教育部科学技术研究重点项目(209090)
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
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- 肿瘤转移抑制蛋白MTss1 shRNA慢病毒载体的构建与鉴定被引量：2
- 2011年
- 肿瘤转移抑制蛋白MTss1在小脑浦肯野神经元发育中表达受到调控,然而功能并不清楚。拟通过RNAi的方法降低内源MTss1的表达,为MTss1在神经元中的功能研究建立基础。针对小鼠MTss1基因(Mtss1)的mRNA序列,设计合成三对shRNA序列,克降到pSuper-Retro-Puro质粒中,瞬间转染GFP-Mtss1持续表达的N1H 313细胞株,western blot结果表明三对shRNA序列均可有效抑制MTss1的表达。进一步从pSuper质粒上酶切含shRNA的片段,克隆到慢病毒载体pLVTHM中并与包装质粒和衣壳质粒共转293T细胞,收集含病毒的上清液,测定感染效率。结果表明成功构建抑制MTss1基因表达的shRNA慢病毒载体,为内源MTss1的功能研究提供基础。
- 毛亚江蒋鹏梁宋平王迎
- 关键词：SHRNA慢病毒
