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猪细小病毒感染PK-15细胞抗病毒相关因子转录变化的分析被引量：11: 2011年; 为了解猪细小病毒(PPV)感染后引起干扰素及其相关细胞因子的反应,探讨宿主—病毒之间的作用关系,作者运用荧光定量PCR技术,测定和分析PPV感染PK-15细胞引起的病毒DNA量的变化和细胞因子IFN-β、IFN-γ、IFNAR-1、IFNAR-2、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ、MX1、iNOS、2-5AS、RNase L和IRF-3的转录水平。结果显示,PPV感染PK-15细胞12h病毒开始大量迅速增殖,48h达到最高峰;PPV感染后可引起PK-15细胞中IFN-β、IFN-γ、IFNAR-1、IFNAR-2、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ、Mx1、iNOS、2-5AS、RNase L和IRF-3的转录量显著增加,其中Mx1基因在24h转录量达到8 423倍。猪细小病毒感染可引起PK-15细胞抗病毒相关因子转录增加。; 李厚伟魏战勇尹海燕陈红英李金磊韩志涛崔保安; 关键词：猪细小病毒细胞因子 PK-15细胞转录时相

实时荧光定量PCR检测伪狂犬病病毒方法的建立与初步应用被引量：9: 2009年; 根据GenBank中猪伪狂犬病病毒(PRV)gE基因的序列(EF552427),利用Premier express设计并合成1对引物和相应的TaqMan探针,从猪伪狂犬病病毒(PRV)感染的细胞中提取DNA,进行PCR扩增。将鉴定正确的gE基因片段克隆入pGEM-T Easy载体中,转化大肠杆菌JM109,经PCR及测序鉴定后得到阳性重组质粒。以该阳性重组质粒为荧光定量PCR标准品模板建立标准曲线。对探针浓度、引物浓度、镁离子浓度和退火温度进行优化,建立了最佳的荧光定量PCR反应体系和扩增程序。经临床应用表明,该荧光定量PCR方法的建立为猪伪狂犬病病毒的早期诊断并定量分析猪伪狂犬病病毒感染程度奠定了基础。; 赵丽崔保安陈红英魏战勇郑兰兰吕晓丽文英会; 关键词：伪狂犬病病毒荧光定量PCR

猪伪狂犬病病毒及猪细小病毒复合PCR检测方法的建立被引量：3: 2009年; 根据Genbank上已发表的猪伪狂犬病毒(PRV)的gH基因和猪细小病毒(PPV)的VP2基因的保守序列,设计合成了2对特异引物,分别建立了PRV和PPV的单项PCR诊断方法,通过优化PCR条件最终成功地建立了PRV和PPV的复合PCR诊断方法。敏感性检测结果表明,对PRV的检测可以达到10-10.5/100μL TCID50、对PPV的检测可以达到10-9.5/100μL TCID50。对20头份病、死猪的血清、淋巴结、肺、肝等组织进行检测,结果5头份PRV阳性,3头份PPV阳性,其中3头份PRV和PPV同时为阳性,其余猪为阴性,健康猪对照样品全部阴性。结果表明,PRV和PPV复合PCR诊断方法具有高度特异性和敏感性,可用于兽医临床诊断。; 赵丽崔保安文英会陈红英; 关键词：猪伪狂犬病病毒猪细小病毒复合PCR

猪圆环病毒2型SYBR-Green 1实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：5: 2009年; 【目的】建立一种能够快速、灵敏地检测猪圆环病毒2型(PCV2)的SYBR-Green 1实时荧光定量PCR方法。【方法】根据已报道的PCV2ORF2基因组序列,设计并合成1对引物。通过常规PCR扩增PCV2ORF2基因,将鉴定正确的ORF2基因片段克隆入pTG19-T载体中,转化大肠杆菌JM109,经PCR及测序鉴定后得到阳性重组质粒,作为标准品模板建立SYBR-Green 1荧光定量PCR标准曲线和溶解曲线,并做灵敏性、特异性和重复性试验。【结果】PCV2荧光定量PCR标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,溶解曲线特异,相关系数为0.9988,最低检测的拷贝数为1拷贝/25μL,特异性和重复性较好。【结论】建立了检测PCV2的SYBR-Green 1荧光定量PCR方法,为该病的早期诊断及定量分析PCV2感染程度奠定了基础。; 贾艳艳李明凤王东方崔保安陈红英魏战勇吕晓丽郭显坡; 关键词：SYBR 实时定量PCR PCR检测方法

猪细小病毒感染后对PK-15细胞抗病毒相关因子转录时相影响的研究: (目的)为了更好的了解猪细小病毒(PPV)感染后引起干扰素及其相关细胞因子的反应,探讨宿主-病毒之间的作用关系。(方法)运用荧光定量PCR技术,测定和分析PPV感染PK-15细胞引起的病毒DNA量的变化和细胞因子IFN-...; 韩志涛魏战勇陈红英李厚伟李金磊耿静微崔保安; 关键词：猪细小病毒细胞因子 PK-15细胞转录时相; 文献传递

实时定量PCR对猪细小病毒自然感染猪体内病毒分布情况的探讨: 【目的】探讨猪自然感染猪细小病毒(Porcine Parvovirus,PPV)后病毒在体内的分布情况,分析病毒对猪器官组织的嗜性,揭示猪细小病毒致病机制。【方法】利用已建立的猪细小病毒SYBRGreenⅠ实时定量PCR...; 李金磊魏战勇韩志涛耿静微陈红英崔保安; 关键词：猪细小病毒猪圆环病毒2型实时定量PCR; 文献传递

中药金银花提取物抗炎作用研究被引量：50: 2008年; 为研究金银花提取物对大鼠急性炎症的抗炎作用,了解金银花的抗炎免疫作用,本试验采用鸡蛋清致大白鼠足跖肿胀急性炎症模型,分别采用腹腔注射法和外敷法观察金银花提取物对炎症反应的抑制作用。腹腔注射法以5%地塞米松作为阳性对照;外敷法以皮炎平为阳性对照;均以生理盐水作为阴性对照。结果表明,金银花提取物对蛋清引起的局部急性炎症有明显的抑制作用。为金银花的开发和临床应用提供了试验依据。; 王林青崔保安张红英高文明李双亮; 关键词：金银花抗炎作用动物模型

4株猪圆环病毒2型河南株全基因组的克隆与序列分析: 将从郑州、南阳、武陟、临颍等地采集疑似PCV2感染的病料研磨、过滤除菌后,接种无PCV1和PCV2污染的PK-15细胞,盲传6代后,分离出4株PCV2(NY、LY、ZZ、WZ)。根据已发表的猪圆环病毒2型基因序列设计1对...; 王亚丹崔保安陈红英王淑娟刘金朋朱前磊王子馨; 关键词：猪圆环病毒2型全基因序列克隆; 文献传递

板蓝根多糖对猪繁殖与呼吸综合征疫苗免疫猪T细胞亚群的影响被引量：30: 2007年; 目的:研究板蓝根多糖对猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗免疫猪T细胞亚群及抗体的影响。方法:以板蓝根多糖作为免疫增强剂联合猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗免疫仔猪,通过流式细胞仪检测猪外周血CD3+、CD4+、CD8+细胞百分数,并用ELISA法检测猪血清中抗猪繁殖障碍与呼吸道综合征病毒抗体水平。结果:板蓝根多糖能显著提高仔猪的CD3+、CD8+淋巴细胞的百分数和特异性抗体滴度。结论:板蓝根多糖能显著增强猪对常规灭活病毒疫苗的免疫应答能力。; 张红英赵现敏崔保安夏平安邱妍胡梅王远阁; 关键词：板蓝根多糖免疫增强剂仔猪猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗 T细胞亚群

利用Real-time PCR技术检测猪细小病毒在PK-15细胞增殖动态研究被引量：7: 2009年; 将猪细小病毒HN1株接种于PK-15细胞，用TaqMan荧光定量PCR方法研究了猪细小病毒增殖的基本特征与规律．结果表明，在PK-15细胞中，病毒在接种后2h开始增殖，在12～60h增殖最为迅速，在60h病毒达到增殖最高峰．研究还发现在6h病毒开始释放，72h达到最高峰．; 魏战勇王学兵陈红英王亚宾李厚伟刘三阳崔保安; 关键词：荧光定量PCR 猪细小病毒增殖规律

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