河北省自然科学基金(301360)
- 作品数：16 被引量：71H指数：6
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- 相关机构：河北医科大学华北煤炭医学院河北医科大学第二医院更多>>
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- Na^+,K^+-ATP酶参与大鼠皮层神经元NMDA电流的调节被引量：2
- 2011年
- 目的观察Na+,K+-ATP酶是否参与神经元缺氧后兴奋性氨基酸电流的改变及其发生机制。方法利用全细胞脑片膜片钳技术,记录出生12～16 d的SD乳大鼠脑片皮层神经元在正常和缺氧时的NMDA电流,分别观察不同浓度的双氢哇巴因(dihydroouabain,DHO)对此电流的影响。结果无论在正常或缺氧条件下,不同浓度的DHO(10-11～10-3 mol.L-1)和矾酸钠(vanadate)均能浓度依赖性抑制皮层神经元的NMDA电流,然而,孵育不同浓度DHO后引起的NMDA电流密度在低氧时明显大于常氧时。结论提示神经元Na+,K+-ATP酶参与NMDA电流的调节,但低氧时主要由兴奋性氨基酸调节。
- 刘倩郭会彩张丽男王永利
- 关键词：NMDA神经元膜片钳脑片
- 可视化动缘探测系统同步检测慢性心衰对豚鼠心肌细胞舒、缩功能和钙瞬变的影响被引量：7
- 2006年
- 目的建立豚鼠慢性充血性心力衰竭(CHF)模型,采用可视化动缘探测系统同步检测慢性心衰对豚鼠心肌细胞舒缩功能及钙瞬变的影响。方法采用有无呼吸困难、左心室质量与体质量比值、肺质量与体质量比值、室壁厚度及血流动力学指标判断,以降主动脉缩窄法建立豚鼠CHF模型成功后,以酶解法急性分离其左室心肌细胞,用可视化动缘探测系统同步检测慢性心衰豚鼠心肌细胞收缩力和钙瞬变的变化,并与正常豚鼠心肌细胞进行比较。结果降主动脉缩窄8 wk后,出现呼吸困难的豚鼠,其左室收缩压及舒张末压显著性增高,左室压上升和下降最大速率降低;左心室质量与体质量比值、肺质量与体质量比值及室壁厚度明显增高,呈现明显的心衰指征;心衰心肌细胞与正常细胞相比,其收缩幅度、收缩和舒张速度均明显减弱;舒张期细胞内钙升高,钙瞬变幅度减小,舒张期钙减少50%所需时间延长,但收缩期钙及细胞内钙达峰时间无明显改变。结论降主动脉缩窄8 wk后,豚鼠呼吸困难是判断CHF模型形成的指标;慢性心衰可使心肌细胞收缩力下降,钙瞬变幅度减小,这为探讨慢性心衰的发生机制提供了实验依据。
- 齐亚娟郭芳李吉和李树民刘雪莉郭会彩王永利
- 关键词：慢性充血性心力衰竭钙瞬变心肌细胞
- Na＋／K＋泵参与缺氧诱发的大鼠脑血管收缩的体外研究被引量：1
- 2013年
- 目的探讨Na+/K+泵是否参与缺氧诱发的脑血管收缩。方法以PSS、K-PSS、oua-PSS、oua-K-PSS或K-free-PSS液灌流大鼠离体基底动脉后5、10、15、30和60 min时,以压力肌动描记系统记录缺氧前后血管直径的变化。结果缺氧、K+和哇巴因灌流均可使大鼠基底动脉产生明显收缩,缺氧可增强K+、10-8和10-7mol·L-1哇巴因对正常基底动脉的收缩(P<0.01),但对K+与10-8或10-7mol·L-1哇巴因共同预收缩的基底动脉以及5×10-7mol·L-1哇巴因收缩的基底动脉并无影响。而且用可取消Na+/K+泵活性的无K+-PSS液,不管在正常或缺氧情况下,均能使基底动脉在5min内达到最大收缩。结论 Na+/K+泵可能参与了缺氧诱发的脑血管收缩,其机制可能与缺氧抑制Na+/K+泵有关。
- 孟岩罗红任晓华王永利
- 关键词：缺氧哇巴因基底动脉血管收缩
- 低浓度哇巴因升高豚鼠心室肌细胞内游离钙浓度可能的信号转导途径被引量：2
- 2007年
- 目的:观察哇巴因(ouabain,OUA)对豚鼠心室肌细胞内游离钙浓度([Ca^(2+)])的影响,并探讨低浓度OUA是否可通过Na^+,K^+-ATPase的信号转导途径升高[Ca^(2+)]。方法:分离豚鼠心室肌细胞,激光共聚焦显微镜术测定单个心室肌细胞[Ca^(2+)]的荧光密度,另用不同浓度OUA孵育急性分离的豚鼠心室肌细胞后,分别取其沉淀用Western印迹检测观察OUA对酪氨酸蛋白(Src)磷酸化的影响。结果:在正常台氏液及无钙台氏液中,OUA(10^(-9),10^(-8),10^(-7),10^(-6)mol·L^(-1))均可浓度依赖性地升高细胞内钙浓度(P<0.05或0.01),且在正常台氏液中升高更为显著(P<0.05)。蛋白酪氨酸激酶抑制剂三羟异黄酮(genistein,GST)(1、10、50、100μmol·L^(-1))可浓度依赖性地抑制正常台氏液中的OUA效应。磷酸化Src包括相对分子质量120 000和70 000两个条带,各剂量OUA(10^(-4),10^(-6),10^(-8)mol·L^(-1))均能使Src的两个磷酸化条带的密度较阴性对照组显著升高(P<0.05),而GST(100μmol·L^(-1))可显著抑制OUA的升高效应。结论:低浓度OUA可能通过使酪氨酸蛋白磷酸化,激活OUA/Na^+,K^+ATPase/Src信号转导通路,促使钙通道开放及内钙释放,从而升高豚鼠心室肌细胞内游离钙浓度。
- 熊晨武彦昭张哲王永利
- 关键词：心室肌细胞哇巴因
- 低浓度强心甙对豚鼠心室肌细胞Na^+/K^+泵电流的激活作用被引量：3
- 2003年
- 目的 :解释治疗水平 (低浓度 )强心甙的正性肌力作用。方法 :用全细胞膜片钳技术 ,在分离的豚鼠心室肌细胞观察到双氢哇巴因 (DHO)对 Na+/ K+泵电流 (Ip )的激活作用。结果 :DHO在 10 - 8～ 10 - 1 0 m ol· L- 1范围内可增加外向电流。当从细胞外液去除 K+或从电极内液去除 Na+或胞内应用 vanadate抑制了 Ip后 ,外向电流消失。结论 :DHO可使 Na+/ K+泵兴奋 ,产生了外向泵电流。Ip激活是低浓度强心甙对心脏 Na+/ K+泵的直接作用。
- 尹京湘王永利李清丁延峰苏素文
- 关键词：豚鼠心肌细胞膜片钳术
- 毒毛旋花子苷原对正常和心衰心肌单细胞收缩力和钙瞬变的作用被引量：7
- 2008年
- 目的检测毒毛旋花子苷原(Str)对正常和心衰心肌单细胞收缩力和钙瞬变的作用。方法采用降主动脉缩窄建立豚鼠慢性充血性心力衰竭模型,酶解法急性分离左室心肌细胞,同步检测Str对单个正常细胞(NC)和心衰细胞(FC)收缩力和钙瞬变的影响,并检测Str是否具有钙增敏作用。结果0.1、1、10、25μmol.L-1Str可使NC和FC收缩幅度、钙瞬变幅度呈剂量依赖性增大;同剂量时,Str对FC的作用比NC更明显;但Str对NC和FC收缩时程及钙瞬变时程均无影响。Str对NC具有钙增敏作用,而对FC没有。结论Str增加FC的收缩力和钙瞬变作用比NC更明显,而Str仅对NC具有钙增敏作用。
- 齐亚娟李吉和李树民王永利
- 关键词：慢性充血性心力衰竭收缩力钙瞬变
- 肾上腺素能受体对心肌钠钾泵的亚基特异性调节被引量：6
- 2011年
- 钠钾泵是镶嵌在哺乳动物细胞膜上的一种蛋白质,在维持细胞内离子平衡、能量代谢和信号传递中都发挥着重要作用。其功能的紊乱和调节异常会引起严重的病理生理变化。肾上腺素能受体是钠钾泵的一个重要调节因子。该文即对肾上腺素能受体对心肌钠钾泵的亚基特异性调节及研究进展进行的综述。
- 殷健郭会彩王永利
- 关键词：钠钾泵Β-肾上腺素能受体PKCPKA
- 豚鼠心衰时心肌细胞收缩和钙瞬变的变化被引量：6
- 2006年
- 目的探讨慢性心衰时豚鼠心肌细胞收缩及钙瞬变的变化。方法以降主动脉缩窄法及异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)法建立豚鼠慢性心衰模型成功后,以酶解法急性分离左室心肌细胞,然后同步检测两种心衰时心肌细胞收缩和钙瞬变的变化。结果降主动脉缩窄8周后,70%豚鼠出现呼吸困难(BPC组),而给予ISO 8周后的豚鼠(ISO组)未见明显呼吸困难,BPC组及ISO组豚鼠的左室收缩压及舒张末压显著增高,左室压上升和下降最大速率显著降低;左心室质量与体质量比值、肺质量与体质量比值及室壁厚度明显增高,均呈现明显的心衰特点。而缩窄8周后未见呼吸困难的豚鼠(BWPC组)仅左心室质量与体质量比值增加,心脏功能尚处于代偿期。两种心衰心肌细胞收缩幅度、收缩和舒张速度均明显减弱,且BPC组收缩幅度、舒张速度比ISO组减弱更明显;BWPC组的心肌细胞收缩幅度、收缩和舒张速度却明显增高。BPC组心肌细胞内舒张期钙升高,钙瞬变幅度减小,舒张期钙减少50%所需时间(T50DCa)延长;而BW-PC组心肌细胞内钙无明显变化;ISO组心肌细胞内舒张期钙和收缩期钙均降低,钙瞬变幅度也减小,T50DCa却无明显改变。结论降主动脉缩窄或给予ISO 8周后,均可造成豚鼠心衰。心衰后心肌细胞收缩功能减弱,钙瞬变幅度减小。
- 齐亚娟郭芳李吉和刘雪莉李树民郭会彩王永利
- 关键词：慢性心衰缩窄异丙肾上腺素细胞收缩钙瞬变
- Na^＋，K^＋-ATP酶不参与慢性心衰豚鼠心肌细胞钙瞬变的减小
- 2009年
- 目的研究Na+,K+-ATP酶是否参与慢性心衰(CHF)豚鼠心肌细胞钙瞬变的减小。方法采用降主动脉缩窄(CDA)法和异丙肾(ISO)法建立豚鼠慢性心衰模型;酶解法急性分离左室心肌细胞;采用无机磷法测定心肌细胞膜Na+,K+-ATP酶活性,采用RT-PCR和Western blot检测CHF心肌Na+,K+-ATP酶α1、α2亚单位在mRNA水平和蛋白水平的表达。结果CDA法致心衰后Na+,K+-ATPα1、α2亚单位在mRNA水平均明显减少,ISO法α1明显减少,α2无变化;但两种方法致豚鼠CHF后,心肌细胞Na+,K+-ATP酶α1亚单位在蛋白水平的表达及酶活性均无改变。结论豚鼠CHF后钙瞬变的减小,没有Na+,K+-ATP酶的参与。
- 齐亚娟白静李吉和李树民郭会彩刘雪莉王永利
- 关键词：慢性心衰钙瞬变NA^+,K^+-ATP酶
- 大鼠心肌细胞分离方法的改进被引量：13
- 2010年
- 目的介绍一种易于判断酶解终点的分离大鼠心肌细胞的方法。方法成年SD大鼠麻醉后开胸取出心脏,分别采用传统的Langendorff灌流装置和本实验室改进的Langen-dorff灌流装置,于恒温37℃灌流消化液(含0.6%胶原酶B,0.6%BSA,30μmol.L-1Ca2+的台氏液)分离细胞,并采用IonOptix单细胞动缘检测系统检测细胞功能。结果传统的Langendorff灌流装置分离细胞,酶解时间约13～16min,但此法终点难以判断,每次分离的细胞质量差别较大,且不耐钙,收缩的稳定性较差。而以改进的Langendorff灌流装置分离细胞易于确定消化终点,细胞成活率大于80%,在含1.8mmol.L-1Ca2+的台氏液中存活率也高达50%。给予电压15V、频率1Hz、波宽4ms的持续电刺激时,其在1000s内收缩舒张功能稳定。结论经改造的Langendorff灌流装置分离的心肌细胞成活率高,可控性强,结果稳定,能够更好地用于检测细胞收缩舒张功能的实验。
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- 关键词：LANGENDORFF心肌细胞细胞分离
