厦门市科技计划项目(3502Z20042021)
- 作品数：8 被引量：62H指数：6
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- 相关机构：厦门市农业局厦门出入境检验检疫局福建农林大学更多>>
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- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 沙门氏菌快速检测试纸条的研制与应用被引量：10
- 2006年
- 应用提纯的兔抗沙门氏菌IgG-2包被硝酸纤维素膜检测线，羊抗兔IgG包被对照线，然后用胶体金标记纯化的兔抗沙门氏菌IgG-1建立了检测沙门氏菌的快速检测试纸条。该法通过胶体金标记兔抗沙门氏菌抗体直接显色，阳性者检测线出现红色线，整个试验过程仅需10～15min即可判断结果．与大肠杆菌、枸橼酸杆菌、变形杆菌、阴沟肠杆菌等常见肠道菌不发生交叉反应．与沙门氏菌的最低检测量为2．3×105cfu／ml。试纸条4℃或37℃存放9个月，检测结果稳定．
- 陈琼孔繁德张长弓彭海滨徐淑菲
- 关键词：免疫层析胶体金沙门氏菌
- 沙门菌实时荧光定量PCR检测试剂盒的研制与应用被引量：8
- 2006年
- 根据沙门菌保守的fimY基因序列设计合成了引物和TaqMan探针,建立了快速检测沙门茵的实时荧光定量方法,并对反应条件进行了优化,组装成快速检测试剂盒。通过对临床样品的检测,该试剂盒的检测灵敏度达4．5 CFU(25μL反应体系),比常规PCR高100倍,而且稳定性良好,至少可以冷冻保存9个月。结果表明,所建立的沙门菌实时荧光定量PCR检测试剂盒具有操作简便、快速、特异性强、灵敏度高、重复性好、稳定性强等优点,适于大量样品的检测。
- 孔繁德彭海滨徐淑菲陈琼陆承平
- 关键词：沙门菌TAQMAN探针实时荧光定量PCR
- 斑点免疫金渗滤法检测沙门菌的研究与应用被引量：9
- 2006年
- 〔目的〕研究一种特异性强,灵敏度高,且操作简便,快速的沙门菌检测方法,以用于临床样品中沙门菌的快速检测,并能在基层推广应用。〔方法〕应用胶体金标记纯化的兔抗沙门菌抗体-1,SPA(金黄色葡萄球菌A蛋白)包被硝酸纤维素膜作对照点,建立直接检测沙门菌的斑点免疫金渗滤法(DIGFA)检测试纸盒。〔结果〕通过胶体金标记兔抗沙门菌抗体直接显色,阳性者出现红色斑点,结果易于判断。整个试验过程仅需10￣15min即可判断结果,操作简单,与大肠埃希菌、枸橼酸杆菌、变形杆菌和绿脓杆菌等不发生交叉反应。沙门菌的最低检测量为4.5×106cfu/ml。同时将该法与国标法检测效果比较,符合率达100%。将胶体金标记的兔抗沙门菌抗体冻干粉4℃存放12个月,检测结果无差异。〔结论〕研究结果表明该法具有微量、特异、敏感、快速可靠,效果直观,判断容易,无需特殊仪器设备,非常适用于沙门菌的快速检测,值得推广应用。
- 孔繁德陈琼彭海滨陆承平
- 关键词：斑点免疫金渗滤法沙门菌
- 多重PCR技术检测沙门菌两种四环素耐药基因被引量：3
- 2006年
- 应用两对特异性引物同时检测四环素耐药基因tetB和tetC。通过对35株沙门菌分离株的四环素耐药性检测,表明所有沙门菌分离株均含tetC基因,与药敏试验结果阳性符合率65.7%,8株同时含有tetB基因,与药敏试验结果阳性符合率100%,tetB基因和tetC基因双阳性的菌株与药敏试验结果阳性符合率也为100%。取其中部分菌株扩增出tetB和tetC基因片段进行序列分析,5株菌的tetB基因扩增产物序列完全相同,与质粒pRT11相应序列同源性达99.7%;14株菌的tetC基因扩增产物与质粒pBR322中的相应序列同源性为100%。证实沙门菌耐药基因普遍存在,且同时含有tetB和tetC基因的菌株表现耐药。多重PCR技术同时检测两种四环素耐药基因,适合大量样本的检测,对开展沙门菌四环素多种耐药基因的分子流行病学监测提供了有效途径。
- 孔繁德陆承平彭海滨徐淑菲陈琼
- 关键词：沙门菌四环素耐药基因多重PCR
- 多重PCR技术检测沙门氏菌两种四环素耐药基因
- 本研究应用二对特异性引物同时检测四环素耐药基因TetB和TetC。通过对35株沙门氏菌分离株的四环素耐药性检测,表明所有沙门氏菌分离株均含TetC基因,与药敏试验结果阳性符合率65.7%(23/35),8株含有TetB基...
- 孔繁德陆承平彭海滨徐淑菲陈琼
- 关键词：多重PCR沙门氏菌四环素耐药基因
- 文献传递
- 猪场常用消毒剂对沙门氏菌等细菌的作用效果试验被引量：2
- 2006年
- 为了解目前猪场常用消毒剂对猪场常见肠道致病菌的杀菌作用，开展了5种猪场常用消毒剂（特碘、复合醛、消特灵、氢氧化纳和高锰酸钾）杀灭5种猪场常见肠道致病菌（沙门氏菌、大肠杆菌、奇异变形杆菌、弗氏枸橼酸杆菌和绿脓杆菌）最低浓度（MBC）的试验，依次为1：600～1：800，1：10001：2500，1：30000-1：40000，0．01％～0．03％，0．0008％～0．004％。观察温度对各种消毒剂作用沙门氏菌MBC的影响，结果表明，温度越高，特碘的MBC也越高，复合醛则越低，而其他3种影响不大；固定各种消毒剂浓度所能杀灭的最高沙门氏菌浓度，均能达到10^6个·ml^-1以上，两种消毒剂配合使用效果不一。同时还检测了终止和不终止消毒剂作用对杀菌效果的影响不大，并对猪场用药提出几点建议。
- 彭海滨吴德峰孔繁德陈琼徐淑菲
- 关键词：消毒剂沙门氏菌
- 51株沙门氏菌的耐药性分析被引量：13
- 2008年
- 通过对厦门市畜禽产品中分离的51株沙门氏菌临床分离株开展的24种药物敏感试验,发现沙门氏菌耐药性越来越强。同时进行了51株分离株对四环素、链霉素、氨苄青霉素、氯霉素和磺胺等5种抗菌药物的耐药性试验,结果前4种抗生素MIC超过16μg/mL的菌株依次为35株(68.6%,35/51)、37株(72.55%,37/51)、16株(31.37%,16/51)和36株(70.59%,36/51),对磺胺MIC超过1 600μg/mL的菌株达51株(100%,51/51)。结果提示控制抗生素盲目使用刻不容缓。
- 陈琼孔繁德彭海滨徐淑菲
- 关键词：沙门氏菌药敏抗生素耐药性
- 沙门菌PCR快速检测试剂盒的研制与应用被引量：11
- 2007年
- 为建立一种简单、快速、灵敏、准确的沙门菌检测方法,根据沙门菌fimY保守基因序列设计合成了1对引物,建立了快速检测沙门菌的PCR方法,并对反应条件进行优化,组装成快速检测试剂盒。结果显示,所有沙门菌均扩增出526 bp的特异性条带,而非沙门菌均未扩增出任何条带。检测灵敏度达93 CFU,还可检出含3 CFU的样品用BP预增菌的菌液或用MM增菌后的菌液,而且稳定性良好,冷冻至少能保存12个月。采用直接菌体加入法、热裂解法、反复冻融法、CTAB碱裂解法和柱式试剂盒提取法分别提取核酸模板,结果CTAB法效果最好,但操作烦琐,而直接菌体加入法和热裂解法可以达到和柱式试剂盒提取法相同的效果,且操作简便、快速、经济、效果好。通过对临床样品的检测,证实该试剂盒具有操作简便、快速、灵敏度高、特异性强、重复性好、稳定性高等优点,值得推广应用。
- 孔繁德徐淑菲陈琼彭海滨陆承平
- 关键词：沙门菌聚合酶链式反应
- 沙门氏菌通用PCR快速检测试剂盒的研制与应用
- 根据沙门氏菌fimY基因建立了用于检测沙门氏菌的通用PCR方法。对收集的A-F群标准菌株和临床分离的60株沙门氏菌分离株和11种非沙门氏菌进行PCR检测,采用2.0%琼脂糖电泳进行检测,结果所有沙门氏菌均扩增出526bp...
- 孔繁德陈琼徐淑菲彭海滨
- 关键词：沙门氏菌
- 文献传递
- 沙门氏菌通用PCR快速检测试剂盒的研制与应用被引量：9
- 2007年
- 根据沙门氏菌fimY基因建立了用于检测沙门氏菌的通用PCR方法。对收集的A-F群标准菌株和临床分离的60株沙门氏菌分离株和11种非沙门氏菌进行PCR检测,采用2.0%琼脂糖电泳进行检测,结果所有沙门氏菌均扩增出526bp的特异性条带,而非沙门氏菌均未扩增出任何条带。通过电泳判定结果,该法可检出扩增体系中93cfu的沙门氏菌,还可检出含3cfu的样品用BP预增菌或MM增菌后的菌液。说明该方法敏感性高、特异性强。采用直接菌体加入法、热裂解、反复冻融、CTAB碱裂解法和柱式试剂盒提取法分别提取核酸模板,结果CTAB法效果最好,但操作烦琐,而直接菌体加入法和热裂解法可以达到和柱式试剂盒同样的效果,且操作简便快速、经济、效果好,值得推广应用。
- 孔繁德陈琼徐淑菲彭海滨
- 关键词：沙门氏菌
