浙江省科技厅重点资助项目(2001136)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
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- 相关机构：浙江省疾病预防控制中心更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 登革2型病毒浙江分离株的鉴定与分子流行病学研究被引量：1
- 2006年
- 目的为了对2004年浙江省报告的输入性疑似登革热病例查明病因,从分子水平分析流行毒株的生物学特征,追踪传染源,为疾病的预防控制提供实验室依据。方法对疑似患者血清标本采用ELISA、IFA和荧光RT-PCR方法分别检测登革病毒IgMI、gG抗体和病毒核酸,并用C6/36和BHK-21细胞分离登革病毒。采用RT-PCR方法扩增病毒E基因和NS1基因后分别进行序列测定,并与不同国家和地区的登革热毒株进行同源性和进化树分析。结果从患者血清中检测到登革病毒IgM、IgG抗体和登革2型病毒核酸,并分离到登革2型病毒;浙江省登革2型病毒分离株(ZJ/01/04)与登革2型国际标准株Jamaica、国内Fujian/10/99株和Saudi/92株在E基因上氨基酸的同源性分别为97.1%、99.2%和99.6%,而与登革1、3、4型毒株相同区域氨基酸同源性分别为68.7%、66.9%和63.6%。基因进化树显示ZJ/01/04分离株与Saudi/92株亲缘关系最近,在进化树的同一分支上。结论从病原学、血清学和分子生物学特征上均证实该输入病例是由登革2型病毒引起,该毒株最有可能来源于沙特阿拉伯。
- 夏时畅严菊英卢亦愚翁景清茅海燕徐昌平
- 关键词：输入病例登革2型病毒E基因NS1基因
- TaqMan荧光定量RT-PCR快速检测登革1、2型病毒被引量：3
- 2006年
- 目的建立特异、灵敏、快速的荧光定量RT-PCR方法用于检测登革1、2型病毒核酸,并初步应用于登革热的临床标本检测。方法根据GenBank登录的登革热毒株序列,应用生物学软件进行序列比对,分别在登革病毒1型的NS5基因和2型的C基因的保守区设计特异性引物和TaqMan探针。对荧光定量RT-PCR反应条件进行优化,验证该方法的特异性、灵敏度和稳定性。同时对疑似登革热病例血清标本进行检测。结果该方法对登革1、2型病毒的检测有高度的特异性,与登革病毒的4个血清型之间以及流行性乙型脑炎病毒、肾综合征出血热病毒等均无交叉反应,检测的灵敏度均达0.1TCID50,可从疑似登革热病例血清标本中直接检测登革病毒核酸,从病毒核酸提取至完成检测仅需3h左右。结论本研究建立的TaqMan荧光定量RT-PCR是一种快速检测登革1、2型病毒特异、敏感的方法,适用于临床早期诊断。
- 徐昌平卢亦愚严菊英冯燕茅海燕史雯翁景清
- 关键词：TAQMAN探针登革病毒
