教育部科学技术研究重点项目(209023)
- 作品数：2 被引量：7H指数：1
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- 金黄色葡萄球菌fnbB基因D2-D3编码区克隆及其植物表达载体构建
- 2012年
- 金黄色葡萄球菌是引起奶牛乳腺炎的主要致病菌,其表面的纤连素结合蛋白(FnBP)在介导金黄色葡萄球菌侵入寄主细胞的过程中发挥着重要作用。因此,FnBP成为奶牛乳腺炎亚单位疫苗研究中的重要靶标。本研究根据Genbank中纤连素结合蛋白B基因(fnbB)D区编码序列设计引物,以金黄色葡萄球菌基因组DNA为模板,PCR扩增D2-D3区,将该片段回收后与pCAMBIA3301植物表达载体同时进行NcoⅠ和Eco 065Ⅰ(BstEⅡ)双酶切,酶切片段回收后进行连接,将连接产物转化大肠杆菌感受态细胞,通过菌落PCR、酶切鉴定等方法筛选阳性克隆,将阳性克隆送公司测序确定DNA序列。结果表明,阅读框架正确,氨基酸序列无突变,成功构建金黄色葡萄球菌fnbB基因D2-D3区植物表达载体。该研究为研制奶牛乳腺炎转基因植物口服疫苗奠定了基础。
- 张彦茹崔海辰刘惠荣王光霞
- 关键词：金黄色葡萄球菌克隆
- 马铃薯再生体系的建立被引量：7
- 2012年
- 马铃薯再生体系的建立是进行马铃薯遗传转化的前提条件。本研究以马铃薯克新1号为植物材料,对马铃薯愈伤组织的诱导、不定芽的分化进行了最佳培养基优化。结果表明,马铃薯诱导愈伤组织的最佳培养基激素浓度是2.5mg/L 6-BA、0.2mg/L NAA,且茎段的诱导率要高于叶片的诱导率。不定芽分化的最佳培养基激素浓度为2.0mg/L 6-BA、0.1mg/L NAA、5.0 mg/L GA3,诱导率为30%,诱导的不定芽在0.2 mg/L NAA生根培养基中可以正常生根。本研究初步建立了马铃薯再生体系,为后续的金黄色葡萄球菌奶牛乳腺炎转基因马铃薯疫苗的制备奠定了基础。
- 崔海辰董磊陶龙鑫朱香园刘惠荣
- 关键词：土豆愈伤组织诱导
