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中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(200903250)

作品数:7 被引量:9H指数:2
相关作者:孙真卢强贾生美杨振国张俊辉更多>>
相关机构:吉林大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>

文献类型

  • 7篇中文期刊文章

领域

  • 3篇生物学
  • 3篇农业科学
  • 1篇医药卫生

主题

  • 6篇克隆
  • 5篇鲤鱼
  • 3篇克隆及序列分...
  • 2篇全长CDNA
  • 2篇干扰素
  • 2篇干扰素Γ
  • 2篇白细胞介素
  • 2篇白细胞介素1...
  • 2篇IL-10
  • 1篇单胞菌
  • 1篇蛋白
  • 1篇嗜水气单胞菌
  • 1篇受体
  • 1篇死因
  • 1篇气单胞菌
  • 1篇肿瘤
  • 1篇肿瘤坏死因子
  • 1篇肿瘤坏死因子...
  • 1篇肿瘤坏死因子...
  • 1篇肿瘤坏死因子...

机构

  • 7篇吉林大学

作者

  • 7篇贾生美
  • 7篇卢强
  • 7篇孙真
  • 6篇王文东
  • 6篇陈义龙
  • 6篇冯祥汝
  • 6篇张俊辉
  • 6篇杨振国
  • 3篇赵晓
  • 2篇翟新新
  • 2篇沈雪飞

传媒

  • 3篇中国畜牧兽医
  • 2篇安徽农业科学
  • 1篇Agricu...
  • 1篇中国人兽共患...

年份

  • 1篇2015
  • 3篇2013
  • 3篇2012
7 条 记 录,以下是 1-7
排序方式:
嗜水气单胞菌鞭毛蛋白基因flaB的克隆、表达及其免疫原性分析被引量:1
2015年
目的克隆、表达及纯化嗜水气单胞菌鞭毛FlaB蛋白,比较了它与天然鞭毛蛋白的抗原性,为以后鱼类弧菌病的防治及其疫苗的制备奠定了基础。方法利用PCR扩增出嗜水气单胞菌鞭毛蛋白基因flaB,经确定后将该基因克隆到原核表达载体pET-30a中,在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了表达,并用电洗脱法对表达的蛋白进行纯化,用纯化的重组蛋白免疫家兔制备抗血清,并进行Western-blot分析。结果嗜水气单胞菌鞭毛蛋白flaB基因全长912bp,编码303个氨基酸,预测分子量为32kDa,Western-blot结果表明兔抗FlaB血清不仅能与重组鞭毛蛋白发生反应,而且能与天然鞭毛蛋白发生反应。结论鞭毛蛋白FlaB可能是嗜水气单胞菌的重要保护抗原之一,为下一步疫苗的制备奠定了基础。
沈雪飞翟新新温振才孙真贾生美卢强
关键词:嗜水气单胞菌鞭毛蛋白
Cloning and Sequence Analysis of Interleukin 10 (IL-10) Full-length cDNA from Cyprinus carpio L.
2012年
[Objective] This study aimed to obtain IL-10 (interleukin 10) full-length cDNA of common carp (Cyprinus carpio L.) and conduct the sequence analysis. [Method] The differentially expressed cDNA fragment was obtained by DD-RTPCR (differential display RT-PCR). The cDNA library of peripheral blood leukocytes which were separated from common carp and stimulated by mitogen was screened with a probe labeled with DIG (digoxigenin). The IL-10 full-length cDNA was cloned from 0.8×104 pfu of recombinant phages, and the sequence analysis and homology comparison were carried out. [Result] Sequence analysis indicated that the IL-10 full-length cDNA of common carp was 1 117 bp long, containing a 55 bp 5’-UTR, a 522 bp 3’-UTR, and a 540 bp open reading frame(ORF) encoding 179 amino acids. In addition, there were three mRNA instability motifs (ATTTA) in the 3’-untranslated region. The deduced protein sequence shared typical sequence features of the IL-10 family. Homology comparison indicated that the obtained sequence shared 89.1% homology with the carp IL-10 gene from GenBank. [Conclusion] This study laid foundation for further study of the expression manner, functional characteristic and regulation mechanism of IL-10 in vivo and the interaction mechanism in the inflammatory reaction and immune response.
冯祥汝陈义龙赵晓王文东张俊辉杨振国孙真贾生美卢强
关键词:CLONING
鲤鱼肿瘤坏死因子受体相关因子6全长cDNA克隆及序列分析
2013年
本试验以鲤鱼外周血白细胞肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)EST序列为基础,经地高辛标记后作为探针,对有丝分裂原刺激的鲤鱼外周血白细胞cDNA文库进行核酸杂交筛选,从重组噬菌体中经过两轮筛选获得阳性克隆。序列分析结果显示,该序列包含有5′-非编码区(5′-UTR)25bp;3′-非编码区(3′-UTR)535bp,存在2个mRNA不稳定基序ATTTA;开放阅读框ORF长1632bp,编码543个氨基酸。预测蛋白质等电点为5.88,分子质量大小为61.773ku。序列同源性比对结果表明,所获得的序列与GenBank上登录的鲤鱼TRAF6a基因同源性达99%。蛋白质序列分析结果发现,其具有TRAF家族的典型序列特征。
贾生美孙真冯祥汝陈义龙沈雪飞翟新新张俊辉杨振国王文东卢强
关键词:鲤鱼肿瘤坏死因子受体相关因子6克隆
鲤鱼γ-2β干扰素基因组DNA克隆及序列分析被引量:2
2013年
试验参考鲤鱼γ-2β干扰素(interferonγ-2β,IFNγ-2β)全长cDNA序列,在其两侧非翻译区和外显子设计2对引物,以提取的鲤鱼脾脏基因组DNA为模板进行PCR扩增,获得了IFNγ-2β的全长基因DNA序列。结果表明,获得的基因组DNA全长2084bp,GenBank登录号为JX181981,序列分析结果显示该基因进化较保守,和其他物种一样都含有4个外显子和3个内含子,各外显子碱基数与哺乳动物中相对应的外显子碱基数基本相同,且外显子、内含子剪接位点均遵守GT-AG规则。
陈义龙孙真贾生美冯祥汝王文东张俊辉杨振国卢强
关键词:鲤鱼克隆
鲤鱼白细胞介素10基因组DNA克隆及序列分析
2013年
为获得鲤鱼白细胞介素10(interleukin 10,IL-10)全长基因组序列,本研究利用鲤鱼IL-10全长cDNA序列(Gen-Bank登录号:JX524550),通过在两端非编码区设计引物,以提取的鲤鱼脾脏基因组为模板,使用PCR方法成功获得鲤鱼IL-10全长基因组序列。鲤鱼IL-10基因组全长2176bp,GenBank登录号为JX524551。将所获得的序列与其他物种IL-10基因组序列相比,结果发现都含有5个外显子,4个内含子,外显子在进化上相对保守,剪切位点都符合"gt......ag"规则;序列包含540bp的开放阅读框,编码179个氨基酸,有2段典型的IL-10氨基酸信号基序。
冯祥汝陈义龙孙真贾生美王文东张俊辉杨振国卢强
关键词:鲤鱼白细胞介素10基因组克隆
鲤鱼白细胞介素10(IL-10)基因cDNA克隆及序列分析被引量:6
2012年
[目的]获取鲤鱼全长IL-10(interleukin 10)cDNA,并对其序列进行分析。[方法]利用DD-RTPCR(differential display RT-PCR)方法获得差异表达IL-10 cDNA片段,以地高辛标记做为探针,对有丝分裂原刺激的鲤鱼外周血白细胞cDNA文库进行核酸杂交筛选,克隆鲤鱼IL-10全长cDNA,并对该序列进行序列分析和同源性比较。[结果]鲤鱼全长IL-10 cDNA共1 117 bp,包含55 bp的5'端非编码区,一个540 bp的编码179个氨基酸的开放阅读框及522 bp的3'端非编码区,其中,3'非编码区包含3个mRNA不稳定基序"ATTTA";该蛋白序列具有IL-10家族的典型序列特征;序列同源性比较表明,所获得的序列与GenBank上登录的鲤鱼IL-10基因同源性为89.1%。[结论]该试验为进一步研究IL-10在体内的表达方式、功能特点、调控机理及其在炎症反应和免疫应答中的作用机制奠定了基础。
冯祥汝陈义龙赵晓王文东张俊辉杨振国孙真贾生美卢强
关键词:鲤鱼IL-10克隆
鲤鱼干扰素γ-2β全长cDNA的克隆及序列分析
2012年
[目的]进行鲤鱼干扰素γ-2β(IFNγ-2β)全长cDNA的克隆、鉴定及序列分析。[方法]以鲤鱼外周血白细胞干扰素γ-2β(inter-feronγ-2β,IFNγ-2β)EST序列为基础,以地高辛标记作为探针,对有丝分裂原刺激的鲤鱼外周血白细胞cDNA文库进行核酸杂交筛选,克隆鲤鱼IFNγ-2β的全长cDNA,并进行序列分析。[结果]获得了3个阳性克隆,对其进行序列分析,结果显示,该序列包含119 bp的5'非编码区,218 bp的3'非编码区,开放阅读框ORF长537 bp,共编码178个氨基酸,在其3'非编码区存在几个ATTTA不稳定基序;序列同源性比较结果表明,所获序列与GenBank上登录的鲤鱼IFN基因的同源性达97%;蛋白质序列和结构分析发现,该序列具有IFN家族的典型序列特征。[结论]为进一步研究IFNγ-2β在体内的表达方式、功能特点和调控机理以及在炎症反应和免疫应答中的作用机制奠定了基础。
陈义龙冯祥汝赵晓王文东张俊辉杨振国孙真贾生美卢强
关键词:鲤鱼克隆
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