国家自然科学基金(30973837)
- 作品数：13 被引量：51H指数：4
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- 一种新型大量粪便肠黏膜提取方法在结直肠癌筛查中的应用被引量：1
- 2016年
- 目的探讨一种新型的大量粪便肠黏膜提取方法在结直肠癌筛查中的应用。方法收集2014年3—4月间，于南京中医药大学第三附属医院拟行手术治疗的10例结直肠癌患者术前1次完整粪便标本和手术切除癌组织标本。同时收集6例肠镜检查未见异常的6例同期住院患者的肠黏膜组织及1次完整粪便标本。使用自制的肠黏膜收集器（该肠黏膜收集器由上、中、下3个体积为1000ml容器组成，3层底部均分别有层滤网，孔径分别为100、200及300目，逐层过滤后收集液体）肠黏膜脱落细胞，采用粪便DNA试剂盒提取脱落细胞DNA，检测DNA浓度及纯度（A260/A280），并对提取的粪液以及肠黏膜组织进行甲基化测序。结果DNA甲基化测序发现，FBN1、SPG20及SNCA基因在lO例结直肠癌患者的癌组织和粪便提取液标本中CpG岛均出现甲基化。而在6例对照患者的活检肠黏膜和粪便提取液标本中均未发现甲基化。粪便重量在100g以下时，粪液收集率在60％～80％之间；粪便重量超过100g后，粪液收集率不稳定；粪便重量在50～100g之间时，DNA的A260/A280值在1．6～1．8之间，浓度在5．0～56．1μg／ml之间。结论本研究采用自行设计的大量粪便肠黏膜收集器一次性处理50～100g粪便时，粪液收集率较为稳定，可获取纯度和浓度较高的DNA，达到检测结直肠肿瘤甲基化状态的需要，便于结直肠癌的筛查。
- 邓超马炯金黑鹰龚伟王水明陈豪范怡梅杨青兰
- 关键词：结直肠肿瘤DNA甲基化
- Notch信号转导途径配体基因JAG1和DLL1在结直肠癌中的表达及临床意义被引量：1
- 2012年
- 目的探讨Notch信号传导途径配体基因JAG1和DLL1在结直肠癌的表达及其与临床病理特征和肿瘤预后之间的关系。方法回顾性分析2004年8月至2006年9月在南京中医药大学第三附属医院全国肛肠医疗中心行手术治疗的146例结直肠癌患者的临床及随访资料．建立患者肿瘤标本组织芯片并对JAG1和DLL1基因表达进行免疫组织化学检测。结果146例患者JAG1表达与其肿瘤分化程度有关．DLL1表达在不同肿瘤部位的表达差异有统计学意义（均P〈0．05）；两种基因表达与微卫星不稳定状态之间差异无统计学意义（P〉0．05）。134例（91．8％）患者获随访，随访时间（42．3±13．3）个月。无瘤生存86例（64．1％），1、3和5年总生存率分别为93％、74％和67％。多因素分析显示，患者预后与TNM分期、病理学类型、微卫星状态、JAG1基因表达有关（P〈0．05）。JAG1基因高表达患者预后优于阴性表达和弱阳性表达的患者（P〈0．05）。结论Notch信号转导途径配体基因JAG1和DLL1表达分别与肿瘤分化程度及肿瘤部位有关．JAG1基因与预后有关。
- 金黑鹰徐俊华王小峰丁义江
- 关键词：结直肠肿瘤预后
- 三腔间隙引流(TCC)可降低肛周脓肿术后肛瘘发生率:一项匹配病例对照研究被引量：1
- 2018年
- 目的:本研究目的旨在评估三腔间隙引流(TCC)治疗肛周脓肿的安全性和有效性。方法:收集2013年6月至2016年3月间在南京中医药大学附属第二和第三医院的肛周脓肿患者的病例资料,其中,46例患者接受了TCC治疗。按照性别、年龄、脓肿部位进行1:1:1匹配,选取同期行单纯切开引流术的46例患者和行一期切开引流挂线术(根治性手术)的46例患者进行对比分析。比较三组患者的住院时间、切口愈合时间、肛瘘发生率及肿门失禁情况。结果:TCC组患者术后肛瘘发生率为13.0%,显著低于单纯切开引流组(39.1%,P<0.01),与根治性脓肿切开组相当(8.7%,P>0.05)。根治性脓肿切开组有2例患者术后出现肛门失禁、腹胀和污粪,其Wexner失禁评分分别为6分和3分;而TCC组和单纯切开引流组无肛门失禁发生。三组患者切口愈合时间和住院时间的差异均无统计学意义(均P>0.05)结论:TCC是一项安全有效的保留括约肌功能的肛周脓肿治疗术式,可降低脓肿引流术后肛瘘发生率。该术式有望在临床实践中推广应用,其临床疗效尚需进一步研究证实。
- Heiying JinYan ChenBei Zhang
- 关键词：肛周脓肿挂线术
- 高脂血症对结直肠癌模型化疗作用影响的实验研究被引量：4
- 2013年
- 目的研究高脂血症对结直肠癌模型化学治疗的影响。方法通过高脂饮食喂养及肿瘤移植建立高脂血症结肠皮下易位结肠癌原位移植模型。将70只裸鼠分为7组，每组10只，其中有两组为预实验组，另外5组中有4组为高脂饮食组（G1～G4），1组为对照组（G5）予以常规饮食。G1组给予生理盐水，G2-G5分别给予卡培他滨和辛伐他汀处理3周，观察5组裸鼠肿瘤的体积、体质量和增长率以及血脂指标（TC、TG、HDL、LDL、Lpa、apoA、apoB）。结果G1～G4组TC、HDL和apoA升高，与喂养前相比，差异有统计学意义（分别为P〈0．05和P〈0．01），而TG、LDL、Lpa和apoB有增高趋势，但与喂养前相比差异无统计学意义（均P〉0．05）。G1组在各时间点肿瘤体积增长率均超过其他各组，除G3组（P〉0．05）外，差异均具有统计学意义（分别为P〈0．01和P〈0．05）；单纯使用辛伐他汀治疗的G3组肿瘤增长率低于G1组，但是高于G2、G4和G5组，差异有统计学意义（分别为P〈0．01和P〈0．05）；G5组肿瘤生长高于G2和G4组，差异无统计学意义（P〉0．05）；使用卡培他滨合并辛伐他汀处理的G4组肿瘤生长最慢，略低于单纯使用卡培他滨处理的G2组，但差异无统计学意义（P〉0．05）；与预实验组血脂结果相比，在给药治疗的第3周，G1组的Tc升高[（3．8±0．4）mmol／L1，而其他4组TC降低[G2组（2．8±1．8）mmol／L；G3组（2．9±0．7）mmol／L：G4组（1．4±0．9）mmol／L；G5组（2．1±0．2）mmol／L]，以使用卡培他滨联合辛伐他汀的G4组降低最为明显（P=0．004）；第5周Tc均出现下降趋势，但是G4和G5组Tc高于第3周；G1～G4组TG、Lpa和apoA在第3周均出现下降（分别为TG：P〈0．01和P〈0．05；Lpa：P〈0．05和P〈0．01；apoA：P〈0．05和P〈0．01）；Gl～G5组HDL和apoB第3周与第5周检测结果差异无统计学意义（均P〉0．05）。结论
- 何勇山金黑鹰章金春周阿成
- 关键词：结直肠肿瘤高脂血症卡培他滨辛伐他汀裸鼠
- 马齿苋醇提取物对结肠癌细胞及其干细胞体外增殖作用的机理研究被引量：15
- 2018年
- 目的探讨马齿苋醇提取物对结肠癌细胞及其干细胞体外增殖能力的影响及其作用机制。方法对结肠癌干细胞进行无血清培养,CCK-8法测定不同浓度马齿苋醇提取物对结肠癌HT-29细胞及HT-29干细胞的生长抑制情况,流式细胞仪检测其对HT-29细胞及其干细胞的凋亡情况及对细胞周期的影响。RT-PCR法以及Western blot分析马齿苋醇提取物对HT-29细胞及其干细胞Notch、Wnt双信号通路中Notch1、Notch2及β-catenin基因及蛋白表达的影响。结果马齿苋醇提取物对HT-29细胞及HT-29干细胞增殖有抑制作用,其作用时间、剂量与细胞增殖抑制率呈正相关,且对HT-29细胞增殖的抑制作用及凋亡率的影响较HT-29干细胞显著(P<0.05)。马齿苋醇提取物可下调HT-29细胞及其干细胞Notch1、β-catenin基因表达,并下调Notch1、Notch2及β-catenin蛋白表达(P<0.05)。结论马齿苋醇提取物可以通过下调Notch-1、Notch-2、β-catenin蛋白的表达发挥体外抑制结肠癌细胞及其干细胞增殖的作用。
- 熊祎虹邓超白文刘宇姚小芹金黑鹰
- 关键词：马齿苋结肠癌细胞结肠癌干细胞NOTCH信号通路WNT信号通路
- 下调AP-1基因表达在冬凌草甲素抑制结直肠癌中的作用被引量：3
- 2011年
- 目的探讨冬凌草甲素对结直肠癌的抑制作用及其机制。方法以冬凌草甲素水溶液处理LoVo和SW480结直肠癌细胞株，噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞增殖抑制率，以Illumina表达芯片检测LoVo细胞和SW480细胞基因表达的变化，对变异的基因进行定量逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）检测，建立结肠造口的结肠癌原位移植模型，以冬凌草甲素水溶液对动物模型进行腹腔注射，观察肿瘤的增殖并对上述发现的相关变化基因进行RT—PCR检测。结果冬凌草甲素在25mg／L剂量即对LoVo细胞和SW480细胞产生80％以上的抑制率，而且随药物剂量升高和时间延长，抑制率呈逐渐上升趋势；经冬凌草甲素处理后基因表达发现在LoVo结直肠癌中冬凌草甲素可以明显促进CKS2、SFN、SERTAD1、HERC5、RECQL4、GADD45AQ、bax、bxl-2等基因的表达，明显抑制了AP-1、NFkb和p38；而在SW480结直肠癌中冬凌草甲素可以促进ABCG1、ERCC1、HERC5、TERF2IP和TERF2IP等基因表达；与对照组比较，应用冬凌草甲素处理后的结肠癌结肠造口原位移植模型肿瘤生长速度明显低于对照组（P〈0．01），而SW480结直肠癌和LoVo结直肠癌在冬凌草甲素处理后肿瘤的生长速度差异无统计学意义（P〉0．05）。在肿瘤模型中仅仅发现AP-1基因表达下调，其余的基因均无上调或下调，在4周时定量RT-PCR检测发现，不仅AP-1基因下调，而且核因子（NF）-κB和p38明显下调。结论冬凌草甲素体外和体内研究都能明显抑制结直肠癌肿瘤的增殖，而且对2种肿瘤细胞株抑制率差异无统计学意义；在体外研究中发现冬凌草甲素可能抑制多种基因的信号转导途径，但是在在体研究中，只发现AP-1、NF-κB和P38下调，而且AP-1基因下调出现要早于其他2个基因，提示AP-1基因的下调可能是冬凌草甲素抑制结直肠癌的早期事件，AP-1抑制可能影响了NF-κB和MAKP途径基�
- 金黑鹰戴功建丁义江夏建国刘秀芳刘飞谈瑄忠耿建祥
- 关键词：冬凌草甲素结直肠癌AP-1
- 茶多酚对结直肠癌作用机理的研究进展被引量：8
- 2011年
- 茶多酚是一种从茶叶中提取的混合物,近年来的研究表明,茶多酚对体内的多种肿瘤都有一定的抑制作用。这对于结直肠癌的预防和治疗是一个新的方向。该文综述茶多酚对结直肠癌作用机理的一些研究进展。
- 王水明金黑鹰
- 关键词：茶多酚结直肠癌化学预防
- 结直肠肿瘤DNA甲基化标志的筛选及诊断价值被引量：3
- 2015年
- 目的筛选有潜在诊断价值的甲基化基因，探讨其在国人结直肠肿瘤中的甲基化特征，以期寻找有较高诊断价值的DNA甲基化筛查标志。方法收集2013年6—8月期间于南京中医药大学第三附属医院接受手术治疗的10例结直肠癌患者的肿瘤及其距离肿瘤10cm以上组织标本及接受内镜下切除的10例结直肠腺瘤患者的组织标本。分别采用BSP法和qMSP法检测上述标本中SNCA、MAL、INA、SPG20、FBN1、CNRIP1、TFP12和0sMR8个基因的甲基化特征，筛选出有潜在筛查价值的基因，并绘制接受者工作特征（ROC）曲线。结果BSP法检测的8个基因中，SNCA、SPG20和FBN1基因在癌和腺瘤组织中100％检测到甲基化，而在癌旁组织中均未检测到甲基化：其余5个基因在癌、癌旁和腺瘤中均有不同程度表达。qMSP法检测的10对癌与癌旁组织中的SNCA甲基化阳性例数分别为5例和1例，SPG20分别为8例和1例，FBN1分别7例和0例，差异均有统计学意义（分别P=0．070、P=0．003和P=0．007）。SNCA、SPG20和FBN1基因甲基化诊断结直肠癌的ROC曲线下面积（AUC）分别为0．890、0．730和0．880。结论SNCA、SPG20和FBN1对于结直肠肿瘤为具有潜在筛查价值的基因。
- 马炯杨青兰邓超金黑鹰龚伟王水明陈豪范怡梅
- 关键词：结直肠肿瘤基因甲基化肿瘤筛查
- 肿瘤干细胞调节基因Hes1在结直肠癌中的表达及其临床意义被引量：4
- 2011年
- 目的探讨肿瘤干细胞调节基因发状分裂相关增强子1（Hesl）在结直肠癌中的表达及其临床病理特征与肿瘤预后之间的关系。方法前瞻性收集2004年8月至2006年9月，在南京中医药大学第三附属医院全国肛肠医疗中心行手术治疗的结直肠癌患者，146例结直肠癌患者建立队列，男84例（57．5％）、女62例（42．5％），平均年龄（61±11）岁。对患者肿瘤标本建立组织芯片并采用免疫组织化学方法检测Hesl基因表达，对患者随访并对相关资料进行统计学处理。结果在146例结直肠癌标本中，Hesl阴性或弱阳性表达占8％（12／146），阳性（＋）为77％（112／146），而阳性（＋＋）为15％（22／146）；单因素分析结果显示Hesl基因表达与分化程度有关（P=0．033）。134例成功随访，随访率91．8％，平均随访时间（42±13）个月，以Kaplan—Meier生存曲线估计该组患者总1年生存率93％（136／146）、总3年生存率74％（108／146）、总5年生存率67％（98／146）。肿瘤的预后与TNM分期和病理学类型均相关（均P：0．000），与Hesl基因表达不相关（P=0．267）。结论肿瘤干细胞调节基因Hesl表达与分化程度有关，多因素分析显示Hesl与生存不相关。
- 金黑鹰徐俊华王小峰丁义江
- 关键词：结直肠肿瘤基因表达
- 表没食子儿茶素没食子酸酯对结肠癌HCT-8和HT29细胞株的作用及对Notchl与Notch2的基因表达的影响
- 2011年
- 表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）是茶多酚中含量最高、活性最强的单体，具有抗癌作用。本研究旨在观察EGCG对结肠癌细胞HCT-8和HT29细胞增殖的抑制作用及对Notch1与Notc2基因的影响，探讨其抑癌机制。
- 张春霞王水明金黑鹰
- 关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯NOTCH2HCT-8基因表达NOTCH1
