广东省科技计划工业攻关项目(2002B2150101) 作品数:18 被引量:160 H指数:9 相关作者: 喻达辉 黄桂菊 郭奕惠 王小玉 龚世园 更多>> 相关机构: 中国水产科学研究院南海水产研究所 华中农业大学 海南大学 更多>> 发文基金: 广东省科技计划工业攻关项目 广东省自然科学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 天文地球 更多>>
水产动物转基因研究进展 被引量:5 2005年 转基因技术为水产养殖遗传育种开辟了一条新的途径。转基因技术已迅速应用到培育高产、优质和抗逆的水产养殖新品种的研究中,并在解决发育生物学、分子生物学和生理学等方面的难题中发挥了重要作用。目前,水产动物转基因的方法主要是显微注射和精子介导-电脉冲法。涉及对象包括各种鱼类和贝类等。但转基因的定位整合、稳定表达和稳定遗传以及转基因动物的生态安全和食品安全等问题仍是转基因研究有待攻克的重点、难点和热点问题。 黄桂菊 喻达辉关键词:转基因技术 水产养殖 合浦珠母贝卵子电击脉冲参数的初步研究 运用电脉冲转基因仪对合浦珠母贝卵子进行电脉冲处理以优化电穿孔法转基因的电击参数.实验中调制百分比:100%;脉冲间隔:1.0s;电极距离:2mm;脉冲个数:5个,参数保持不变.用不同的电脉冲参数组合 (脉冲电压100~4... 喻达辉 贾晓平 陈素文 李夏 朱嘉濠关键词:合浦珠母贝 卵子 转基因 电穿孔法 文献传递 吉富罗非鱼不同选育群体的遗传多样性 被引量:16 2007年 用微卫星和扩增片段长度多态性(amplmed fragment lengh polymorphism,AFLP)分子标记对海南、广州和青岛吉富品系尼罗罗非鱼的遗传多样性和遗传分化进行了研究。9对微卫星引物和4对AFLP引物的分析结果一致。微卫星分析表明,青岛吉富鱼的平均等位基因数(4.8)、平均观测杂合度(0.528)、平均多态信息含量(0.605)最高,海南吉富鱼的平均等位基因数(4.4)、平均观测杂合度(0.479)、平均多态信息含量(0.549)最低。AFLP分析显示,青岛吉富鱼的多态位点比例(48.4%)和基因多样性(0.245)最高,海南吉富鱼的多态位点比例(36.3%)和基因多样性(0.147)最低。这些表明,青岛吉富鱼的遗传多样性最高,海南吉富鱼最低。遗传分化分析表明,两两群体间遗传分化显著(微卫星以,为0.07—0.11,P〈0.01;AFLP峙为0.24—0.29,P〈0.01)。AMOVA分析显示,大部分遗传变异(微卫星的分析结果为91.26%;AFLP的为67.6%)来源于群体内个体间,表明吉富鱼选育品系尚具有进一步选育的潜力。 李莉好 喻达辉 黄桂菊 杜博 符云 童馨 郭奕惠 叶卫关键词:吉富罗非鱼 遗传分化 微卫星DNA 合浦珠母贝3个家系的AFLP标记分离与遗传多样性研究 被引量:7 2007年 对AFLP标记在合浦珠母贝(Pinctada fucata)印度家系(印度贝♀×印度贝♂,PII)、杂交家系(三亚贝♀×印度贝♂,PSI)和三亚家系(三亚贝♀×三亚贝♂,PSS)的遗传分离及3个家系的遗传多样性进行了分析。3对引物共产生57个位点,分离位点比例为57.4%~87.7%,符合孟德尔规律的分离位点为70.0%~71.0%;1:1分离位点占总分离位点的24.0%~45.2%,其中杂交家系的比例最高。3个家系的多态位点比例为93.0%~100.0%,总基因多样性为0.460。家系内的基因多样性为PII0.434,PSI0.331,PSS0.366,平均为0.377±0.030。家系间的遗传分化显著(GST=0.180)。遗传距离分析表明,PSI与PSS之间的遗传距离最大(0.157),PII与PSS之间的遗传距离最小(0.121)。UPGMA系统树表明,PII和PSS的亲缘关系较近,而PSI与这2个家系较远。上述结果表明,第一代家系的遗传多样性仍很高,但家系之间的遗传分化较大。该研究结果对育种过程中遗传资源管理具有一定指导作用。 王小玉 喻达辉 黄桂菊 郭奕惠 杜博 龚世园 王爱民关键词:AFLP分子标记 基因多样性 遗传分化 利用ITS和AFLP标记探讨中国、日本和澳大利亚3种珠母贝的亲缘关系 被引量:3 2006年 我国合浦珠母贝 Pinctada fucata 的命名较混乱,与日本的 P.fucata martensii 和澳大利亚的 P.imbricata 的分类关系存在争议。用 ITSs 序列和 AFLP 标记对这3个种的遗传关系进行了分析。结果表明这3个地理种的遗传分化很低,种内和种间的遗传距离相互重叠,AFLP 数据的聚类分析表明澳大利亚种群大部分个体单独聚合成一支,主成分分析结果相似。种问的遗传距离与分化程度与其地理距离呈正相关。分子方差结果也表明种间的差异较小,低于6%。这些结果表明这3个种实际上是同一物种。由于大西洋的 P.imbricata 与澳大利亚的不同,因此根据分类命名的优先原则,正确的种名应为 P.fucata。 喻达辉 朱嘉濠关键词:合浦珠母贝 分子分类 遗传分化 绿色荧光蛋白及其在转基因动物研究中的应用 被引量:7 2005年 绿色荧光蛋白(greenfluorescentprotein,GFP)是源于水母(Aequoreavictoria)、海笔(Renillareniformis)等海洋无脊椎动物的一种蛋白质,这种蛋白质在体外经适当波长的光激发便可发出绿光,所发出的绿光用普通荧光显微镜或荧光激活细胞分拣器(FACS)均可检测到。GFP基因是目前能在细胞内稳定表达的优良标记基因之一,不需要任何反应底物及其它辅助因子,无种属、组织和位置特异性,对受体细胞基本无毒害,且检测简单,灵敏度高,操作方便,结果可靠,无损于细胞或胚胎的完整性及活力,是一种非常实用的新型报告基因,在细胞生物学和分子生物学领域有着广泛的应用前景。 李夏 陈素文 喻达辉关键词:GFP 转基因动物 RAPD标记在合浦珠母贝家系F1代的分离方式 被引量:12 2005年 对RAPD标记在合浦珠母贝F1代全同胞家系共27个样品中的分离方式进行了研究。从21条RAPD随机引物中筛选了8条引物用于扩增分析,结果共扩增出49个位点,其中正常位点47个(95.9%),异常位点2个(4.1%),即子代有扩增带而双亲无。47个正常位点中3个位点在F1中不分离(6.4%),44个位点发生分离(93.6%,即多态位点)。卡方检验表明,44个分离位点中32个符合孟德尔分离规律(72.7%),12个位点发生偏分离(27.3%)。符合孟德尔分离位点中按11分离位点占43.8%,31分离位点占56.2%,其中,父本特有标记、母本特有标记和双亲共有标记分别占28.2%,15.6%和56.2%,父本特有标记略多于母本特有标记。根据“双假测交”理论,11分离位点是构建F1代家系的作图位点。较高的11分离位点表明,利用RAPD标记构建合浦珠母贝遗传连锁图谱是可行的。 喻达辉 王小玉 郭奕惠 黄桂菊 王爱民关键词:全同胞家系 F1代 基因型 多态性 日本珍珠贝人工繁殖苗在热带海区的养殖生长观察 被引量:6 2006年 日本珍珠贝引进海南陵水热带海区养殖,人工繁殖幼贝苗1.5~2.0mm下海养殖。经1年的养殖生长观察,结果为:平均壳长59.2mm、壳高59.7mm、壳宽20.7mm,平均个体重34.8g;养殖90d,生长速度较快,壳长平均增长值为11.9mm,相对增长率为55.4%;壳高平均增长值11.2mm,相对增长率61.2%;壳宽平均增长值5.9mm,相对增长率为190.3%。壳长、壳高和体重增长之间具有非常显著的相关关系。研究表明,该贝在海南热带海区养殖的生长速度快,是适宜引进的养殖对象。 李有宁 吴开畅 喻达辉 陈明强 邢孔武 王雨关键词:养殖 合浦珠母贝卵子电击脉冲参数的初步研究 被引量:2 2005年 运用电脉冲转基因仪对合浦珠母贝卵子进行电脉冲处理以优化电穿孔法转基因的电击参数.实验中调制百分比:100%;脉冲间隔:1.0s;电极距离:2mm;脉冲个数:5个,参数保持不变.用不同的电脉冲参数组合(脉冲电压100~400 V、脉冲持续时间0.5~3.0 ms、脉冲频率10~50 kHz,共28个组合)对卵子电击,然后加入精子进行授精,统计各组受精率和孵化率,以受精率和孵化率这到50%以上为衡量指标.结果表明,合浦珠母贝卵子对低脉冲频率和高电压非常敏感,当频率低于20kHz或脉冲电压高于400V时对卵子损伤较大.脉冲持续时间对其影响不大,适应范围较宽.优化的转基因电击脉冲参数组合为:脉冲电压1.0kV/cm,脉冲持续时间2.0ms,脉冲频率50kHz,或者脉冲电压1.5kV/cm,脉冲持续时间1.5ms,脉冲频率50kHz. 喻达辉 贾晓平 陈素文 李夏 朱嘉濠关键词:合浦珠母贝 卵子 转基因 电穿孔法 合浦珠母贝印度家系F_1代的AFLP分析 被引量:16 2007年 用AFLP标记对合浦珠母贝(Pinctada fucata)印度家系的亲本及其子一代(F1)进行了遗传分析。27对引物共扩增出1 013个位点,其中835个位点在F1代分离,178个位点不分离,多态位点比例82.4%。分离位点中,符合孟德尔分离规律的位点458个,占分离位点数的54.9%。偏孟德尔分离规律的位点377个,占分离位点数的45.1%。分离比为3∶1的位点共有482个,占分离位点数的57.7%,符合孟德尔分离规律的位点251个,占52.1%(占分离位点数的30.1%);分离比为1∶1的位点共有353个,占分离位点数的42.3%,符合孟德尔规律的位点207个,占58.6%(占分离位点数的24.8%)。半数以上的标记符合孟德尔遗传规律。表明AFLP标记适合于合浦珠母贝的遗传图谱构建。[中国水产科学,2007,14(1):52-58] 王小玉 喻达辉 黄桂菊 郭奕惠 龚世园 王爱民关键词:AFLP标记 合浦珠母贝 家系