四川省“十一五”农作物及畜禽育种攻关项目(200607001)
- 作品数：6 被引量：22H指数：3
- 相关作者：王茂林赵云王志君高勇薛华更多>>
- 相关机构：四川大学中国科学院成都生物研究所更多>>
- 发文基金：四川省“十一五”农作物及畜禽育种攻关项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 甘蓝型油菜ADP-核糖基化因子基因全长cDNA克隆及表达分析被引量：2
- 2008年
- 【目的】克隆甘蓝型油菜(Brassica napus L.)矮化突变体"NDF-1"和野生型近等基因系亲本"3529"中ADP-核糖基化因子(ADP-ribosylation factor,ARF)基因全长cDNA,分析矮化突变体中该基因在不同组织中的表达水平,探讨矮化突变体中该基因在甘蓝型油菜茎杆发育过程中的作用。【方法】采用SSH(suppression subtractive hybridization)、RACE(rapid-amplification of cDNA ends)和RT-PCR技术,克隆甘蓝型油菜矮化突变体"NDF-1"和野生型"3529"中的ARF基因的全长cDNA序列。分别采集甘蓝型油菜野生型和矮化突变型苗期子叶、薹期根、茎尖和真叶,采用相对定量PCR方法检测矮化突变体中该基因的表达。【结果】获得了甘蓝型油菜矮化突变体"NDF-1"和野生型"3529"的ARF基因的全长cDNA,分别命名为BnARF和BnARF-h。序列分析表明:这两个基因长度分别为837和802 bp,都含有546 bp的完整开放阅读框(ORF),编码181个氨基酸,与其它植物、动物和酵母的ARF基因有很高的相似性。BnARF基因在野生型和矮化突变体的根、子叶、茎尖和真叶中均有表达,其中在子叶中表达量最高,真叶中次之,根和茎尖中的表达量最少。同时BnARF在矮化突变体的根、子叶和茎尖中的表达量都显著低于野生型,但在真叶中表达量相近。【结论】克隆了甘蓝型油菜矮化突变体"NDF-1"和野生型"3529"中ADP-核糖基化因子基因的全长cDNA,这两个ARF基因的序列上有两处碱基存在差异,其中一处是错义突变,推测这一突变可能与植株矮化有关。而BnARF基因在野生型和矮化突变体的根、子叶和茎尖的表达存在显著性差异,可能参与了甘蓝型油菜的矮秆发育过程。
- 刘薇赵云安金玲王茂林
- 关键词：甘蓝型油菜
- 甘蓝型油菜半胱氨酸蛋白酶cDNA的克隆及组织特异性表达分析被引量：6
- 2008年
- 采用SSH(Suppression subtractive hybridization)和Race-PCR(Rapid-amplification of cDNA ends)技术克隆得到来自甘蓝型油菜(Brassica napus L.)矮化突变体‘NDF-1’的一个差异表达基因编码区的全长cDNA序列,命名为Bncp5.该基因全长1224bp,含有1080bp的完整开放阅读框,编码359个氨基酸.该基因编码区与甘蓝中一个与衰老相关的半胱氨酸蛋白酶基因(登录号AF454960)同源性达97%,氨基酸序列同源性达到100%.Bncp5编码的蛋白相对分子质量为39.5×103,等电点为5.57.对其活性位点的分析表明其具备真核生物半胱氨酸蛋白酶的活性中心,且有很高的功能区段保守性,推测为一跨膜蛋白.相对定量PCR的检测结果表明,Bncp5在野生型和矮化突变体的根、茎、子叶和真叶中都有表达,但是表达量存在显著性差异.在野生型高秆油菜中,根的表达量最低,在真叶的表达量最高;在矮化突变体中,根、茎中的表达明显高于野生型,而在子叶和真叶中的表达量与野生型油菜的表达量基本一致.
- 张红岩薛华马欣荣赵云王茂林
- 关键词：甘蓝型油菜矮化突变体半胱氨酸蛋白酶衰老
- 油菜矮秆突变WRKY转录因子cDNA克隆及表达分析被引量：8
- 2008年
- 以甘蓝型油菜为材料,利用已建立的抑制性消减文库(SSH),采用RACE技术克隆到1个植物WRKY转录因子相关基因,命名为BnD11,其cDNA全长1034 bp,含有810 bp的完整开放阅读框,编码269个氨基酸。该基因编码的氨基酸序列与拟南芥WRKY40氨基酸序列相似性为79%,与拟南芥中编码WRKY-DNA结合蛋白40基因的氨基酸序列相似性达78%,与其它多种植物的WRKY转录因子的氨基酸序列也有较高的相似性。半定量RT-PCR对BnD11进行组织特异性表达分析显示:在正常生长条件下,BnD11在野生型和矮秆油菜的各个组织中均有表达,但在矮秆突变的根、茎、茎尖的相对表达量明显高于野生型。研究表明,BnD11功能区段具有很高的保守性,可能参与了油菜的茎秆发育。
- 薛华张红岩李小艳赵云王茂林
- 关键词：甘蓝型油菜WRKY转录因子RT-PCR矮秆
- 油菜一个WRKY基因对盐胁迫和干旱胁迫的表达响应被引量：9
- 2010年
- 以抗性不同的3个油菜品系为材料,半定量RT-RCR方法检测油菜叶片WRKY转录因子家族的BnD11基因在高盐和干旱胁迫下的表达情况.高盐和干旱胁迫6 h后BnD11基因表达量即有明显调高,在抗性最强的‘862’品系中表达量增加幅度最高,而在抗性最弱的‘1821’品系中表达量增加幅度最少.结果表明BnD11基因表达量与油菜品系抗性强度具有明显正相关性,可能在油菜抗(耐)盐和干旱的生理过程中具有重要作用.
- 王景娜高勇安金玲王志君王茂林
- 关键词：油菜WRKY基因半定量RT-PCR丙二醛
- 甘蓝型油菜BnD11基因过量表达载体的构建及遗传转化被引量：1
- 2011年
- 构建了BnD11过量表达载体pFGC5941-BnD11,转化甘蓝型油菜"1821"品系获得转基因植株.半定量RT-PCR分析显示转基因植株中BnD11基因的表达量有显著提高,盐胁迫实验结果初步显示,转基因油菜抗性得到提高.
- 王志君王景娜李帅高勇王茂林
- 关键词：WRKYMDA
- 甘蓝型油菜短花序突变的同工酶与SSR分子标记
- 2011年
- 对甘蓝型油菜(Brassica napus L.)短花序突变株系"M112"的不同时期野生型、突变体亲本及F_1代不同器官的过氧化物同工酶(POD)进行遗传分析,并对随机选取的60株具有突变性状的苗期F_2代群体的茎进行过氧化物同工酶(POD)分析.结果表明:野生型和突变体亲本在茎部POD电泳图谱R_f 0.264处条带具有稳定的差异,所选的60株F_2代群体中有56株的带型与突变体亲本相同,说明短花序突变性状与上述POD特征酶谱连锁紧密,并可以稳定遗传.同时选取F_2代具有突变性状植株303株作为该突变基因的SSR分子标记分析群体,最终从分布于甘蓝型油菜19个连锁群的121个SSR标记中筛选到了标记Na12-C06,标记与该突变位点连锁较紧密,遗传距离为9.8cM.
- 张庙见左丽娟高勇王志君刘冠财王茂林
- 关键词：过氧化物酶同工酶连锁群SSR标记
