国家高技术研究发展计划(2011AA100205)
- 作品数：27 被引量：127H指数：8
- 相关作者：邓子牛郭文武解凯东谢宗周梁武军更多>>
- 相关机构：湖南农业大学华中农业大学国家柑桔品种改良中心更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 柑橘10个品种实生后代多倍体的发掘及SSR鉴定被引量：23
- 2014年
- 秋季采摘柑橘成熟果实并剥取种子,将小粒种籽和瘪籽播于MT培养基,待萌发长出2～3片真叶时,取其叶片检测倍性;将饱满种籽播种于露地,对其幼苗首先通过形态筛选获得似多倍体的植株,然后取其叶片用流式细胞仪进行倍性检测;最后对获得的多倍体植株进行SSR分子鉴定。试验结果表明,获得早金甜橙、卡特夏橙、塔罗科血橙、日辉橘、Ortanique橘橙、默科特橘橙、华农本地早橘、朱红橘和Flame葡萄柚等9个品种的四倍体分别为6、1、3、12、3、6、2、1和10株;获得早金甜橙、塔罗科血橙、Itabori甜橙和Ortanique橘橙等4个品种的三倍体分别为1、1、2、4株。用13对多态性SSR引物对胚抢救获得的三倍体和四倍体的来源进行鉴定,发现早金甜橙、Itabori甜橙的三倍体再生植株为异源三倍体;塔罗科血橙、Ortanique橘橙的三倍体可能为同源三倍体;早金甜橙和Ortanique橘橙的四倍体可能为同源四倍体;塔罗科血橙四倍体为异源四倍体。采用37对多态性引物对从饱满种籽中获得的8个品种四倍体的来源进行鉴定,发现均为同源四倍体。这些自然发掘的多倍体资源对柑橘无核育种和相关基础研究具有重要价值。
- 梁武军解凯东郭大勇谢宗周徐强伊华林郭文武
- 关键词：柑橘多倍体SSR分子标记
- 三倍体葡萄柚实生后代多倍体的发掘与SSR遗传鉴定被引量：14
- 2015年
- 【目的】从三倍体葡萄柚自然授粉的实生后代中发掘多倍体,希望获得一批多倍体新种质,并为探索三倍体遗传规律奠定基础。【方法】秋季采摘三倍体葡萄柚成熟果实,剥取种子,MT+1 mg·L-1GA3培养基播种,待种子萌发后,用流式细胞仪快速检测其倍性,并采用SSR(simple sequence repeat)分子标记鉴定其不同倍性后代植株的来源。【结果】获得了二倍体、三倍体、四倍体、五倍体、六倍体和疑似非整倍体等不同倍性的再生植株各172、52、7、1、1、18株。用13对多态性SSR引物鉴定其来源,结果表明,由二倍体可能三倍体母本所产生的1X配子与周边其他二倍体品种的花粉授粉而来,也可能由三倍体母本产生的重组型2X配子的无融合生殖而来;三倍体大部分由珠心细胞发育而来;四倍体为杂交起源的四倍体;五倍体和六倍体与母本(三倍体葡萄柚)的带型完全相同。【结论】上述活体材料的发掘为柑橘多倍体育种奠定了种质基础。
- 梁武军解凯东谢宗周徐强伊华林郭文武
- 关键词：多倍体三倍体
- 湖南柚类种质的数量分类与主成分分析被引量：5
- 2013年
- 利用SPSS 17.0软件对47个湖南柚类品种资源的37个花器官和果实形态学性状进行了品种Q型聚类及其性状的R型聚类,同时对37个形态学性状进行了主成分分析。结果表明:37个性状对47个柚类品种资源聚类,可将柚类品种分成6个组群;37个形态性状聚类也可分为6个组;经主成分分析,37个花果性状可综合为12个主成分,其累积贡献率达81.58%,根据前12个主成分与性状的相关性,选出了32个影响力较大的性状,这些性状综合了柚类特有的花器官因子和果实因子。
- 李先信杨迎花邹学校邓子牛
- 关键词：聚类分析主成分分析
- 柑橘转基因成分多重PCR检测体系的建立(英文)被引量：1
- 2012年
- [目的]建立柑橘转基因成分的多重 PCR 检测体系。[方法]根据 GenBank 中 pBI121 质粒序列和柑橘(Citrus.)Actin 基因序列,分别设计CaMV35S 启动子、NOS 启动子、NOS 终止子特异引物和 Actin 基因的特异引物,建立能同时检测出 4 种序列的多重 PCR 检测体系,同时通过正交试验确定该体系的最佳引物浓度和比例及 PCR 反应体系中各因素的浓度及反应程序,并对该方法的灵敏度进行验证。[结果]试验得到的最佳MPCR 反应体系为:10×buffer 2.5 μl,25 mmol/L MgCl22.0 μl;dNTP Mixture (2.5 mmol/L each)2.0 μl,10 μmol/L 的 Actin 基因、35S 启动子、NOS 启动子、NOS 终止子引物分别加入 1.0、1.0、1.5、0.5 μl,模板 DNA 0.1 μg,Taq DNA 聚合酶 1.25 U,加 ddH2O 至 25 μl。PCR 反应程序为:94 ℃预变性5 min;94 ℃ 30 s,64.1 ℃ 45 s,72 ℃ 50 s,31个循环;72 ℃ 10 min。试验中,经正交优化后的4重PCR反应灵敏度达0.1%。[结论]该研究建立的MPCR检测体系,理论上已能满足柑橘或其深加工产品的转基因成分检测。
- 李政利彭爱红邹修平何永睿姚利晓陈善春
- 关键词：多重PCR正交试验转基因成分
- 番茄抗溃疡病品种的转育与SSR鉴定被引量：2
- 2012年
- 番茄溃疡病是危害番茄生产的主要病害之一,抗病育种是解决该病害的最佳途径。以感病番茄98-1为母本、茄科茄属龙葵为父本进行杂交育种,经过四代回交和一代自交,获得了对番茄溃疡病具有抗性的杂交后代群体,并通过SSR鉴定得到了1个与番茄溃疡病抗性相关的SSR标记-CAT01。
- 李燕凌张文张新宇李大志
- 关键词：番茄溃疡病杂交育种SSR分子标记
- 转基因锦橙中甲型肝炎病毒衣壳蛋白融合基因的遗传和表达稳定性研究被引量：1
- 2013年
- 为考察甲型肝炎病毒衣壳蛋白融合基因在转基因锦橙株系及其无性繁殖后代中的遗传和表达稳定性,以2个单拷贝的转基因锦橙株系为试材,通过嫁接的方式无性繁殖2代,应用PCR技术、Southern blot杂交、Real-time PCR技术进行研究,结果表明:2个转基因锦橙株系在无性繁殖过程中,甲型肝炎病毒衣壳蛋白融合基因都能稳定遗传;甲型肝炎病毒衣壳蛋白融合基因在转基因锦橙株系JTH1及其无性繁殖后代之间能够稳定的表达,而在转基因锦橙株系JTH2及其无性繁殖后代之间不能稳定的表达,T0代中目的基因的相对表达量显著高于T2代.
- 彭爱红雷天刚许兰珍刘小丰何永睿姚利晓陈善春
- 基于SSR标记的早花柠檬亲缘关系分析被引量：12
- 2013年
- 【目的】目前对早花柠檬的遗传背景、起源分类研究尚属空白,为了探究早花柠檬与其他柑橘种质间的亲缘关系,【方法】利用筛选的11对SSR多态性引物对早花柠檬及16份柑橘属及其近缘属材料进行DNA扩增分析。【结果】结果共检测到92个等位变异,平均每对引物检测到8.5个。17份柑橘属及其近缘属材料的遗传相似系数变化在0.59～1.00。以相似系数0.65为阈值,UPGMA聚类分析可以将17份材料分为4个类群。早花柠檬、枸橼、尤力克柠檬、北京柠檬、费米耐劳柠檬、粗柠檬等一起构成了第2类群,其中早花柠檬与枸橼的遗传相似系数最高,为0.87。【结论】该结果为研究早花柠檬的起源、进化及分类提供了重要线索。
- 马丽丽解凯东叶俊丽郭文武
- 关键词：SSR分子标记亲缘关系
- 利用胚抢救技术获得沙田柚×枸橼杂交后代及其SRAP检测被引量：8
- 2013年
- 【目的】为了获得沙田柚×枸橼杂交苗,【方法】以沙田柚为母本,枸橼为父本进行杂交育种,利用胚抢救技术获得杂种后代,并利用SRAP分子标记对亲本和子代的DNA进行扩增,分析亲本与杂交种之间扩增条带的差异。【结果】结果表明,最终获得27株杂交后代,引物组合Me6-Em5和Me10-Em12可鉴定其中5株为有性后代。【结论】MT+GA3(1 mg.L-1)培养基适合沙田柚×枸橼杂交胚抢救,利用SRAP标记可鉴定出杂交子代,可为以后利用BSA法构建抗感病池寻找柑橘抗溃疡病相关基因打下基础。
- 张文胡威张新宇周敏蒋巧巧邓子牛李大志
- 关键词：胚抢救SRAP杂种鉴定
- 湖南柚类资源及近缘种的SRAP遗传多样性分析被引量：2
- 2013年
- 利用SRAP标记研究了46份湖南柚类地方种质资源及近缘种的遗传多样性与亲缘关系。结果表明:17对SRAP引物组合从供试材料中共检测出283条扩增带,平均每对引物组合可检测到16.6条;其中多态性条带235条,多态性比例83.0%;基因多态性信息量(PIC)变幅为0.431 7~0.770 0,平均为0.544 3;获得了22个SRAP特异性标记。UPGMA聚类结果显示,46份柚类资源及近缘种在欧式遗传距离0.795时分成7个组群,其中40份柚类品种被归类为5个组群,主要由沙田柚品种群、文旦柚品种群和杂种柚品种群组成,聚类结果呈现出明显的地域生态特征。
- 李先信陈婕平邹学校邓子牛
- 关键词：SRAP标记柚类种质资源
- 冰糖橙×枸橼杂交后代的胚抢救及杂种鉴定
- 2014年
- 为获得冰糖橙×枸橼的合子苗,以抗柑橘溃疡病枸橼为父本,以高感病品种冰糖橙为母本进行杂交,利用胚抢救技术获得杂交后代,然后利用筛选出的SSR引物对亲本和子代的基因组DNA进行PCR扩增,分析并鉴定杂交后代中的合子苗。结果表明:在最终获得的359株杂交后代中,利用SSR标记能鉴定出合子苗12株。
- 张新宇陈驰杰张文田洋陈严王吾谦邓子牛李大志
- 关键词：冰糖橙杂种鉴定
