教育部“新世纪优秀人才支持计划”(1NCET11-1059)
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
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- 相关机构：四川农业大学中江县畜牧局更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”四川省科技支撑计划四川省青年科技基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 乙型脑炎病毒NS3蛋白对其体外复制能力的影响被引量：5
- 2013年
- 为研究乙型脑炎病毒(JEV)NS3蛋白对其体外增殖能力的影响,为JEV疫苗的大量生产提供一定的理论基础,构建真核重组质粒pCI-neo-NS3并转染至BHK-21细胞内,接种JEV后于不同时间点采集细胞内以及细胞外病毒,采用荧光定量RT-PCR法检测各时间点细胞内和细胞外病毒含量,同时设立不同质量浓度NS3原核表达蛋白对JEV复制影响对照组。用SPSS 21.0统计分析软件分析,比较病毒增殖情况。分析结果显示转染含NS3基因的真核载体组细胞内和上清中病毒含量都极显著高于对照组(P<0.01),加入NS3原核表达蛋白组上清中病毒含量极显著低于对照组(P<0.01)。
- 廖珊刘骁朱玲徐志文郭万柱
- 关键词：乙型脑炎病毒NS3蛋白荧光定量
- 猪巨细胞病毒gB优势抗原表位区的原核表达及其多克隆抗体的制备
- 2013年
- 为制备猪巨细胞病毒(PCMV)gB优势抗原表位区重组蛋白的多克隆抗体,进一步分析PCMV gB蛋白的生物学特性,建立PCMV抗体血清学检测方法。对PCMV gB基因优势抗原表位区进行了PCR扩增,将回收的目的片段连接入pET32a(+)表达载体,转化入E.coli Rosetta(DE3),构建了重组表达菌E.coli Rosetta-pET32a(+)-gB,经IPTG诱导表达了gB优势抗原表位区重组蛋白。对重组蛋白进行纯化后,通过Western-blot试验验证了重组蛋白的反应原性,并免疫家兔制备了多克隆抗体。结果表明,该重组蛋白大量可溶性表达,且具有良好的反应原性。琼脂扩散试验及Western-blot检测表明,多克隆抗体效价达到1∶8,且能与gB优势抗原表位区重组蛋白特异性结合。证实,成功制备了PCMV gB优势抗原表位区重组蛋白多克隆抗体。
- 江一帆刘骁廖珊朱玲周远成
- 关键词：多克隆抗体
