高等学校科技创新工程重大项目(706050)
- 作品数：40 被引量：142H指数：9
- 相关作者：汪铭书程安春陈孝跃贾仁勇朱德康更多>>
- 相关机构：四川农业大学动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川大学更多>>
- 发文基金：高等学校科技创新工程重大项目教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 鸭胆汁中高纯度分泌型免疫球蛋白A制备被引量：1
- 2009年
- 目的:从鸭胆汁中分离纯化分泌型免疫球蛋白A(SIgA)。方法:采用饱和硫酸铵和不同浓度聚乙二醇PEG-6000沉淀法和Micro-Prep S离子交换法从鸭胆汁中提取SIgA。SIgA的纯度和活性经SDS-PAGE和ELISA法检测并进行比较。结果:建立了从鸭胆汁中分离纯化高纯度SIgA的方法。结论:用终浓度15%的PEG-6000沉淀法可从鸭胆汁中获得电泳纯的SIgA,其产量最高,活性最好。
- 杨晓燕周霞汪铭书齐雪峰程安春
- 关键词：SIGA硫酸铵聚乙二醇
- 基因枪轰击注射鸭α-干扰素基因疫苗对免疫鸭抗鸭瘟强毒感染的影响
- 2007年
- 将鸭α-干扰素基因疫苗pcDNA-SDIFN-α分别按每只1、3和6μg剂量采用基因枪轰击方式免疫樱桃谷鸭,以PBS、空载体质粒pcDNA 3.1(+)和鸭瘟弱毒疫苗为对照,注射后第15 d给每只鸭人工感染鸭瘟强毒。结果显示,1μg pcDNA-SDIFN-α免疫鸭有3/12死亡,PBS和空载体注射鸭分别有5/12和4/12死亡;3μg和6μg pcDNA-SDIFN-α免疫鸭以及鸭瘟弱毒疫苗免疫鸭100%受到保护。3个剂量pcDNA-SDIFN-α免疫鸭外周血鸭瘟病毒DNA含量显著低于PBS和空载体对照组,而3个pcDNA-SDIFN-α免疫组之间差异不显著。表明,基因枪轰击pcDNA-SDIFN-α免疫鸭后能产生一定的抗鸭瘟强毒感染的作用。
- 周雪程安春汪铭书杨梅段坤卢菲程志萍刘闯陈孝跃陈斌
- 关键词：基因枪鸭瘟病毒
- 疱疹病毒UL31基因及其编码蛋白研究进展
- 2009年
- 疱疹病毒是一类有囊膜的双链DNA病毒,基因组由长节段(L)和短节段(S)组成。UL31基因是基因组独特UL序列中的一个核心基因,具有典型的开放阅读框架,编码一种磷酸化蛋白。该蛋白与UL34蛋白相互作用,定位于细胞核边缘,与病毒核衣壳初期包膜形成有关,对病毒DNA的合成、包装和释放也有一定的作用。本文就UL31基因及编码蛋白的结构特点和基本功能等研究进展进行总结,以期为疱疹病毒UL31基因的深入研究提供指导。
- 谢伟程安春汪铭书
- 关键词：疱疹病毒
- 病毒dUTPase研究进展
- 脱氧尿苷焦磷酸酶(dUTP pyrophosphatasc,dUTPasc)广泛存在于真核、原核细胞和病毒等生物有机体中,通过催化水解脱氧尿苷三磷酸(dUTP),减少尿嘧啶在 DNA 合成中的错误掺入,降低细胞中的 dU...
- 招丽婵程安春汪铭书袁桂萍
- 关键词：DUTPASE生物学功能病毒增殖
- 文献传递
- 鸭肠炎病毒CHv强毒株超微结构研究被引量：6
- 2007年
- 将鸭成纤维细胞培养的鸭肠炎病毒（DEV）,经超声处理、高速冷冻差速离心后,采用酒石酸钾-甘油非线性密度梯度超速离心,收集病毒蛋白带,3%磷钨酸负染后观察病毒粒子形态。结果表明：病毒粒子主要集中在40%-50%酒石酸钾-甘油缓冲液交界层。电镜下,病毒粒子纯净,具有疱疹病毒典型形态结构,剖面六角,外观轮廓清楚。成熟病毒粒子直径约150-266nm,病毒囊膜、核衣壳和核心清晰可见;囊膜外层较内层着色略深,且可见尚未形成完整囊膜的柄状拖尾结构。多数病毒粒子以单核衣壳为主,一定数量的病毒具有双核衣壳,偶见三核衣壳,核衣壳直径为100-150nm,呈现致密圆形、半圆形或马蹄形等类型。在核衣壳外和囊膜之间可见明显的亮晕。核心DNA电子染色较深,集中分布,直径40-65nm。本文获得的清晰DEV负染超微结构照片,为该病毒结构生物学的研究提供了重要依据。
- 贾仁勇程安春汪铭书郭宇飞文明徐超袁桂萍周伟光周毅陈孝跃
- 关键词：鸭肠炎病毒超微结构
- 鸭瘟病毒UL24基因的分子特征分析被引量：1
- 2009年
- 根据本实验室获得的鸭瘟病毒的一段基因序列设计引物，利用PCR扩增UL24基因并克隆到pMD18-T载体，阳性重组质粒进行酶切鉴定、测序验证与生物信息学分析。结果显示，获得的UL24基因全长1230bp，编码409个氨基酸；与其他26株疱疹病毒科中α-疱疹病毒亚科的UL24基因的相似性较β和γ亚科高，其中与α亚科禽疱疹病毒属中的GaHV-3相似性最大（34．7％）；遗传进化树显示，该基因编码的蛋白与火鸡疱疹病毒的UL24蛋白的亲缘性最近。该蛋白是一种保守但不含信号肽的外膜蛋白，具有5个潜在的N-糖基化位点和19个磷酸化位点；编码的氨基酸Ala，Apn，Glu，Phe，Leu，Arg，Thr，Val具有一定的偏嗜性。二级结构分析显示，α螺旋和无规卷曲含量高，均达46．94％，而口折叠仅占6．11％；同源建模比对，未发现与之匹配的三级结构；预测的抗原表位主要位于肽链第36～48、241～323、344～379位区段。
- 贾仁勇程安春汪铭书葛菡朱德康信洪一齐雪峰陈孝跃
- 关键词：鸭瘟病毒分子特征生物信息学分析
- 鸭瘟病毒gC基因的克隆及其分子特性分析被引量：9
- 2008年
- 对已构建的鸭瘟病毒(DPV)DNA文库重组质粒测序后,运用ORF Finder、BLASTN等工具进行全面生物信息学分析,根据分析结果设计引物,以DPV DNA为模板进行PCR扩增和T克隆,获得完整基因,经测序和探针核酸斑点杂交进行验证。结果证实,获得的完整ORF片段(ORF1296)为DPV的gC基因(GenBank登录号EU076811),全长1 296 bp,与已报道的其他疱疹病毒gC基因具有较高的同源性,它编码432个氨基酸,蛋白分子质量为45 ku、等电点(PI)为5.292,具有疱疹病毒典型I型膜蛋白结构特征。gC基因进化树分析表明,DPV与α-疱疹病毒亚科的鸟源疱疹病毒亲缘关系最近,编码的gC蛋白多为柔性区域,富含无规卷曲,含少量α-螺旋和β-折叠,氨基酸序列的第21～24、50～58、67～70、161～171、273～281、387～393位最有可能为抗原表位。此结果为进一步开展DPV gC基因及其编码蛋白的深入研究提供了有用数据。
- 徐超李欣然信洪一练蓓程安春汪铭书朱德康贾仁勇罗启慧陈孝跃
- 关键词：鸭瘟病毒GC基因克隆分子特性
- 鸭瘟病毒的纯化及电镜负染形态观察被引量：11
- 2008年
- 先做切向超滤浓缩，再采用蔗糖垫底超速离心和蔗糖密度梯度超速离心的方法对鸭胚成纤维细胞培养物中的鸭瘟病毒进行纯化，并对纯化的病毒粒子用电镜进行了观察。结果显示，用切向超滤法将病毒培养物浓缩为原体积的1／5后，再采用300g／L蔗糖垫底超速离心和300-600g／kg蔗糖密度梯度离心的方法进行纯化，可获得大量的纯化病毒粒子。电镜负染观察结果表明，病毒粒子呈圆形，多数直径为150nm左右，只有1个核衣壳，少数病毒粒子直径可达300nm，有2个或多个核衣壳。
- 郭宇飞程安春汪铭书周毅
- 关键词：鸭瘟病毒鸭胚成纤维细胞纯化
- 鸭瘟病毒VP26基因克隆和分子特性分析被引量：1
- 2009年
- 利用作者实验室已构建的DPV CHv株基因文库重组质粒的DNA测序信息,结合NCBI的ORF Finder和BLAST工具分析得到了编码该病毒VP26蛋白基因(UL35)的ORF,然后采用PCR扩增出了VP26基因并将其克隆到pMD18-T载体上,经PCR和酶切鉴定以及进一步的核酸斑点杂交试验证实该基因即为DPV的VP26基因。分子特性分析表明:该基因大小为354 bp,编码117 aa,包含1个保守结构域,为Herpes_UL35,与小衣壳蛋白家族相关并在Herpes_UL35基因编码蛋白之间高度保守,而且DPVVP26蛋白与GenBank上多种α疱疹病毒同源蛋白的核酸和氨基酸序列具有较高的同源性。系统进化树分析表明,DPV在分类地位上归属于Alphaherpesvir-us亚科,而且有可能属于新的属。另外,亚细胞定位分析表明,VP26主要定位于细胞核中。密码子偏爱性分析结果显示,编码VP26相同氨基酸的不同密码子使用频率有较大的差异,DPV VP26与大肠杆菌、酵母和人的密码子使用偏爱性差异分别有18、19和25个。上述研究结果为进一步研究DPV VP26蛋白的功能和作用机理提供分子生物学依据。
- 蔡铭升程安春汪铭书朱德康罗启慧招丽婵陈孝跃
- 关键词：鸭瘟病毒克隆分子特性
- 病毒dUTPase研究进展被引量：3
- 2008年
- 脱氧尿苷焦磷酸酶(dUTP pyrophosphatase,dUTPase)广泛存在于真核、原核细胞和病毒等生物有机体中,通过催化水解脱氧尿苷三磷酸(dUTP),减少尿嘧啶在DNA合成中的错误掺入,降低细胞中的dUTP/dTTP比例,保证DNA复制的正确性和顺利进行。病毒编码的dUTPase具有种属特异性,且与病毒的毒力和高效复制密切相关。本文就dUTPase的生物学功能、分类特征、表达调控、分布定位及病毒dUTPase功能的研究进展进行了概述,为深入开展dUTPase功能研究提供理论基础。
- 招丽婵程安春汪铭书袁桂萍
- 关键词：DUTPASE生物学功能病毒增殖
