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基于T-Hg^(2+)-T及G四聚体自身熄灭能力的“Turn on”型单标记DNA荧光探针用于碘离子的检测被引量：3: 2012年; 利用G四聚体可以熄灭荧光的特性以及T-Hg2+-T的特殊结构,发展了一种简便的"Turn on"型碘离子检测新方法.设计了一条5'端标有荧光基团的富T序列,3'端采用能形成G四聚体的富G序列代替传统的熄灭基团.加入汞离子后,富T序列形成T-Hg2+-T机构发生折叠,G四聚体靠近荧光基团,发生光诱导电子转移,使荧光被熄灭.若加入碘离子,碘离子会与汞离子形成较稳定的配合物,汞离子从DNA上被竞争下来,探针的荧光得以恢复,且荧光强度与50～500 nmol/L的碘离子呈良好线性关系,检出限为30 nmol/L.本方法选择性好,10倍于碘离子浓度的其它常见阴离子干扰较小.检测自来水样中碘离子的回收率为92%～109%,相对标准偏差RSD<4%(n=4).; 朱颖刘沛羊小海何磊良李清照王青王柯敏黄晋刘剑波; 关键词：碘离子 DNA探针

纳米金颗粒增强信号的表面等离子体共振生物传感器用于甲氧檗因高灵敏检测的研究被引量：4: 2012年; 报道了一种基于表面等离子体共振(SPR)生物传感器的高灵敏检测抗癌药物甲氧檗因的新方法.分别在纳米金颗粒和金膜表面修饰富含腺嘌呤(A)的DNA链,当存在甲氧檗因时,由于一个甲氧檗因分子可与4个A碱基相结合,从而使得修饰在纳米金颗粒和金膜表面的DNA形成稳定的双链结构,进而将功能化纳米金颗粒捕获在金膜表面.由于纳米金颗粒与金膜之间的电场耦合效应可增强SPR信号,从而可实现对小分子甲氧檗因的高灵敏、特异性检测.本方法的检测下限低至0.07 pmol/L,相对比色法和荧光法而言,降低了约5～6个数量级.以4种药物(盐酸小檗碱、青霉素G、硫酸庆大霉素、5-氟尿嘧啶)作为对照考察了该传感器的选择性,结果表明该传感器具有较好的选择性.; 王青朱红志羊小海王柯敏杨丽娟丁静; 关键词：表面等离子体共振纳米金颗粒 DNA 生物传感器

基于脱氧核酶功能化的金纳米颗粒增强信号的比色方法用于肌红蛋白的检测: 急性心肌梗死是指由于心肌缺血时间过长而导致细胞死亡的一种疾病。肌红蛋白常被用作急性心肌梗死早期诊断的的标志物,因此检测肌红蛋白具有重要的生理意义。本研究报道了一种基于脱氧核酶功能化的金纳米颗粒增强信号的新型比色方法用于肌...; 杨晓涵王青羊小海王柯敏黄晋刘剑波王晶晶; 关键词：肌红蛋白脱氧核酶金纳米颗粒

基于MCM-41负载联吡啶钌的电致化学发光传感器被引量：2: 2012年; 利用静电吸附作用将联吡啶钌[Ru(bpy)23+]负载到巯基化MCM-41介孔二氧化硅纳米颗粒上,通过金-巯键修饰法将负载后的MCM-41固定在金电极表面,发展了一种基于MCM-41负载联吡啶钌的电致化学发光传感器,并研究了其电化学及电致化学发光行为.基于三聚氰胺与增敏剂三正丙胺氨基结构的相似性,将负载Ru(bpy)23+的MCM-41电致化学发光传感器用于三聚氰胺的检测,获得了良好的检测效果,为检测三聚氰胺提供了一种快速、简便的方法.同时,该研究为Ru(bpy)23+在电极表面的固定化提供了新思路.; 王永红何晓晓王柯敏苏婧陈智峰晏根平; 关键词：电致化学发光联吡啶钌三聚氰胺

pH响应的介孔二氧化硅纳米颗粒的制备及可控释放被引量：9: 2012年; 选择带负电荷且溶解度和分子结构对pH值非常敏感的聚丙烯酸作为封堵分子,采用静电吸附的修饰方法,制备了pH响应的MCM-41型介孔二氧化硅纳米颗粒.利用高倍透射电子显微镜(TEM)、X射线衍射(XRD)、傅里叶变换红外光谱(FTIR)及比表面积分析等手段表征了介孔二氧化硅纳米颗粒的物理化学性质.以联钌吡啶染料分子作为模式客体分子,研究了pH调控下的模式客体分子在介孔二氧化硅纳米颗粒中的包裹及释放行为.结果表明,该介孔二氧化硅纳米颗粒对pH具有很好的响应性;在近中性条件下,带正电的二氧化硅纳米颗粒通过静电吸附作用吸附带负电的聚丙烯酸,导致介孔封堵,使包载的染料分子几乎无释放;客体分子的释放率随着pH值的降低而升高,当pH≤5时,染料分子显著释放,pH=1时客体分子的释放率高达98%,可以实现对包载客体分子的控制释放.该pH响应的介孔二氧化硅纳米颗粒载体具有制备简便、价格低廉和包载量大等优点,有望应用于药物的控制释放.; 曹杰何定庚何晓晓王柯敏赵应香; 关键词：聚丙烯酸

动态光散射技术用于氟离子的检测被引量：4: 2012年; 基于氢键取代作用,氟离子可以降低巯基乙胺-CdTe量子点之间的团聚,提高量子点的分散性,使量子点的水合粒径随着氟离子浓度的增加而逐渐减小.基于此,本文发展了一种基于动态光散射(DLS)技术检测氟离子的方法,其检出限为20 nmol/L,与荧光方法和传统的氟离子选择性电极相比,其检出限降低了约2个数量级.; 王青杨丽燕刘剑波羊小海王柯敏嵇海宁刘艳; 关键词：动态光散射氟离子量子点团聚

基于甘露糖功能化的水凝胶用于E.coli O157：H7的检测被引量：3: 2012年; 利用伴刀豆球蛋白A(Con A)的多价结合能力,结合水凝胶技术与核酸染色技术发展了一种基于甘露糖功能化的水凝胶检测大肠杆菌(E.coli)O157∶H7的方法.以过硫酸铵(APS)为催化剂,四甲基乙二胺(TEMED)为加速剂,用丙烯酰胺(AAm)、N,N-二甲基双丙烯酰胺和N-丙烯酰氧琥珀酰亚胺(NAS)合成水凝胶,通过氨基化甘露糖与NAS发生交联反应,制备了甘露糖功能化的水凝胶.当甘露糖功能化的水凝胶加入与Con A共孵育后的菌悬液中时,由于Con A既能与甘露糖特异性结合,又能与E.coli O157∶H7表面的O-抗原发生免疫反应而紧密连接,使目标菌被捕获到水凝胶表面,采用核酸染料SYBR GreenⅠ对捕获细菌进行染色,实现了对E.coli O157∶H7的核酸标记,最后通过活体荧光成像系统对水凝胶进行荧光成像,从而实现对待测样品的检测.研究结果表明,该方法可应用于缓冲液体系和混合细菌样品中E.coli O157∶H7的特异性检测,且整个检测步骤包括样品预处理可在2 h内完成.该方法成本低、易操作,且具有较好的灵敏度,可检出3.7×101Cells/mL的目标细菌样品.; 周丽霞何定庚何晓晓卿志和王柯敏曹杰; 关键词：水凝胶 SYBR 大肠杆菌O157:H7

基于免标记发夹型探针和核酸外切酶Ⅲ的荧光信号放大DNA检测被引量：6: 2014年; 设计合成了一种长臂发夹型核酸探针,结合核酸外切酶Ⅲ水解反应建立了一种免标记荧光信号放大高灵敏检测DNA的新方法。当不存在靶DNA时, SYBR Green Ⅰ荧光染料能够嵌入发夹型探针的茎部而发出很强的荧光,而当存在靶DNA并与发夹型探针杂交后,核酸外切酶Ⅲ从杂交产物的3’端开始水解发夹型探针,释放出靶DNA,并触发下一个酶水解反应,同时SYBR Green Ⅰ染料也随发夹型探针水解而释放,导致荧光信号降低,从而实现了对DNA的免标记荧光信号放大高灵敏检测。该方法的检出限低至320 fmol/L,比传统双标的分子信标的方法降低了4~5个数量级,且该方法还具有免标记、简单、快速的特点。; 郭秋平赵下雨谢琴王柯敏万俊袁宝银谭誉宇; 关键词：信号放大 DNA检测

表达大鼠FoxA1的慢病毒制备和鉴定被引量：1: 2012年; 通过PCR扩增获得大鼠FoxA1的cDNA,构建慢病毒重组载体plv-rFoxA1-IRES-EGFP,并瞬时转染293T细胞观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达及Western blot检测FoxA1的表达.通过钙转将该重组载体与辅助质粒△8.91,pVSV-G共转染293T细胞制备慢病毒.研究结果表明,大鼠FoxA1慢病毒质粒成功构建,并且证实所制备的慢病毒能感染细胞,使细胞有效表达FoxA1蛋白,为FoxA1的功能研究奠定了材料基础.; 谭拥军谢骊杨潮何斯佳谭桂湘; 关键词：质粒慢病毒 PCR

单分子力谱研究活细胞上多药耐药相关蛋白1的表达被引量：2: 2012年; 采用原子力显微镜的单分子力谱(SMFM)技术研究了多药耐药相关蛋白1(MRP1)与其抗体间的相互作用,并考察了人舌癌细胞系TCA8113经高剂量平阳霉素(BLM)反复间歇诱导前后细胞表面MRP1的表达差异.实验结果表明,MRP1与其抗体之间存在特异性相互作用力,当针尖运动速率为2.5μm/s时,作用力大小约为(182±35)pN;而且药物诱导后MRP1在人舌癌细胞上的表达明显增强.本工作为了解活细胞水平上MRP1的表达提供了新方法,有助于肿瘤细胞多药耐药性(MDR)的研究.; 王青孙小兰羊小海王柯敏吴春玲陈桐; 关键词：原子力显微镜单分子力谱多药耐药性

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国际科技合作与交流专项项目(2010DFB30300)

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