国家自然科学基金(30500514)
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
- 相关作者：郑文杰吕宏琳李长青周跃向强更多>>
- 相关机构：第三军医大学新桥医院广州军区武汉总医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- E3B1基因在大鼠急性脊髓损伤中的表达变化研究被引量：2
- 2007年
- 目的探讨E3B1基因在大鼠急性脊髓损伤中的表达变化及意义。方法Wistar大鼠75只,随机分为脊髓损伤后4、8、12、24h,2、3、7d以及正常对照组和假手术组(又分手术后4、8、12、24h,2、3、7d7个时相点)。采用RT-PCR、Westernblot和免疫组织化学染色法检测E3B1的表达。结果正常对照组、假手术组均检测到了少量E3B1的mRNA和蛋白表达,脊髓损伤组在伤后4h,E3B1的表达显著高于正常对照组和假手术组,于8h达高峰值,2d仍维持在高表达水平,而后开始下降,7d恢复至对照组水平。免疫组化E3B1阳性细胞主要位于神经元。结论急性髓脊损伤后E3B1的过度表达可能是其再生修复障碍的重要因素。
- 向强周跃李长青郑文杰吕宏琳
- 关键词：脊髓损伤轴突生长
- 培养神经元细胞中E3B1基因的表达变化与轴突生长抑制的关系
- 2007年
- 目的检测E3B1基因在培养神经元轴突生长抑制前后的表达变化及意义。方法应用RT-PCR和Westernblot检测培养神经元轴突生长抑制前后E3B1mRNA和蛋白的表达,应用免疫细胞化学检测培养神经元Ⅲ型β-微管蛋白的表达。结果与正常培养的神经元相比,轴突抑制物共培养的神经元细胞Ⅲ型β-微管蛋白表达明显降低(P<0.01),E3B1mRNA和蛋白的表达均显著升高(P<0.01)。结论E3B1基因的表达变化与神经元细胞轴突的生长抑制有密切关系。
- 向强周跃李长青郑文杰吕宏琳
- 关键词：神经元细胞轴突生长
- 脊髓运动神经元轴突抑制前后E3B1基因的表达变化及意义被引量：1
- 2008年
- 目的检测E381基因在脊髓运动神经元（SMN）轴突生长抑制前后的表达变化及意义。方法应用逆转录-聚合酶链反应（1iT-PCR）和Westernblot检测SMN轴突生长抑制前后E381mRNA和蛋白表达的变化，应用免疫细胞化学检测培养SMNⅢ型β-微管蛋白的表达。结果与正常培养的SMN比较，与轴突抑制物共培养的SMNⅢ型β-微管蛋白表达明显降低（P〈0．01），E381 mRNA和蛋白的表达均显著升高（P〈0．01）。结论E381基因的过度表达可能是SMN轴突生长抑制的重要因素。
- 向强周跃李长青徐峰郑文杰吕宏琳
- 关键词：脊髓神经元轴突基因表达
- 应用RNA干扰技术抑制神经元E3B1基因表达及对轴突生长的影响被引量：1
- 2008年
- 目的:探讨应用RNA干扰(RNAi)技术抑制神经元E3B1基因表达及其对轴突生长的影响。方法:选择针对E3B1(NCBI:NM-024397)RNAi的3个靶位点Abil1、Abil2、Abil3和1个不针对任何mRNA的RNAi靶位点(阴性对照)以及甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH,阳性对照),用带有neoR选择标志和GFP绿色荧光标志的真核表达载体pGenesil-1构建E3B1 RNAi质粒,分别转染培养的神经元,在荧光显微镜下观测转染率,经G418筛选得到单一的转染细胞,并用Western blot法检测各转染组神经元E3B1蛋白的表达情况,选出具有最佳抑制效应的siRNA转染神经元,加入轴突生长抑制物,观测轴突生长情况。结果:成功构建了RNAi质粒,各组细胞的转染率相近,均为34%左右。与阴性对照组相比,Abil1、Abil2和Abil3转染组细胞内E3B1 mRNA的表达都受到了不同程度的抑制,其中Abil3转染组细胞的E3B1 mRNA和蛋白的表达抑制最为显著,加入轴突抑制剂后Abil3转染组神经元轴突仍能继续生长。结论:应用RNA干扰技术能高效特异地抑制神经元E3B1基因的表达,E3B1基因的表达下调可促进神经元轴突的生长。
- 向强周跃李长青徐峰吕宏琳郑文杰
- 关键词：RNA干扰神经细胞轴突
