引起的激活有关。
陈雄孔维佳张苏琳张丹
关键词:HEP-2细胞喉部肿瘤
豚鼠Ⅱ型前庭毛细胞乙酰胆碱敏感性大电导钙依赖性钾通道与L型钙通道共存
2008年
目的研究豚鼠Ⅱ型前庭毛细胞乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)敏感性大电导钙依赖性钾通道(big conductance, calcium-dependent potassium channel, BK) 激活过程中的钙离子内流机制。方法健康杂色豚鼠52只,断头后取出前庭终器,经胶原酶LA消化后获取Ⅱ型前庭毛细胞。采用全细胞膜片钳技术检测新鲜单离的Ⅱ型前庭毛细胞ACh-敏感性BK电流对细胞外钙通道阻断剂和激动剂的敏感性。结果①细胞外ACh激活一缓慢持久的外向性电流,其反转电位为(-70.5±10.6)mV(x±s,下同,n=10);-50mV钳制电压下,100μmol/LACh激活电流的幅值为(267±106)pA(n=11)。②ACh-敏感性钾电流对细胞外IBTX(iberiotoxin,200nmol/L)敏感,而细胞外蜂毒明肽(apamin,1μmol/L)对ACh-敏感性钾电流幅值无抑制作用。③ACh-敏感性BK对细胞外钙通道阻断剂NiCl2敏感,可被细胞外钙通道阻断剂CdCl2强力阻断。NiCl2和CdCl2对ACh-敏感性BK的半数抑制浓度分别为(135.5±18.5)μmol/L(n=7)和(23.4±2.6)μmol/L(n=7)。④L型钙通道激动剂(-)-Bay-K8644激活Ⅱ型前庭毛细胞产生一种与ACh-敏感性BK类似的外向性电流,并能被IBTX强力阻断。结论Ⅱ型前庭毛细胞中ACh-敏感性BK与细胞膜L型钙通道共存,可能具有重要的生理学作用和意义。
郭长凯李冠乔孔维佳张松吴婷婷李家荔李擎天
关键词:毛细胞前庭大电导钙激活钾通道钙通道膜片钳术
u-PA和TGF-β_1在喉癌中的表达及临床意义
2004年
目的探讨u-PA和TGF-β1在喉癌中的表达及其与喉癌生物学行为之间的关系。方法采用SABC免疫组化染色方法检测了84例喉癌与10例正常喉组织中的u-PA和TGF-β1的表达情况。结果在喉癌组织中u-PA的表达水平与临床分期和有无淋巴结转移的相关性有统计学意义(P<0.05),与组织学分型和发生部位的相关性无统计学意义(P>0.05)。在大部分喉癌组织中(89.29%)TGF-β1表达较高,与临床分期和有无淋巴结转移的相关性有统计学意义(P<0.05),但与组织学分型和发生部位的相关性无统计学意义(P>0.05)。此外,u-PA和TGF-β1在喉癌中的表达和在正常喉黏膜中的表达差异均有统计学意义(P<0.05)。结论u-PA和TGF-β1与喉癌生物学行为关系密切,它们的异常表达可能是喉癌发生、发展过程中的一个重要环节。
张丹杨成章孔维佳
关键词:U-PATGF-Β1喉癌生物学行为淋巴结转移
大鼠前庭神经内侧核神经元的放电特性及分类被引量:1
2005年
目的探讨大鼠中耳腔冷热水刺激对前庭神经核神经元放电的影响。方法通过向中耳腔灌注冰水(4℃)、热水(44℃)及温水(37℃),以细胞外记录的方式记录前庭神经内侧核神经元放电频率的改变。结果冷热水刺激可引起该前庭神经元的不同变化,其中热水刺激兴奋、冷水刺激抑制的神经元类型最多(A型),刺激停止后神经元放电很快恢复。结论冷热水刺激可引起前庭神经元放电频率的改变,不同神经元的反应各不相同。
汪绪武孔维佳
关键词:前庭神经核电生理
大鼠血管纹边缘细胞的原代培养及IsK的表达被引量:10
2004年
目的 为进一步研究内淋巴生成的可能机制以及影响因素,提供可供研究的大量实验材料—边缘细胞(marginal cell, MC),建立大鼠来源的MC 的原代培养体系。方法  利用大鼠耳蜗的侧壁组织作为组织块种植培养。从第2天开始每日倒置显微镜观察,选特征性的表现照相。经选择性消化、差异性贴壁等方法抑制FLC 生长,纯化MC。经过MC 的形态、生长特征的观察;细胞角蛋白18、波形蛋白的免疫细胞化学;扫描及透射电镜;RT-PCR 检测IsK 蛋白mRNA 的表达等方法鉴定MC。  结果  新鲜组织块淡黄、透明,可见丰富的毛细血管网;但血管纹结构致密,倒置显微镜下不易分辨不同细胞的轮廓。MC 从组织块迁移出来多在培养第2 天,呈多角形外观、核大而圆、颜色较暗淡,细胞之间连接紧密,形成上皮单层时呈“铺路石样”外观。FLC 呈梭形,呈“鱼群样”包绕MC 生长,增殖速度快于MC。由纯化的MC 构成的上皮单层表面可见由成百上千个MC 包绕液体而成的dome,这提示MC 净向的跨上皮转运功能。原代MC 表达细胞角蛋白和波形蛋白,微绒毛丰富、细胞间连接提示其上皮起源。IsK 蛋白mRNA 的表达证实了培养上皮细胞的MC 起源。结论  离体培养的耳蜗边缘细胞具有与其在体相同的形态及生理特征。MC 原代培养体系的建立,可为进一步探讨边缘细胞的生?
孔维佳陈敏李隽
关键词:原代培养基因表达边缘细胞波形蛋白SVMC
豚鼠耳蜗血管纹边缘细胞钾离子通道特性的研究被引量:1
2007年
目的研究单个豚鼠耳蜗血管纹边缘细胞的基本电生理特性。方法应用耳蜗血管纹组织块培养技术和全细胞膜片钳技术,观察单个培养的豚鼠血管纹边缘细胞在电压钳模式下的电流特性。结果边缘细胞上记录到钾离子电流,该钾通道有以下特性:①具有电压依赖性;②通道的活动可被4-氨基吡啶(4-aminopyridine,4-AP)和四乙铵(tetraethylammonium,TEA)在相对高浓度下阻滞;③细胞外钙离子浓度的减少可导致该钾通道电流的降低。结论豚鼠耳蜗血管纹边缘细胞钾离子通道电流包括钙离子依赖性钾电流、外向延迟整流钾电流和A型钾电流。
吴婷婷孔维佳姚琦李隽郭长凯李之望
关键词:血管纹边缘细胞钾通道膜片钳
大鼠血管纹边缘细胞永生细胞系的建立被引量:2
2007年
目的建立大鼠血管纹边缘细胞(Marginal Cells,MC)的永生细胞系,为进一步研究MC的功能打下基础。方法取3~5日龄大鼠的耳蜗侧壁组织进行MC的原代培养,经选择性消化、差异性贴壁等手段纯化MC后,将MC和SV40在无血清DMEM条件下共培养三天,经2%新生牛血清选择培养三天,通过形态学的变化及增殖能力的变化粗筛出MC系;通过观察MC系的形态、生长特征,细胞角蛋白18、波形蛋白的免疫细胞化学,RT-PCR检测SV40T抗原、IsK,细胞记数法及流式细胞术分析其生长情况及染色体倍型,软琼脂培养、裸鼠致瘤实验等鉴定MC-C3系。结果MC-C3系基本保持了原代MC的表型特征:多角形外观、细胞间连接紧密,单层时呈“铺路石样”外观,dome形成能力等形态、生长特征;细胞角蛋白18、波形蛋白表达双阳性;不同世代的MC-C3均有SV40T抗原、IsK的表达。MC-C3为二倍体细胞。软琼脂培养和裸鼠致瘤实验阴性。该系目前已培养5月,超过20代,传代时间为4~5天,传代比例为1:2~3。液氮中保存有不同世代的细胞。结论本实验成功的建立了大鼠边缘细胞的永生细胞系,初步鉴定表明MC-C3基本保留了原代边缘细胞的表型特征,又不具有瘤细胞的特征。为边缘细胞功能的研究,特别是电生理、分子生物学方面的研究打下了良好的基础。
陈敏孔维佳
关键词:边缘细胞永生细胞系
大鼠前庭内侧核γ-氨基丁酸受体mRNA的表达
2005年
汪绪武孔维佳
关键词:RT-PCRΓ-氨基丁酸前庭内侧核受体
凋亡抑制蛋白Survivin和血管内皮生长因子高表达是喉鳞状细胞癌生存预后的独立预测因子(英文)
2008年
Objective: To study the relationship between Survivin and VEGF proteins in a subgroup of patients with squa-mous carcinoma of larynx. Methods: 108 cases of squamous carcinoma of larynx with clinical data were collected and expressions of Survivin and VEGF in peripheral blood were investigated by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Results: Expressions of Survivin and VEGF were significantly associated with T stage, N stage and metastasis of squamous carcinoma of larynx. The patients with Survivin or VEGF over-expressions presented lower survival rate, respectively, as compared to those of low-expression (P < 0.05). The survival rate in squamous carcinoma of larynx patients with Survivin and VEGF dual over-expressions was significantly lower than that of patients with dual low-expression (P < 0.05). Multivariate analysis indicated that both Survivin and VEGF over-expressions in squamous carcinoma of larynx peripheral blood samples were strong independent factors of poor prognosis in squamous carcinoma of larynx patients. Conclusion: Survivin and VEGF over-expressions are independent prognostic factors for the patients with squamous carcinoma of larynx. These results also suggest that peripheral blood Survivin and VEGF expressions are valuable prognostic markers for prognosis prediction in squamous carcinoma of larynx patients.
Rong Luo Weijia Kong Yanjun Wang
共2页<12>
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