中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(ZGKJ201106)
- 作品数:2 被引量:3H指数:1
- 相关作者:丛锋张锋李志杰张艳萍许娜娜更多>>
- 相关机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金:中央级公益性科研院所基本科研业务费专项公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 流行性乙型脑炎prM蛋白剪切位点突变的prM-E蛋白表达细胞系的建立被引量:1
- 2013年
- 为建立稳定共表达乙型脑炎病毒(JEV)完整M前体蛋白(prM)和E蛋白的BHK-21细胞系,本研究在prM蛋白furin蛋白酶剪切位点编码基因中引入突变,将突变后的prM基因克隆于质粒中构建重组表达质粒pCAG-JEV-prM(R89A)E。将重组质粒转染BHK-21细胞,转染48 h后细胞用含G418的选择性培养基选择培养,进一步经细胞克隆纯化制备表达剪切位点突变的JEV prM-E蛋白的稳定细胞系。经IFA和western blot鉴定表明,该细胞系能表达JEV prM与E蛋白,所表达的prM蛋白未发生剪切;细胞经多次传代后仍能够稳定地共表达prM与E蛋白。该细胞系的建立为研究prM蛋白剪切对JEV粒子形成的影响以及亚单位疫苗的制备奠定了基础。
- 李业南陈振师步志高华荣虹
- 关键词:流行性乙型脑炎病毒细胞系
- 马立克氏病病毒感染鸡羽髓上皮细胞差异蛋白质组学研究被引量:2
- 2011年
- 为鉴定鸡羽髓上皮细胞感染马立克氏病病毒(MDV)前后差异表达的蛋白,本研究以MDV强毒GA株人工感染SPF鸡,并通过双向电泳技术进行分析。结果显示:在病毒感染后4 d、7 d、14 d和21 d显著差异表达的蛋白点分别有2个、8个、25个和9个;而通过质谱技术鉴定出29种蛋白质,其中包括能量代谢相关蛋白、增殖和凋亡相关蛋白、细胞骨架蛋白、信号传导蛋白、转录相关蛋白、免疫相关蛋白和其他功能蛋白质。本实验首次对鸡羽髓上皮细胞感染MDV后各时期蛋白表达水平的变化进行研究,鉴定了多种差异表达蛋白质,为进一步揭示MDV与宿主的相互关系、感染性病毒粒子的成熟和致病机制提供了依据。
- 丛锋刘长军张艳萍李志杰张锋成云杨文闯许娜娜
- 关键词:马立克氏病病毒双向电泳蛋白质组学