江苏省自然科学基金(BK2012710)
- 作品数：5 被引量：9H指数：1
- 相关作者：郑伟娟华子春高静李香吕万胜更多>>
- 相关机构：南京大学江苏大学中国药科大学更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金国家基础科学人才培养基金更多>>
- 相关领域：医药卫生自动化与计算机技术生物学更多>>
- 雷公藤内酯醇改善IMQ诱导的银屑病样小鼠模型症状的初步探究被引量：8
- 2018年
- 银屑病是一种以角质形成细胞过度增殖和异常分化为主要病理特征的慢性炎症性皮肤病,非甾体类免疫抑制剂雷公藤多苷是目前临床使用的治疗银屑病的主要药物之一.雷公藤内酯醇能够抑制人永生化表皮细胞株HaCaT细胞的增殖,因此可能通过增殖抑制作用来减缓银屑病的症状.利用5%咪喹莫特乳膏诱导的银屑病样小鼠模型,对雷公藤内酯醇抑制表皮细胞增殖的作用进行初步探究.经腹腔注射20μg·kg-1及100μg·kg-1雷公藤内酯醇后,银屑病模型小鼠背部皮肤的红斑和皮肤鳞屑等症状均出现不同程度的减轻.皮损区HE(hematoxylineosin)染色结果证实雷公藤内酯醇能明显抑制表皮细胞的过度增殖;免疫组化结果显示雷公藤内酯醇抑制了表皮细胞中增殖细胞核抗原的表达.对皮损区进行Western blot和RT-PCR分析,结果提示雷公藤内酯醇抑制了STAT3和PD-L1的激活.此外雷公藤内酯醇还抑制了TNF-α和IL-17A的表达.
- 朱震宇周逸颉陈霭如吉丽娜郑伟娟郑伟娟
- 关键词：雷公藤内酯醇咪喹莫特STAT3增殖细胞核抗原
- hVDAC1蛋白在大肠杆菌中的表达纯化及其结构功能的初步表征
- 2016年
- 电压依赖性阴离子通道蛋白(VDAC)是线粒体外膜上最丰富的蛋白,在调节线粒体的物质代谢与能量代谢、以及线粒体介导的细胞凋亡中起重要作用,因而与肿瘤及神经退行性疾病的发生密切相关.VDAC1是三种VDAC变体中表达量最高、分布最广泛的一种.由于VDAC1的高度保守性,因此成为多种疾病治疗包括抗肿瘤治疗的理想靶点.获得足量的VDAC1蛋白是进一步研究其结构功能、筛选与VDAC1相互作用的药物分子的基础.从生物样品中直接分离纯化VDAC1,不仅条件苛刻,而且得率很低.因此利用DNA重组技术在大肠杆菌中重组表达VDAC1是获得足量蛋白、用于后续研究的重要途径.成功构建了C端带有His-tag的hVDAC1的重组蛋白原核表达质粒pET28a/hVDAC1,在大肠杆菌中以包涵体形式表达,并通过盐酸胍变性、在变性条件下通过NTA-Ni亲和层析柱纯化蛋白后进行复性的方法,获得了高纯度的hVDAC1.圆二色谱检测显示该蛋白二级结构以β-折叠为主、符合hVDAC1的二级结构特征.利用流式细胞仪检测结果显示:FITC荧光标记的hVDAC1可以与脂质体膜、细胞膜特异性结合.证明克隆表达纯化的hVDAC1具有特征的膜蛋白结构和功能,为体外筛选与hVDAC1相互作用的各类分子奠定了基础.
- 吕万胜朱伶俐吴先登王泽南郭文洁高静华子春郑伟娟
- 关键词：原核表达圆二色谱脂质体
- 新合成的锰配合物LMnAc选择性地诱导ROS和线粒体介导的细胞死亡
- 2014年
- 新合成的锰配合物LMnAc([L2Mn2(Ac)(H2O)2](Ac))能够显著,并且选择性地抑制肿瘤细胞的增殖,其选择性优于顺铂,本研究主要探讨锰配合物抗肿瘤作用的分子机制.研究发现,LMnAc的选择性抗肿瘤作用可能与其转运路径,即肿瘤细胞上高表达的转铁蛋白-转铁蛋白受体系统有关;LMnAc可诱导肿瘤细胞发生线粒体介导的凋亡和自噬;它能诱导线粒体膜电位降低,ATP产生减少,并且还能诱导细胞内Ca2+超载及活性氧(ROS)的产生;本研究还发现,用氮乙酰半胱氨酸将ROS清除后,其抗肿瘤效果显著降低,说明ROS是细胞死亡的触发者.综上所述,本研究表明,LMnAc是一种有选择性的抗肿瘤先导化合物.
- 李香赵凯迪郭文洁刘旭刘佳高静陈秋云白益东
- 关键词：锰配合物选择性自噬线粒体ROS
- 三种用于透明质酸检测的融合蛋白的构建表达及检测效果比较
- 2015年
- 透明质酸是一种长链大分子糖胺聚糖,存在于各组织器官中,是细胞外基质的重要组成部分.透明质酸不仅能够与其他胞外多糖及蛋白构成骨架,参与组织器官的结构形成,也可以与细胞表面相关蛋白受体相互作用,通过相关信号通路影响细胞的生存、增殖以及迁移.研究证实,透明质酸与肿瘤细胞的生存、迁移,肿瘤血管发生等均有密切关系,组织中透明质酸含量的变化也与某些病理状况如慢性炎症相关.因此,细胞表面或组织中的透明质酸含量的定量检测,对于疾病的诊断及预后都具有重要意义.目前透明质酸的检测方法主要依靠抗体,通过酶联免疫检测体液中的透明质酸,而缺乏在细胞或组织水平上检测透明质酸的手段.本研究将三种人源的透明质酸结合蛋白(P32,CDC37以及RHAMM)与绿色荧光蛋白(EGFP)进行融合,在大肠杆菌中进行可溶性表达,经亲和纯化,获得了三种能够与透明质酸结合的蛋白探针.通过在溶液与细胞水平上比较与透明质酸结合的能力,从中筛选出了最适合用来进行透明质酸检测的荧光蛋白探针RHC-EGFP.
- 段宁骏吕万胜贡佳郑伟娟华子春
- 关键词：透明质酸透明质酸结合蛋白绿色荧光蛋白
- 新合成的7-氮杂异靛蓝的体内外抗肿瘤作用被引量：1
- 2013年
- 对新合成的7-氮杂靛玉红类衍生物N／-（正-丁基）-7．氮杂异靛蓝[N1-（n-butyl）-7-azaisoindigo，7-AI—b1的体内外抗肿瘤作用的研究，为研发具有自主知识产权的靛玉红类抗肿瘤新药打下基础。以不同浓度的7．AI—b作用于肿瘤细胞，MTT法检测细胞活性；建立Heps／J5-癌荷瘤小鼠模型，评价7．AI_b的体内抗肿瘤作用；计算肝脏指数（1iverindex，LI）、胸腺指数（thymus index，TI）、脾脏指数（spleen index，sIL评价化合物的毒副作用；紫外法检测小鼠血清丙二醛（malondialdehyde，MDA）、谷胱甘hk（glutathione，GSH）的含量；HE染色观察肿瘤组织的变化；试剂盒检测细胞周期激酶（cyclin—dependent kinases，CDKs）的活性。结果发现，7-AI-b抑制肿瘤细胞增殖的Ic50值为28～40gmol／L，并以时间和剂量依赖性方式抑＊~]A549细胞的增殖。7-AI—b对Heps肝癌具有抑制作用且抑瘤率达到61．85％，与5-Fu~J相近；而7一AI—b对于小鼠的毒副作用明显小于后者，表现为体重正常增长，TI、sI和LI均无明显降低；等剂量的7．AI．b效果也明显优于靛玉红；并且7-AI山能增强荷瘤小鼠的抗氧化能力，使得MDA水平降低，GSH水平升高。另外，7-AI—b对于正常肝细胞株WRL-68和肝癌细胞HepG．2的毒性作用有明显差别，即具有一定的肿瘤细胞选择性。然而，7-AI—b对CDK2／cyclinA的抑制作用较弱。由此，7-AI—b可有效地抑制肿瘤的生长，且毒副作用较小，其机制可能与抑制细胞周期激酶CDKs有关，所以7-AI—b可以作为新型抗肿瘤药物进行研究。
- 李香高静徐晶晶李文赟王朝晖姚其正
- 关键词：靛玉红抗肿瘤CDKS
