江西省教育厅科技计划项目(2005-229)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：姜琼陈武易增兴谢妤更多>>
- 相关机构：宜春学院江西省天然药物活性成分研究重点实验室更多>>
- 发文基金：江西省教育厅科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 蚓激酶基因在毕赤酵母中的表达
- 2009年
- 将蚓激酶基因克隆到毕赤酵母(Pichia pastoris)表达载体pPIC9k-lum3。将其线性化后转化毕赤酵母GS115,挑选Muts型毕赤酵母转化子,经甲醇诱导表达,纤维平板法检测其上清液纤溶酶活性最大为80U/mL。
- 姜琼谢妤陈武
- 关键词：蚓激酶毕赤酵母
- 蚓激酶基因在大肠杆菌中的表达被引量：2
- 2008年
- [目的]实现蚓激酶基因在大肠杆菌中的高效表达。[方法]采用RT-PCR技术,以含蚓激酶基因的质粒pMD18-Tf3为模板进行RT-PCR扩增,克隆了蚓激酶基因Tfc,并进行测序,之后将蚓激酶基因Tfc克隆到大肠杆菌表达载体pBV220,转化大肠杆菌DH5α,用LB培养基于30℃培养24 h后,然后调温至42℃继续培养2 h诱导蚓激酶基因表达,收集菌体,进行SDS-PAGE电泳,利用纤维平板法检验蚓激酶的活性。[结果]测序发现该基因全长729 bp,共编码243个氨基酸,GenBank登录号为EU167735。SDS-PAGE电泳表明诱导表达后菌体总蛋白在28 kD处有一特异性条带,而含空质粒pBV220的大肠杆菌经诱导表达后无该条带,表达蛋白主要以包涵体形式存在,无纤维蛋白酶活性。[结论]该研究为创新蚓激酶的生产工艺提供了依据。
- 姜琼易增兴陈武
- 关键词：蚓激酶大肠杆菌
