国家重点基础研究发展计划(G1999011603)
- 作品数:3 被引量:25H指数:2
- 相关作者:刘耀光张群宇梅曼彤武小金姜大刚更多>>
- 相关机构:华南农业大学国家杂交水稻工程技术研究中心更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划广东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 利用反义基因沉默策略构建水稻突变体库及突变体筛选被引量:6
- 2004年
- 尝试利用鸟枪反义基因沉默策略构建水稻突变体库.利用水稻反义cDNA文库转化粳稻品种中花11,获得了来源于105块潮霉素(Hm)抗性愈伤组织的1486个转化植株.随机选择来源于11个独立转化系的335个T0植株进行Hm离体叶片筛选,结果表明所有植株均呈抗性,并且与PCR检测结果相吻合,说明T0植株中不存在假转化体.Southernblot分析结果表明T0植株大部分为单位点整合.T0及T1代转化植株均呈现了一些形态变异,如矮化、无分蘖或多分蘖、结实率降低、粒型或穗型改变、小穗结构改变等.利用Hm离体叶片筛选法对部分T1群体进行筛选,得到了1个变异性状与Hm抗性共分离的突变体,该突变体的变异表型为结实率比非转化对照下降约50%,每穗颖花总数比对照减少约40%,二者的总效应导致突变体单穗产量比对照约下降70%.
- 陈远玲张群宇简玉瑜杨跃生刘耀光
- 关键词:反义基因突变体筛选
- 用EST和SSR标记定位水稻温敏不育基因tms5被引量:17
- 2006年
- 利用cDNA抑制差减杂交技术建立了水稻减数分裂时期穗部特异表达的SSH文库,从中筛选121个cDNA片段作为EST(expressedsequencetags)标记,用RFLP(restrictionfragmentlengthpolymorphism)方法分析了温敏不育系安农S-1和正常品种安农N之间的多态性,其中一个EST标记HN57可以检测到亲本间的多态性.共分离分析结果表明,HN57与安农S-1的温敏不育性完全共分离,进而将安农S-1的温敏不育基因tms5定位于RGP(ricegenomeresearchprogram)遗传图的第二染色体的31.2cM处.为了进行精细定位,在该区域设计了80对SSR(simplesequencerepeat)引物对。
- 姜大刚卢森周海武小金庄楚雄刘耀光梅曼彤
- 关键词:水稻安农S-1
- RFLP缩减杂交技术的改良与水稻雄性不育细胞质基因组差异片段的克隆被引量:2
- 2004年
- 对基因组RFLP缩减杂交技术进行了改良,即用连接成大分子的DriverDNA与TesterDNA杂交,再利用PCR纯化试剂盒对大片段DNA回收率低的原理去除大部分DriverDNA以及与之杂交的非特异性TesterDNA片段.经过PCR扩增和克隆,获得多态性片段,可快速获得在亲本间有差异的分子标记.用该技术对水稻野败型雄性不育细胞质和正常细胞质DNA进行RFLP缩减杂交,获得了2个在不育系细胞质DNA与保持系细胞质DNA间的差异片段.
- 张群宇刘耀光
- 关键词:水稻雄性不育细胞质基因片段克隆