高等学校科技创新工程重大项目(706057)
- 作品数：19 被引量：34H指数：4
- 相关作者：王玉炯徐广贤贾浩李敏张艳更多>>
- 相关机构：宁夏大学北京大学内蒙古农业大学更多>>
- 发文基金：高等学校科技创新工程重大项目国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学环境科学与工程更多>>
- 4种检测超广谱β-内酰胺酶方法的比较被引量：4
- 2009年
- 以头孢噻肟、头孢他啶、头孢曲松和氨曲南为指示底物,用双纸片协同实验、纸片表型确证实验、三维实验和E-test法4种方法检测45株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)阳性和59株产ESBLs阴性的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌.结果发现,4种方法的敏感性依次为95.56%,97.78%,93.33%,97.78%,特异性依次为96.61%,100.00%,98.31%,100.00%;头孢噻肟为宁夏地区用于检测ESBLs的最适指示底物;纸片表型确证实验和E-test法是4种检测方法中用于检测产ESBLs较可靠的方法,用三维实验检测产ESBLs菌株适合标本量较少的小型医院,双纸片协同实验和纸片表型确证实验在所有医院都适用.
- 杜军李敏崔景荣朱永红王玉炯
- 关键词：超广谱Β-内酰胺酶大肠埃希菌肺炎克雷伯菌
- 牛肺泡巨噬细胞微小RNA的克隆与鉴定被引量：8
- 2009年
- MicroRNA（mi RNA）是一类长19-26个核苷酸的内源性非编码单链小分子RNA,其异常表达将会导致生理的异常和疾病的产生。为了研究mi RNAs在牛肺泡巨噬细胞抗菌机制中的作用,构建了牛肺泡巨噬细胞mi RNAcDNA文库,从438个克隆中筛选出22个mi RNAs,其中有19个mi RNAs在牛的mi RBase数据库中没有发现,但是有8个mi RNAs与人和（或）鼠中的序列完全同源,因此,将它们命名为Bta-mi R-141、Bta-mi R-187、Bta-mi R-191、Bta-mi R-448、Bta-mi R-589、Bta-mi R-873、Bta-mi R-463和Bta-mi R-562;另外有11个mi RNAs在所有mi R-Base数据库中都没有发现,有待进一步研究。这些数据为研究mi RNAs调控牛肺泡巨噬细胞抗菌机制奠定了基础。
- 徐广贤张艳贾浩周萍王玉炯
- 关键词：MICRORNA克隆
- 产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性及基因型研究被引量：4
- 2009年
- 目的了解宁夏地区2所医院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性及ESBLs基因型分布。方法采用微量肉汤法测定分离自宁夏地区两家医院的45株产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对10种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC),通过聚合酶链反应(PCR)法及克隆测序分析其所产生ESBLs的基因型。结果45株菌株对美罗培南全部敏感,对头孢噻肟、奈替米星、氨苄西林、头孢噻吩、头孢曲松、复方磺胺甲噁唑、卡那霉素的耐药率均在64%以上。45株ESBLs菌株有41株产CTX-M型,其中CTX-M-14最多见,其次为CTX-M-28。结论宁夏地区产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌均存在严重的耐药性,ESBLs基因型以CTX-M-14型为主。
- 杜军李敏崔景荣朱永红王玉炯
- 关键词：超广谱Β-内酰胺酶基因型大肠埃希菌肺炎克雷伯菌
- 评价ELISA方法在奶牛结核病检测中的应用被引量：2
- 2009年
- 本实验通过PPD变态反应对ELISA检测结果进行评价,为ELISA方法在牛结核病检测中使用的可行性提供一定的数据支持。
- 周栋周静韩坤李敏谢琴
- 关键词：奶牛牛结核病
- 牛结核分枝杆菌PstS3基因克隆与序列分析被引量：1
- 2010年
- 以牛结核分枝杆菌(Mycobacterium bovis)基因组DNA为模板,克隆PstS3基因,并进行序列测定,然后利用生物信息学软件对其序列进行分析.结果显示,PstS3基因全长1 113 bp,编码370个氨基酸,与GenBank所发表的人结核分枝杆菌PstS3基因的核苷酸同源性为99.82%,氨基酸同源性为99.4%,有1处位点发生有义突变.
- 周晶贾浩徐广贤王玉炯
- 关键词：牛结核分枝杆菌
- 牛结核分支杆菌临床分离株rpsL,rpoB,KatG基因突变分析
- 2009年
- 采用噬菌体生物扩增法对本实验室分离鉴定的25株奶牛结核分支杆菌进行药敏分析,检测出14株耐链霉素、利福平、异烟肼菌株.用PCR扩增耐药株的rpsL基因片段(370 bp)、rpoB基因片段(213 bp)和KatG基因片段(458 bp),并对目的片段进行测序分析,其中5株耐链霉素菌株的rpsL基因在43位点发生突变,均由赖氨酸密码子(AAG)突变为精氨酸密码子(AGG);5株利福平耐药株的rpoB基因在531位点、526位点、511位点发生突变,其中有3株分离株的rpoB基因在531位点发生点突变,1株分离株的rpoB基因在526位点发生突变,1株分离株的rpoB基因在531位点和511位点发生了较为少见的联合突变;4株异烟肼耐药菌株,其中2株在315位点发生碱基突变,2株在463位点发生碱基突变.
- 郭邦成周学章王玉炯
- 关键词：RPSL基因RPOB基因KATG基因
- 牛分枝杆菌溶血磷脂酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达
- 2010年
- 为研究牛分枝杆菌(M.bovis)溶血磷脂酶基因在致病机理中的作用,本研究构建了表达M.bovis的溶血酶(LIP)基因的重组质粒pET30a-LIP,经IPTG诱导在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达,SDS-PAGE分析表明,重组蛋白表达量占菌体总蛋白的20%;该蛋白经电洗脱纯化后,纯度达95%以上;免疫印迹实验表明,原核表达的蛋白可与兔抗牛分枝杆菌多克隆抗体结合,具特异的免疫反应性。
- 徐广贤周晶李娟贾浩王玉炯
- 关键词：牛分枝杆菌原核表达免疫印迹蛋白纯化
- 可降解蒽细菌的分离与生长特性研究
- 2011年
- [目的]为蒽等多环芳烃(PAHs)污染的生物修复提供理论依据。[方法]采用富集培养的方法从污水处理厂的活性污泥中筛选得到蒽降解菌株E12,测定该菌株的生长曲线及其对蒽的降解曲线,并研究不同蒽浓度、初始pH值等对其降解蒽效率的影响。[结果]经初步鉴定,菌株E12属于气微菌属,该菌株可在以蒽为唯一碳源的培养基中生长。蒽初始浓度小于900mg/L时,菌体浓度随蒽浓度的增加而增加,当蒽浓度超过900mg/L后,菌体浓度显著下降;菌株在弱酸性和弱碱性环境中均能生长,但最适生长pH值为6.5;菌悬液接入量对菌体生长也有明显影响,最适接种量为2.0%。[结论]E12菌株降解蒽的最佳条件为:蒽浓度900mg/L,pH值6.5,此条件下培养148h后蒽的降解率可达70.5%。
- 杜军张旭黄琦
- 关键词：多环芳烃生物降解
- 牛结核分枝杆菌MPB70蛋白分泌性载体的构建与蛋白表达被引量：3
- 2010年
- 为了研究牛结核病新型诊断抗原,试验根据GenBank中Mycobacterium bovis基因序列设计1对引物,将牛结核分枝杆菌MPB70基因构建到pET22b(+)原核表达载体上,将重组载体转到E.coliBL21(DE3)中,经IPTG诱导获得高效表达,并进行SDS-PAGE和Westen-blot分析。结果表明:MPB70蛋白以可溶形式在细胞周质中表达,有部分蛋白以包涵体形式在细胞质中表达,其分子质量约为30ku,蛋白表达量占菌体总蛋白的20%;重组MPB70蛋白可与牛分枝杆菌阳性血清发生特异性反应。说明重组MPB70蛋白能够作为诊断抗原。
- 贾浩周晶徐广贤李娟张艳许涛王玉炯
- 关键词：牛结核分枝杆菌MPB70WESTERN-BLOT
- 牛结核分枝杆菌LppA基因克隆与序列分析
- 2009年
- 牛结核分枝杆菌LppA基因是一个编码磷脂蛋白的基因，为了研究牛结核分枝杆菌LppA基因的多态性，试验以牛结核分枝杆菌基因组DNA为模板，克隆LppA基因，并进行序列测定，然后利用DNAMAN软件对其序列进行分析。结果表明：LppA基因全长564bp，编码187个氨基酸，与Gen—Bank所发表的牛结核分枝杆菌LppA基因的核苷酸同源性为99．47％，氨基酸同源性为98．40％，有3处位点发生有义突变。
- 徐广贤李娟李勇王玉炯
- 关键词：牛结核分枝杆菌
