国家自然科学基金(30070932)
- 作品数：15 被引量：108H指数：6
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- 相关机构：浙江中医学院杭州师范大学浙江中医药大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金浙江省中医药科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人类肝脂肪酶的研究进展被引量：23
- 2003年
- 肝脂肪酶是由肝实质细胞合成的一种具有磷脂肪酶A1和甘油三酯水解酶活性 ,对血浆脂质转运有重要作用的胞外蛋白 ,主要参与高密度脂蛋白的重构和乳糜微粒残骸、低密度脂蛋白的代谢以及胆固醇的逆向转运。肝脂肪酶活力异常与动脉粥样硬化及糖尿病有较高的相关性。肝脂肪酶活力受激素及载脂蛋白的影响 ,肝脂肪酶基因启动子的多态性及肝脂肪酶基因错义也影响酶的活力。
- 严瑾范春雷沃兴德
- 关键词：分子生物学肝脂肪酶脂蛋白代谢基因变异胞外蛋白胆固醇
- 姜黄素对小鼠巨噬细胞LDL受体的影响被引量：4
- 2005年
- 目的研究姜黄素对培养小鼠巨噬细胞LDL受体的影响。方法用不同浓度的姜黄素与巨噬细胞共孵育,观察各组巨噬细胞膜上LDL受体的数量。结果高中低三个剂量的姜黄素均能使巨噬细胞膜上LDL受体数量增加,随姜黄素浓度增加,LDL受体数量也明显增加。结论姜黄素可能通过调节LDL受体数量和活性起到降胆固醇的作用。
- 罗艳范春雷沃兴德卢德赵钱颖
- 关键词：姜黄素巨噬细胞胆固醇LDL受体
- 利用爪蟾卵母细胞建立人类低密度脂蛋白受体基因表达系统被引量：2
- 2005年
- 目的 在爪蟾卵母细胞中建立人类低密度脂蛋白受体基因的表达系统,此系统可被用于降血脂和抗动脉粥样硬化的研究。方法和结果 冰块麻醉爪蟾,切取卵巢,获得V、VI期卵母细胞,经用1g/L胶原酶孵育过夜除去卵母细胞外层的卵巢膜和滤泡膜,培养3天后存活率仍可达95 %以上。用DiI标记的低密度脂蛋白荧光配体测定膜上结合荧光,发现V、VI期卵母细胞膜上未见有内源性低密度脂蛋白受体,如将人低密度脂蛋白受体的表达质粒p3.7低密度脂蛋白导入爪蟾卵母细胞核中,培养后用DiI标记的低密度脂蛋白配体测定可见膜上发出红色荧光,用抗低密度脂蛋白受体的抗体经免疫荧光检测法测定可见膜上有绿色荧光,免疫胶体金标记透射电镜检测可见膜上有内吞的胶体金颗粒。结论 外源性的人类低密度脂蛋白受体基因能在爪蟾V、VI期卵母细胞中表达,此低密度脂蛋白受体基因表达系统可用于中药降血脂抗动脉粥样硬化机理的研究。
- 沃兴德范春雷罗艳钱颖卢德赵唐利华
- 关键词：细胞生物学爪蟾卵母细胞低密度脂蛋白动脉粥样硬化质粒构建
- 酶联免疫法测定脂蛋白脂酶的建立与应用被引量：3
- 2005年
- 严瑾范春雷唐利华沃兴德
- 关键词：脂蛋白脂酶酶联免疫法测定脂蛋白代谢紊乱LPL基因突变活性降低
- B族Ⅰ型清道夫受体研究新进展被引量：3
- 2003年
- 高丽萍范春雷沃兴德
- 关键词：高密度脂蛋白受体动脉粥样硬化基因表达基因疗法
- 爪蟾卵母细胞中PPARγ-PPRE调控系统的建立和应用被引量：2
- 2005年
- 目的在爪蟾卵母细胞中建立人类PPARγ-PPRE调控系统,为PPARγ配体类药物筛选提供一个可靠的实验平台方法将调节蛋白PPAR基因构建在爪蟾卵母细胞启动子XOE下游,构成pXOE-PPARγ重组质粒;将PPRE反应元件构建在增强型绿色荧光蛋白d2EGFP报告基因的上游,得到pPPRE-d2EGFP重组质粒。将pXOE-PPARγ质粒和pPPRE-d2EGFP质粒共注射入爪蟾Ⅴ,Ⅵ期卵母细胞中,建立PPRE调控通路的表达系统,分别在含前列腺素E1(PGE1)、吡咯列酮的培养液中培养3d,对照组共注射pXOE-PPARγ质粒和pTAL-d2EGFP质粒,用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达情况。结果在含PGE1,吡咯列酮的卵母细胞中观测到绿色荧光蛋白;对照组未见到荧光。结论PGE1,吡咯列酮可以通过影响PPRE反应元件上调其下游基因的表达;通过核内共注射的方法在爪蟾卵母细胞中建立的PPARγ-PPRE调控系统。
- 严瑾沃兴德范春雷高丽萍钱颖宋家梁
- 关键词：PPARΓ爪蟾卵母细胞绿色荧光蛋白基因表达
- 川芎嗪对小鼠巨噬细胞RAW264.7蛋白质组影响的研究被引量：1
- 2012年
- 目的:从蛋白质组学水平探讨川芎嗪对巨噬细胞的作用机理。方法:巨噬细胞RAW264.7分成两组:正常对照组、实验组(川芎嗪用药组)。按照实验确定的药物浓度和作用时间作用巨噬细胞后,以差速离心法和超声裂解细胞法提取蛋白质,然后蛋白质双向电泳、质谱仪测定获得肽指纹图谱,ImageMaster 2D 6.0软件进行分析,筛选差异在2倍上下分数的蛋白质点作为有显著意义的蛋白进行质谱鉴定和生物信息学详细分析。结果:实验组与对照组比较,β-肌动蛋白,核纤层蛋白、甘油三磷酸脱氢酶、蛋白酶(前体,macropain)亚基、丙酮酸激酶、钙网织蛋白、肌球蛋白等表达均降低;细胞色素B5、核仁磷蛋白、抗氧化酶Ⅱ等表达升高。结论:川芎嗪很可能通过相关蛋白的调节影响了巨噬细胞的外部形态和运动功能,对其存在的稳定性和内在功能的发挥有重要意义。同时对细胞内部氧化、代谢的参与及凋亡的调节,很可能延长了细胞寿命,从而推测川芎嗪由外及内的调节着巨噬细胞的存在状态。
- 时小红卢德赵宋俊玲沃兴德
- 关键词：川芎嗪巨噬细胞蛋白质组
- 冠心Ⅱ号可重复性显效获得的质量标志物含量范围:量化的质量标准
- <正>我们证明:FTA(阿魏酸/丹参素/羟基红花黄色素A)与冠心Ⅱ号(冠Ⅱ)比较,FTA和A为冠Ⅱ分别贡献了～96%和～58%的V&A(舒张冠脉和抗AS,类似冠Ⅱ活血化瘀),前2者构成冠Ⅱ质量标志物(QM);多家饮片冠Ⅱ...
- 黄熙任平
- 文献传递
- 爪蟾卵母细胞固醇调控通路的建立及姜黄素的作用
- 2007年
- [目的]在爪蟾卵母细胞中建立人类SCAP/SREBP固醇调控系统,利用此系统研究姜黄素对SCAP/SREBP调控通路的作用。[方法]构建带有绿色荧光报告蛋白基因的PLXRN-4SRE-fpa质粒,将构建质粒和其他几种质粒分别提取混和成实验组质粒和对照组质粒,通过微注射的方法分别共注射到Ⅴ、Ⅵ爪蟾卵母细胞核内,与不同浓度的姜黄素共孵育3天,使用荧光定量PCR检测荧光表达量。[结果]相同浓度的姜黄素对注射含有固醇调节元件质粒的卵母细胞荧光表达量要明显高于不含相应元件的质粒。[结论]构建的质粒pLXRN-4SRE-fPA能在爪蟾卵母细胞中有效地应答SCAP、SREBP调控因子;通过影响SCAP/SREBP调控通路调节SRE-1下游基因的表达可能是姜黄素调脂作用的机理之一;利用核内共注射的方法在爪蟾卵母细胞中建立的SCAP/SREBP调控系统可作为SCAP配体类药物快速筛选和作用机制研究的细胞模型。
- 沃立科范春雷沃兴德
- 关键词：爪蟾卵母细胞姜黄素
- 爪蟾卵母细胞固醇调控报告系统的建立及中药调脂作用研究
- 2006年
- 目的在爪蟾卵母细胞中建立低密度脂蛋白受体基因表达的固醇调控报告系统,通过中药的干预培养,从基因调控水平上阐明中药调脂作用的机制,并为药物筛选提供一个可靠的实验平台。方法将绿色荧光蛋白报告基因构建在调控低密度脂蛋白受体基因表达的固醇调控元件的下游,经显微注射导入爪蟾卵母细胞,在分别用含姜黄素、茶多酚等中药的培养液中培养3d后,用荧光显微镜及荧光分析仪对绿色荧光蛋白的表达情况进行定性定量分析。结果姜黄素诱导了绿色荧光蛋白的表达。结论①姜黄素可以通过影响固醇调控元件的作用上调低密度脂蛋白受体基因的表达；②建立的固醇调控报告系统可作为降胆固醇药物筛选和作用机制研究的实验平台。
- 范春雷钱颖卢德赵沃兴德高丽萍严瑾
- 关键词：爪蟾卵母细胞低密度脂蛋白受体绿色荧光蛋白姜黄素
