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牦牛乳酸脱氢酶-1两种遗传变异体的纯化及酶学特性比较被引量：6: 2009年; 【目的】从乳酸脱氢酶(LDH)水平上探索牦牛(Bos grunniens)低氧适应性分子机制。【方法】利用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析牦牛组织中LDH同工酶谱;用比色法测定牦牛、黄牛和水牛心脏、肝脏和肌肉组织中LDH总活力;采用染料亲和层析和DEAE-Sephadex离子交换层析从牦牛心肌组织中纯化LDH1(由4个H亚基组成)的2种遗传变异体,进行酶学性质的比较。【结果】电泳方法检测发现牦牛LDH1存在2种遗传变异体,根据电泳迁移率分别命名为快型和慢型(LDH1-F和LDH1-S)。获得纯化的牦牛LDH1-F和LDH1-S,比活力分别为21.4U·mg-1蛋白和17.8U·mg-1蛋白,在SDS-PAGE和PAGE上均显示1条区带。2种变异体以NADH为底物的米氏常数(Km)值差异不大,均显著高于普通牛的LDH1;以丙酮酸钠为底物的Km值LDH1-F小于LDH1-S。试验进一步比较了携带不同LDH1变异体的牦牛心脏、肝脏和肌肉组织中LDH总活力和各种同工酶谱,未见显著差异,而牦牛心脏、肝脏和肌肉组织中LDH总活力显著或极显著低于黄牛和水牛。【结论】牦牛LDH12种遗传变异体的Km值存在差异,且Km(NADH)高于普通牛;牦牛心脏、肝脏和肌肉组织中LDH总活力低于普通牛。; 郑玉才赵兴波周静朴影金素钰贺庆华洪键李宁吴常信; 关键词：牦牛乳酸脱氢酶

鸡血液生理生化指标的全自动检测及其与生产性能的相关分析: 血液生理生化指标不仅反应了动物血液氧的供给情况以及动物体的健康状况,与畜禽的生产性能间也可能存在一定的关系,可以作为群体生产性能的遗传标记加以利用。以肉鸡和蛋鸡两种不同生产类型的鸡群为研究对象,使用全自动激光血球分析仪时...; 曹梦范启鹏初蔚琳王琳琳刘华贵赵兴波; 关键词：血液生理生化指标; 文献传递

牦牛乳酸脱氢酶B基因突变体的克隆鉴定研究被引量：5: 2008年; 通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分析证实牦牛(Bos grunniens)乳酸脱氢酶存在两种类型,根据LDH同工酶谱的特点推测牦牛LDH多态是由B基因变异所致,并由此将凝胶电泳中迁移率快的LDH同工酶谱带称为LDH-Bf类型,迁移率慢的称为LDH-Bs类型.为阐明牦牛LDH变异体的分子机制,实验从牦牛心脏组织中提取总RNA,采用RT-PCR方法分别克隆了LDH-Bf和LDH-Bs两种类型的B基因cDNA全长序列;序列比对分析发现LDH-Bf和LDH-Bs基因存在4个碱基差异;依据cDNA序列推导的氨基酸序列的比对分析,发现两者之间存在两个氨基酸差异;利用Deepview分子建模软件进行的牦牛H亚基及LDH1突变体的高级结构预测,发现突变的两个氨基酸都能产生新的H键,影响整个蛋白分子的H键网络,并进一步导致蛋白分子空间结构的变化.; 郑玉才赵兴波周静朴影金素钰贺庆华洪键李宁吴常信; 关键词：乳酸脱氢酶基因克隆

牦牛乳上皮粘蛋白MUC1的遗传多态性研究被引量：2: 2006年; 采用凝胶电泳方法分离牦牛乳上皮粘蛋白MUC1,通过比较乳MUC1的多态性发现麦洼牦牛、九龙牦牛、天祝白牦牛、青海牦牛和西藏牦牛共5个牦牛群427头泌乳牦牛乳MUC1存在 9种MUC1类型,蛋白质分子质量范围为163～208 ku,普遍大于普通乳牛;群体遗传变异分析表明牦牛乳MUC1的基因频率、基因型频率存在品种间差异,基因杂合度较大,根据乳MUC1基因频率可将5个牦牛品种明显地聚为两类,提示牦牛乳MUC1存在地方类群的特异性．; 郑玉才赵兴波金素钰彭先文白文林李宁吴常信; 关键词：牦牛遗传多态性 MUC1

五个鸡群中催乳素基因密码子使用频率与产蛋量的关系分析被引量：15: 2007年; 通过鸡催乳素基因编码区基因扫描,发现3个SNP位点,分别是外显子2的C1607T、外显子5的C5749T和T5821C,3个SNP均没有改变氨基酸的编码.同时发现不同的单倍型间存在不同的密码子使用频率.对5个鸡群共370只鸡进行SSCP的基因型检测,共发现7种单倍型,结合44周龄产蛋量分析,发现不同单倍型的平均产蛋量存在显著性差异.结合密码子使用频率分析,发现使用高频密码子的单倍型个体产蛋量相对高.通过酶联免疫方法检测催乳素表达量,结果显示,使用高频密码子的个体,激素水平较高,其中使用2个高频密码子的单倍型个体和使用1.5个密码子的单倍型个体之间存在极显著差异.研究结果表明,密码子使用频率与产蛋量在一定的范围内呈现正相关趋势.; 刘华贵王小花刘玉方赵兴波李宁吴常信; 关键词：催乳素基因密码子使用频率酶联免疫检测产蛋量

密码子使用频率影响产蛋性状:鸡催乳素基因三个SNP位点的研究: 通过对鸡催乳素基因编码区DNA序列分析,发现3个SNP。在五个鸡群中进行SSCP共发现7种单倍型,不同的单倍型有不同的密码子使用频率。结合44周龄产蛋量性状,发现不同单倍型的平均产蛋量存在显著差异。结合密码子使月频率分析...; 王小花刘华贵刘玉方赵兴波李宁吴常信; 关键词：PRL基因密码子使用频率; 文献传递

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教育部“新世纪优秀人才支持计划”(NCET-04-0135)