国家自然科学基金(30070804)
- 作品数：9 被引量：295H指数：7
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- γ-干扰素对培养人结膜上皮细胞及泪腺上皮细胞的影响被引量：2
- 2003年
- 张梅陈家祺郑健樑肖启国张志红刘祖国
- 关键词：Γ-干扰素IFN-Γ结膜上皮细胞细胞凋亡炎性损伤
- 多西环素对培养的人结膜上皮细胞炎性反应及凋亡的影响被引量：7
- 2005年
- 目的探讨多西环素对体外培养的人结膜上皮细胞细胞黏附分子1(ICAM1,CD54)、人类白细胞抗原DR(HLADR)、白细胞介素1β(IL1β)表达及凋亡的影响。方法混合消化液培养法培养人结膜上皮细胞,免疫组织化学方法进行细胞鉴定。培养至第3代或第4代,在细胞培养液中分别加入γ干扰素(IFNγ)0U/ml、IFNγ300U/ml、IFNγ300U/ml+多西环素10μg/ml、IFNγ300U/ml+多西环素20μg/ml、IFNγ300U/ml+多西环素40μg/ml、IFNγ300U/ml+地塞米松100μg/ml,24h后收集细胞,流式细胞学检测CD54、HLADR及IL1β的表达,Westernblot检测CD54的表达。72h后收集细胞,碘化丙啶(PI)染色,流式细胞学检测凋亡。结果培养的正常人结膜上皮细胞可以表达少许CD54和IL1β,加入IFNγ后表达明显增加,加入多西环素和地塞米松后CD54和IL1β的表达下降(P<0.01)。随着所加多西环素浓度的增加,CD54和IL1β的表达逐渐降低(P<0.01)。培养的正常人结膜上皮细胞未发现明显的HLADR的表达及凋亡的产生,加入IFNγ及多西环素后HLADR的表达及凋亡水平无明显变化(P>0.05)。结论多西环素可抑制培养的正常人结膜上皮细胞CD54和IL1β等炎性相关因子的产生,提示多西环素对干眼等非感染性眼表炎性疾病的治疗可能具有一定的应用前景。
- 肖启国刘祖国张梅郑健樑张志红罗丽辉陈家祺
- 关键词：多西环素细胞培养结膜上皮细胞炎性反应
- 干眼患者结膜上皮细胞的凋亡与炎症被引量：24
- 2004年
- 目的了解干眼患者结膜上皮细胞是否存在凋亡与炎症状态,进一步理解干眼的发病机制。方法印迹细胞法获得干眼6例22眼和正常人7例10眼的结膜上皮细胞。Annexin V-FITC/PI流式细胞技术(flow cytometric.FCM)定量检测凋亡;免疫印迹细胞化学染色检测核转录因子-kB(NF-kB)和转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达。结果干眼患者结膜上皮细胞的凋亡指数较正常对照组明显增高(P<0.05),NF-kB和TGF-β1的表达较正常增强。凋亡指数与NF-kB和TGF-β1的表达呈正相关。结论干眼患者结膜上皮存在细胞凋亡及炎症,眼表上皮细胞的炎症可能是引起细胞凋亡的重要原因,抑制炎症是干眼的重要治疗方法。
- 罗丽辉刘祖国林建贤张梅张志红肖启国陈家祺
- 关键词：干眼病结膜上皮细胞炎症流式细胞技术
- γ-干扰素对培养人原代结膜及泪腺上皮细胞表达炎症相关因子的影响被引量：3
- 2003年
- 目的 了解γ-干扰素(γ-IFN)对体外原代培养的人结膜上皮细胞及泪腺上皮细胞的细胞间粘附分子(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1,CD54)、白细胞介素-1β(interl-eukin-1β,IL-1β)和白细胞介素-1受体1(interleukin-1 receptor1,IL-1R1)表达的影响,以初步探讨γ-IFN对人结膜及泪腺上皮细胞炎症损伤的作用。方法 混合消化液培养法获得人原代结膜上皮细胞,组织块培养法获得人泪腺上皮细胞,免疫组织化学方法鉴定。在细胞培养液中加入γ-IFN,浓度分别为0、30、100、300U·mL^(-1),37℃培养24h后收集细胞,应用流式细胞学及Western blot检测CD54的表达,Western blot检测IL-1β及IL-1R1的表达。结果 在γ-IFN浓度分别为0、30、100及300U·mL^(-1)条件下,结膜上皮细胞表达CD54的平均荧光强度为4.67、24.1、27.4及31.9;泪腺上皮细胞表达CD54的荧光强度分别为2.50、10.2、21.4及25.6。Western blotting的结果与流式细胞仪检测的结果相符,正常人结膜和泪腺上皮细胞有少量CD54表达,加入IFN-γ后CD54的表达增加,且呈剂量依赖性。Western blot的结果显示正常人结膜上皮细胞有少量IL-1R1表达,加入γ-IFN后IL-1β及IL-1R1的表达明显增加,且呈剂量依赖性,泪腺上皮细胞未检出IL-1β及IL-1R1的表达。结论 γ-IFN可?
- 张梅刘祖国陈家祺郑健樑肖启国张志红
- 关键词：结膜泪腺
- 超声乳化术后结膜上皮细胞中核转录因子-_kB和转化生长因子-β1的表达变化被引量：9
- 2002年
- 目的 研究超声乳化术后结膜上皮细胞中转化生长因子-β1（TGF-β1）和核转录因子-кB（NF-кB）的表达变化,探讨影响超声乳化术后泪膜变化的机制。方法 对老年性白内障患者26例（26只眼）,分别于术前,术后14和30天采用印痕细胞学和免疫组织化学染色检测结膜上皮细胞中TGF-β1和NF-кBp65的表达,并行泪液分泌（Schirmer Ⅰ）试验和泪膜破裂时间（BUT）检查,荧光素染色和泪河高度测量。结果 术后14天,Schirmer Ⅰ试验和泪河高度已与术前无明显差异,但BUT明显缩短（P<0.01）,荧光素染色明显增多（P<0.01）,NF-кB和TGF-β1的表达也明显增强。术后30天各指标均与术前无明显差异,但有6例泪膜未恢复的患者其NF-кB和TGF-β1的表达也未恢复到术前。NF-кB和TGF-βl的表达程度与角膜荧光素染色程度呈正相关。结论 超声乳化白内障摘出术可影响泪膜的稳定性,这与术后眼表面上皮的炎症和增生,尤其是炎症水平的增强密切相关。
- 罗丽辉刘祖国林健贤张振平刘奕志林振德郑丹莹陈伟蓉杨文辉张梅肖启国陈家祺
- 关键词：超声乳化术结膜上皮核转录因子
- 正常人角膜神经的共焦显微镜观察被引量：24
- 2004年
- 张梅刘祖国陈家祺罗丽辉孙明霞陈龙山黄挺王智崇
- 关键词：角膜上皮正常人共焦显微镜检查感觉神经
- 眼表上皮疾病的基础与临床研究进展被引量：9
- 2011年
- 针对眼表上皮疾病的基础及临床方面进行了系统研究,包括角膜上皮干细胞的生理,眼表免疫,眼表上皮细胞黏蛋白表达及功能,眼表鳞状上皮化生的发病机制,干眼的诊断与治疗,角膜组织工程,新生血管性眼病的发生机制与治疗等,并在这些方向取得了一系列研究成果.
- 刘祖国刘靖陈文生李炜
- 关键词：眼表
- 超声乳化白内障吸除术后泪膜的变化被引量：202
- 2002年
- 目的 了解超声乳化白内障吸除术对泪膜的影响。方法 随机抽取行超声乳化白内障吸除术的老年性白内障患者 6 8例 (79只眼 ) ,分别于术前 ,术后 1、2、7、14、30及 180d行泪膜破裂时间(breakuptime ,BUT)、基础泪液分泌试验 (SchirmerⅠtest,SⅠt)、角膜荧光素染色、干眼仪检查及下睑中央泪河高度检查。结果 与术前相比 ,术后 1及 2d ,BUT明显缩短 ,SⅠt、下睑中央泪河高度、角膜荧光素染色程度及干眼仪检查等级明显增高 (P <0 0 1) ;术后 7d时SⅠt,14d时下睑中央泪河高度 ,30d时BUT、角膜荧光素染色程度和干眼仪检查等级恢复至术前水平 ,与术前比较差异无显著意义(P >0 0 5 )。术后 30d ,19 3%的患眼泪膜未能恢复至术前水平 ;术前泪膜正常的患者中 1/9发生干眼。术后 1、7、14及 30d ,术前BUT <10s的术眼BUT <5s的发生率高于术前BUT≥ 10s的术眼(P <0 0 5 ) ;术后 14、30及 180d ,术前角膜荧光素染色评分 >2分的术眼术后角膜荧光素染色评分 >2分的发生率高于术前角膜荧光素染色评分≤ 2分的术眼 (P <0 0 5 ) ;术后 14d ,术前干眼仪检查等级≥Ⅲ级的术眼术后干眼仪检查等级≥Ⅲ级的发生率高于术前干眼仪检查等级 <Ⅲ级的术眼(P <0 0 5 )。结论 超声乳化白内障吸除术可影响泪膜的稳定性 。
- 刘祖国罗丽辉张振平程冰郑丹莹陈伟蓉林振德杨文辉刘奕志张梅肖启国陈家祺
- 关键词：超声乳化白内障吸除术干眼病泪膜破裂时间角膜荧光素染色
- 干眼仪在干眼诊断中的价值初步评价被引量：27
- 2003年
- 目的 :评价干眼仪对干眼的诊断价值。方法 :对 2 5例 (2 5只眼 )正常人和 3 5例 (3 5只眼 )干眼患者分别行泪膜破裂时间 (BUT)、泪液分泌试验 (SchirmerI)、角膜荧光素染色 (FL)、干眼仪检查和泪高度测量五项检查。结果 :干眼患者的干眼仪检测等级与正常人差异显著 (χ2 =3 2 2 2 ,P =0 0 0 0 )。干眼仪诊断干眼的特异度为 80 % ,灵敏度为83 %。干眼仪检查为Ⅲ级脂质层形态图像者患干眼的机率约为 75 % (15 / 2 5 )。干眼患者的干眼仪检测等级越高 ,BUT和SchirmerI试验越短 (r =-0 783 ,-0 3 68,P =0 0 0 0 ,0 0 15 ) ,角膜荧光素染色越多 (r =0 80 6,P =0 0 0 0 ) ,而与泪河高度无相关 (P =0 178)。正常人的干眼仪检测等级也与BUT和SchirmerI试验呈负相关 (r =-0 3 98,-0 65 6,P =0 0 2 4,0 0 0 0 )。干眼患者的干眼仪显示图像的稳定性较正常人差。干眼仪的检查结果具有较高的重复性。结论 :干眼仪能较直观地观察角膜中央脂质层的光干涉图像 ,是一种快速、无创伤、重复性强、操作简单的检查方法。对干眼的诊断及客观反映病情的严重程度具有临床应用价值。
- 刘祖国罗丽辉程冰张振平张梅肖启国王智崇黄挺陈家祺张志红
- 关键词：干眼角膜荧光素染色泪液分泌试验
