国家自然科学基金(30070869)
- 作品数：12 被引量：67H指数：5
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- 相关机构：上海第二医科大学附属仁济医院上海交通大学医学院附属仁济医院上海交通大学更多>>
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- PPAR_γ配体对人血单核细胞MMPs和TIMPs表达及活性的影响被引量：4
- 2002年
- 目的探讨过氧化物酶体增生物激活受体-γ（PPARγ）配体15d-PGJ2对人血单核细胞基质金属蛋白酶及其内源性抑制物（MMPs和TIMPs）表达及活性的影响。方法 应用RT-PCR和Western blotting测定MMPs、TIMPs的基因和蛋白表达,Zymography测定MMPs活性。结果PPARγ配体15d-PGJ2可明显抑制人血单核细胞MMP-9的表达及其活性,但不影响MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的表达。结论 PPARγ配对15d-PGJ2可抑制人血单核细胞MMP—9的表达及其活性,对减少动脉粥样硬化斑块局部细胞外基质降解、增强斑块稳定性可能起到有益作用。
- 王长谦汤大鸣丁弘毅谢秀兰徐依敏王利民王彬尧黄定九
- 关键词：PPARΓ配体人血单核细胞MMPSTIMPS过氧化物酶体增生物激活受体-Γ
- 高胰岛素状态下巨噬细胞PPARγ抗炎活性的变化被引量：2
- 2006年
- 目的探讨高胰岛素状态下巨噬细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)抗炎活性的变化。方法体外培养THP1细胞,诱导分化为巨噬细胞,采用吡格列酮和不同浓度胰岛素分组干预,ELISA法测定细胞培养上清液中IL6、TNFα、MMP9浓度,GelatinZymography法测MMP9活性。半定量RTPCR、Westernblot检测巨噬细胞PPARγ基因、蛋白表达。结果PPARγ配体吡格列酮(20μmol/L)作用24h可显著降低巨噬细胞IL6(P<0.01)、TNFα、MMP9的分泌(P<0.05),抑制MMP9活性(P<0.05)。高胰岛素使吡格列酮抑制巨噬细胞分泌IL6、TNFα、MMP9的作用减弱,此作用与胰岛素浓度有关,呈浓度依赖性(0.25～0.5μmol/L)。而高胰岛素(0.1μmol/L)状态下巨噬细胞PPARγ基因、蛋白的表达均无显著变化。结论高胰岛素可减弱PPARγ配体抑制巨噬细胞分泌IL6、TNFα、MMP9的作用,但并未对巨噬细胞PPARγ基因、蛋白的表达产生影响,提示胰岛素对PPARγ的活性可能存在抑制。
- 张俊峰葛恒郭炳诗王长谦
- 关键词：胰岛素巨噬细胞炎症
- 过氧化体增殖物激活型受体γ配体抑制巨噬—泡沫细胞炎性介质和基质金属蛋白酶2的分泌被引量：6
- 2006年
- 目的在证实泡沫细胞有过氧化体增殖物激活型受体γ表达的基础上,探讨其配体对巨噬细胞、泡沫细胞炎性介质和基质金属蛋白酶分泌的影响。方法体外诱导THP-1单核细胞分化为巨噬细胞,给予氧化型低密度脂蛋白进一步诱导其转变为泡沫细胞,应用逆转录聚合酶链反应检测过氧化体增殖物激活型受体γmRNA表达;过氧化体增殖物激活型受体γ配体吡格列酮干预后用Western blot检测巨噬细胞CD40蛋白的表达;用酶联免疫吸附测定法测定泡沫细胞培养上清液中白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、基质金属蛋白酶2和9的浓度,Gelatin Zymog-raphy测定基质金属蛋白酶活性。结果巨噬细胞转化为泡沫细胞后其过氧化体增殖物激活型受体γ基因表达无显著变化。吡格列酮可显著抑制巨噬细胞CD40的表达,呈剂量依赖性;显著抑制泡沫细胞白细胞介素6、肿瘤坏死因子α和基质金属蛋白酶9的分泌(P<0.05),抑制基质金属蛋白酶9的活性,对基质金属蛋白酶2的分泌和活性无影响。结论巨噬细胞、泡沫细胞中过氧化体增殖物激活型受体γ基因表达无变化。过氧化体增殖物激活型受体γ配体从多个环节抑制致动脉粥样硬化炎性因子的分泌,减少基质金属蛋白酶的释放并抑制其活性,对防治动脉粥样硬化有利。
- 张俊峰葛恒王长谦邵琴
- 关键词：内科学酶联免疫吸附试验炎性介质基质金属蛋白酶
- PPARγ激动剂筛选模型的建立及其应用被引量：5
- 2006年
- 目的建立一种简便实用的细胞模型,用于筛选过氧化物酶增殖剂激活受体γ(PPARγ)的新配体激动剂。方法在U937细胞中,共转染PPARγ表达和报告质粒,构建PPARγ激动剂筛选模型,单独转染PPARγ报告质粒作为阴性对照。转染细胞中加入候选药物,24h后裂解细胞,测定细胞内报告质粒所表达虫荧光素酶的活性,该活性大小即代表药物激动PPARγ的能力。结果已知的PPARγ配体激动剂吡格列酮使虫荧光素酶活性增强了4.48倍(P<0.001),验证了模型的有效性。高密度脂蛋白(HDL)不能激动PPARγ,而氧化后随剂量增加,使虫荧光素酶活性增强1.33倍(25μg/mL)和1.78倍(50μg/mL),但没有达到统计学差异(P=0.058,P=0.054);白藜芦醇使虫荧光素酶强度增加了1.78倍和2.47倍(P=0.033,P=0.01)。结论通过细胞共转染PPARγ表达质粒和编码虫荧光素酶的报告质粒,可以建立简便的PPARγ激动剂筛选模型。HDL氧化后可能会产生激动PPARγ的成份,而白藜芦醇具有较强的PPARγ激动能力。
- 葛恒张俊峰郭炳诗王彬尧何奔王长谦
- 关键词：白藜芦醇激动剂
- 细胞外基质金属蛋白酶诱导因子在巨噬和泡沫细胞中的表达被引量：12
- 2006年
- 目的观察细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)在单核向巨噬和泡沫细胞分化过程中的表达变化。方法体外诱导THP-1单核细胞分化为巨噬和泡沫细胞,应用Real-time RT-PCR和Western blot测定EMMPRIN基因和蛋白表达。结果单核细胞分化为巨噬细胞后EMMPRIN mRNA和蛋白表达均显著增加,当进一步分化为泡沫细胞时,EMMPRIN的表达与巨噬细胞比较无显著性差异。结论单核细胞向巨噬细胞的分化诱导EMMPRIN表达,而进一步向泡沫细胞分化对其表达无影响。
- 张俊峰葛恒郭炳诗邵琴王长谦
- 关键词：细胞外基质金属蛋白酶诱导因子基质金属蛋白酶巨噬细胞泡沫细胞
- PPAR及其配体药物在预防冠脉再狭窄中的潜在作用
- 2005年
- 冠脉介入治疗已经成为冠心病的常规治疗手段,而介入后冠脉再狭窄的发生是影响其长期疗效的主要因素。支架和药物涂层支架的应用虽然显著降低了再狭窄的发生率,但对许多患者尤其是合并糖尿病的冠心病患者,其效果依然不够理想。核转录因子过氧化物酶增殖剂激活受体(PPAR)被发现可有效抑制再狭窄的关键步骤--血管平滑肌细胞的增殖和迁移,PPAR的药物配体正是治疗冠心病和糖尿病的两种重要药物贝特类降脂药和噻唑烷二酮类胰岛素增敏剂。由此提示PPAR及其配体药物可能在预防合并糖尿病的冠心病患者冠脉介入术后再狭窄中具有潜在作用。
- 葛恒王长谦
- 关键词：再狭窄血管平滑肌细胞噻唑烷二酮冠心病
- 白藜芦醇抑制巨噬细胞细胞外基质金属蛋白酶诱导物的表达被引量：13
- 2006年
- 目的探讨白藜芦醇对细胞外基质金属蛋白酶诱导物(EMMPR IN)表达的影响。方法将人类单核细胞系THP-1和MCF-7细胞共培养,测定上清液中MMP-9活性。用PMA诱导THP-1为巨噬细胞,加入白藜芦醇,观察EMMPR IN表达和MMP-9活性变化。细胞共转染实验测定白藜芦醇对PPARγ的激动作用。用PPARγ的拮抗剂GW 9662预处理细胞后,测定白藜芦醇对EMMPR IN表达的影响。结果PMA诱导使单核细胞EMMPR IN表达明显增强,与EMMPR IN高表达的MCF-7细胞共培养显著增加单核细胞表达MMP-9。白藜芦醇显著抑制EMMPR IN和MMP-9生成。白藜芦醇明显激动PPAR,γGW 9662大幅减弱白藜芦醇对EMMPR IN和MMP-9的作用。结论单核细胞向巨噬细胞分化过程中表达明显增强的EMMPR IN可能是促进MMPs表达的主要因子。白藜芦醇通过激动PPARγ抑制EMMPR IN的表达,可能是其抑制巨噬细胞MMPs产生的机制。
- 葛恒张俊峰郭炳诗何奔王彬尧王长谦
- 关键词：基质金属蛋白酶白藜芦醇
- 白藜芦醇对PPAR-γ激动作用的研究被引量：18
- 2005年
- 目的探讨白藜芦醇是否为过氧化物酶体增殖剂激活受体γ(PPAR-γ)的激动剂。方法在自身不表达PPAR-γ蛋白的U937细胞中电穿孔共转染PPARγ表达质粒和其报告质粒,从而构建PPAR-γ激动剂筛选模型。同时在U937细胞内单独转染PPAR-γ报告质粒作为阴性对照。转染细胞中加入已知PPAR-γ的激动剂吡格列酮30μmol·L-1和15,30μmol·L-1的白藜芦醇,培养24h后裂解细胞,测定细胞内报告质粒所表达虫荧光素酶的活性,该活性大小即代表药物激动PPAR-γ的能力。结果共转染细胞中加入吡格列酮后显著激动了PPAR-γ,使虫荧光素酶活性增强了4.2倍(P<0.001),验证了筛选模型的有效性。而加入15和30μmol·L-1白藜芦醇后,虫荧光素酶活性也分别提高1.78(P=0.033)和2.47倍(P=0.01)且与剂量相关(P=0.04)。而单独转染报告质粒的U937细胞加入上述药物后,虫荧光素酶活性无显著差异。结论白藜芦醇能够剂量依赖的激动PPAR-γ。
- 葛恒张俊峰王彬尧王长谦
- 关键词：白藜芦醇激动剂动脉粥样硬化炎症
- 过氧化物酶体增殖物激活受体与单核/巨噬细胞系被引量：1
- 2004年
- 张俊峰王长谦
- 关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体配体单核细胞
- PPARs配体对巨噬细胞、泡沫细胞细胞外基质金属蛋白酶诱导因子表达的影响被引量：6
- 2006年
- 目的:观察PPARα、γ配体对巨噬细胞、泡沫细胞细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPR IN)表达的影响。方法:体外诱导THP-1单核细胞转化为巨噬细胞、泡沫细胞,分别加入PPARα配体氯贝特(c lofibrate)、PPARγ配体吡格列酮(p ioglitazone)共同培养,应用Real-tim e RT-PCR和W estern b lotting测定巨噬细胞、泡沫细胞中EMMPR IN基因和蛋白表达,ELISA测定细胞培养上清液MMP-9浓度,Zymgraphy法测定MMP-9活性。结果:氯贝特和吡格列酮均能显著抑制巨噬细胞和泡沫细胞EMMPR IN的表达,此抑制作用与PPARα、γ配体抑制MMP-9分泌及活性的趋势一致。结论:PPARα、γ配体均可抑制巨噬细胞、泡沫细胞EMMPR IN的表达,下调EMMPR IN可能是PPAR s配体抑制粥样斑块局部MMPs产生的机制之一。
- 张俊峰葛恒郭炳诗王长谦
- 关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体细胞外基质金属蛋白酶诱导因子基质金属蛋白酶动脉硬化
