浙江省教育厅科研计划(20040232)
- 作品数：2 被引量：13H指数：2
- 相关作者：沈建根潘建平张松照廖志雄张利群更多>>
- 相关机构：浙江大学更多>>
- 发文基金：浙江省教育厅科研计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 重组血管活性肠肽基因质粒治疗大鼠胶原性关节炎的研究被引量：5
- 2006年
- 目的:观察重组血管活性肠肽(pcDNA 3.1+/V IP)质粒治疗胶原诱导的大鼠关节炎(C IA)对血清TNFα-、IL-2、IL-4表达的影响和病理变化,探讨V IP基因治疗类风湿性关节炎的效果及可能机制。方法:以Ⅱ型胶原诱导的大鼠关节炎作为C IA模型,重组血管活性肠肽质粒关节腔内注射治疗C IA,以双抗体夹心酶联免疫吸附法(ABC-EL ISA)检测血清TNFα-、IL-2和IL-4的表达,观察病理变化和整体疗效。结果:①病理切片显示C IA模型组炎性细胞浸润明显,并存在骨和软骨破坏,V IP治疗组可显著减轻关节炎性病理改变;②细胞因子测定显示:与正常组相比,各对照组血清TNFα-、IL-2水平显著升高(P<0.05),IL-4水平减低(P<0.05);与各对照组相比,各重组V IP质粒治疗组血清TNF-α和IL-2表达水平均明显降低(P<0.05),IL-4表达则升高(P<0.05)。结论:血管活性肠肽基因质粒关节腔内注射治疗大鼠C IA具有显著的疗效,有望成为RA的有效治疗手段。
- 张利群沈建根
- 关键词：基因疗法
- 血管活性肠肽真核表达质粒的构建及鉴定被引量：8
- 2005年
- 目的构建一种具有生物学活性的血管活性肠肽(VIP)的真核表达质粒。方法利用RT-PCR从小鼠胸腺淋巴细胞中克隆有信号肽序列的VIPcDNA,插入真核表达载体pcDNA3.1,构建含VIP的重组质粒pcDNA3.1-VIP,转染COS-7细胞,用ELISA和Westernblot鉴定表达的蛋白,细胞因子释放抑制法测定生物学活性。结果经酶切和基因测序证实,克隆的基因片段为带有信号肽序列的VIP基因;经转染的COS-7细胞表达VIP蛋白,并能有效地抑制巨噬细胞的TNF-α释放。结论成功构建了能够表达具有生物学活性的真核表达质粒pcDNA3.1-VIP。
- 张松照沈建根廖志雄潘建平
- 关键词：血管活性肠肽质粒基因表达
