国家自然科学基金(81202794) 作品数:11 被引量:87 H指数:6 相关作者: 王国佐 葛金文 周瑜 成绍武 廖君 更多>> 相关机构: 湖南中医药大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 湖南省教育厅科研基金 湖南省研究生科研创新项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 更多>>
iTRAQ技术在医药领域的研究进展 被引量:4 2017年 蛋白质组学的研究是生命科学进入后基因时代的特征,是探索生命奥秘的有效手段,相关的实验技术已被广泛应用于各个领域。传统的蛋白组学技术包括凝胶电泳、质谱分析、蛋白质芯片等,但由于这些技术存在灵敏度低、操作繁琐、可重复性差等缺点已无法适应当今蛋白质研究的需要;这就促使了蛋白组学技术的改进和革新。同位素标记的相对和绝对定量(iTRAQ)技术是目前进行蛋白定性定量常用的、发展较快的新技术,该技术灵敏度高、准确率和可重复性好,能够同时检测多个样本,并且对样本进行精准高效的分析。文章梳理了iTRAQ技术的优缺点,对该技术近几年在医药基础和临床研究应用的情况进行整理和分析,探讨该技术在医药领域的应用前景。 王国佐 龚盛强 杨梅 兰斌 葛金文关键词:ITRAQ 蛋白质 医药 生物标志物 基于网络药理学方法对脑泰方干预脑梗死的作用机制研究 被引量:5 2018年 目的筛选脑泰方主要有效成分,预测其活性成分干预脑梗死的靶点及通路,对比脑梗死有效靶点及涉及的通路,探究脑泰方干预脑梗死的作用机制。方法采用检索中药系统药理学技术平台(traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform,TCMSP)、台湾中医药资料数据库以及文献资料筛选出脑泰方的主要有效成分,利用其活性成分基于Pubchem数据库和Swiss Target Prediction数据库预测脑泰方有效成分的作用靶点,利用TTD数据库检索出脑梗死涉及的靶点,通过生物学信息注释数据库(DAVID)预测分析相应靶点涉及的通路;然后对比不同途径获得的靶点及通路。结果脑泰方中有40个活性成分,预测得到靶点254个,预测到相关信号通路46条;疾病涉及的靶点26个,相关信号通路6条;其中药物活性成分预测的通路与疾病涉及的通路重合的有5条。结论通过数据对比分析可知,脑泰方干预脑梗死可能是通过调节补体和凝血级联通路、钙离子信号通路、肌动蛋白细胞骨架通路等多途径发挥作用,为进一步阐明脑泰方干预脑梗死具体的作用机制提供了重要参考。 王国佐 龚盛强 兰斌 成绍武 易亚乔 廖君 刘林 葛金文关键词:脑泰方 脑梗死 网络药理学 益气活血方治疗缺血性脑卒中的Meta分析 被引量:10 2015年 目的:系统评价益气活血方治疗缺血性脑卒中的疗效及安全性。方法:计算机检索国内外相关数据库,查找益气活血方药治疗缺血性脑卒中的随机对照试验相关文献,采用Rev Man 5.0软件进行Meta分析。结果:共纳入合格文献27篇,共2 908例患者,其中治疗组1 490例,对照组1 418例。Meta分析结果:益气活血方药或其联合西药常规治疗缺血性脑卒中临床疗效方面与单纯应用西药治疗比较,其差异均有统计学意义[OR=5.39,95%CI(4.03,7.22),P<0.000 01];益气活血方联合西药常规治疗缺血性脑卒中神经功能缺损方面与单独应用西药常规治疗比较,其差异也均有统计学意义[WMD=-2.99,95%CI(-3.26,-2.72),P<0.000 01];此外,益气活血方联合西药常规治疗缺血性脑卒中在改善日常生活能力方面亦优于单独应用西药常规治疗[WMD=9.65,95%CI(8.36,10.93),P<0.000 01]。其中2篇研究的不良反应表现轻微。结论:现有的相关数据表明,益气活血方或益气活血方联合西药常规治疗缺血性脑卒中较单纯西医治疗临床疗效更好,且能明显改善神经功能损伤,提高日常生活能力。由于本Meta分析纳入研究较少,证据强度有限,上述结论仍需更多高质量研究加以验证。 周瑜 方锐 王国佐 葛金文关键词:益气活血方 缺血性脑卒中 随机对照试验 META分析 大脑中动脉阻断模型大鼠血浆差异蛋白筛选及其生物信息学分析 被引量:1 2019年 目的应用蛋白质组学技术探索脑梗死大鼠血浆中的特异蛋白质,找出脑梗死的某些标志性蛋白,为明确脑梗死的发生机制研究提供依据。方法建立大鼠大脑中动脉阻断(MCAO)模型,将假手术组、脑梗死组大鼠的血浆采用2-DE技术结合质谱技术进行蛋白质的比较分析,筛选出差异明显的蛋白,运用生物信息学技术对特异性蛋白质进行功能分析。结果脑梗死组血浆与假手术组血浆的胶图扫描结果显示:有6个显著差异蛋白点,其中脑梗死组血浆中的1个蛋白质(肽)在假手术组血浆中不存在,有1个蛋白质(肽)只在假手术组血浆中有;另外有1个蛋白质(肽)在脑梗死组血浆中比在假手术组血浆中明显减少,有3个蛋白质(肽)明显增加。结论二维电泳是经典筛选差异蛋白的技术手段,通过电泳结合质谱分析,以及生物信息学分析脑梗死的相关特异性蛋白,有可能更好地阐明脑梗死发生的机制,发现潜在的治疗靶点。 王国佐 龚盛强 兰斌 成绍武 廖君 葛金文关键词:脑梗死 生物信息学分析 发病机制 铁死亡的机制及其在相关疾病中的意义 被引量:18 2018年 铁死亡是近年发现的一种铁依赖性脂质过氧化和活性氧(ROS)诱导的调节性细胞死亡,在细胞形态特征和生化指标等方面与细胞凋亡、自噬和程序性坏死等死亡方式存在较大差别,并显著涉及肿瘤、神经系统和缺血再灌注损伤等多种临床疾病。深入认识铁死亡可为相关疾病的防治提供新的思路。 兰斌 龚盛强 成绍武 贺超 廖君 葛金文 王国佐关键词:铁代谢 脂质过氧化 活性氧 脑血管疾病与阿尔茨海默病的联系及其机制 被引量:6 2016年 脑血管疾病和阿尔茨海默病(AD)之间存在很大程度的交叉重叠(如共同的危险因素和某些相同的病理变化),提示它们可能在影响认知功能下降方面具有相加或协同作用。脑老化和AD最常见的血管病变是脑淀粉样血管病变和小血管病变,高达84%的老年AD患者显示不同程度的脑血管疾病的病理改变。虽然目前不能确定脑血管病变是影响AD的发生还是发展,但是它确实在AD的神经元功能紊乱中起重要作用。进一步阐明脑血管疾病和AD影响认知功能下降的机制对于全面理解AD神经退变的发生和发展有着重要的意义,将为AD的预防和治疗提供新的思路。 王国佐 龚盛强 尹芳 王珊珊 易压乔 成绍武关键词:阿尔茨海默病 脑血管疾病 脑淀粉样血管病 脑泰方血清和血浆蛋白质(肽)组学比较研究 被引量:4 2013年 目的:通过对脑泰方含药血清和含药血浆蛋白质(肽)组学的比较研究,发现脑泰方含药血清和含药血浆中的差异蛋白(肽);以质谱分析技术确定差异蛋白的特征。从而为探索脑泰方的药效物质基础和发展中药血浆药理学方法提供科学依据。方法:取健康成年SD大鼠20只,按体重随机分为空白组、脑泰方给药组,每组10只,连续灌胃给药7天。手术前12 h禁食不禁水,末次给药后1 h,用10%水合氯醛腹腔麻醉,经颈总动脉插管取血。每只大鼠采血后分别制备血清和血浆。每组随机抽取5只大鼠的血清及血浆,采用2-DE技术进行蛋白质(肽)组学比较研究,运用300DPI扫描、PDQuest 7.3.0软件进行分析;采用ESI-MS/MS对重要差异蛋白质点进行鉴定,筛选脑泰方血清和血浆差异蛋白的特征。结果:共获得20张胶图,各胶图分别得到664个蛋白位点。其中与空白血浆组比较,脑泰方血浆样品中共识别到20个差异蛋白点,其中15个差异点表达上调,5个差异点表达下调;与空白血清组比较,脑泰方血清样品中共识别到19个差异蛋白点,其中15个差异点表达上调,4个差异点表达下调;与脑泰方血浆组比较,脑泰方血清样品中共识别到24个差异蛋白点,其中9个差异点表达上调,15个差异点表达下调。选取在脑泰方血浆组和脑泰方血清组中高表达的10个差异蛋白质点进行基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS),成功鉴定了6个蛋白,分别是:inter-alpha trypsin inhibitor,heavy chain 3、Group specific component、complement factor B、Receptor Complexed With A Heterodimeric Fc、complement factor B,isoform CRA-d、Transferrin。结论:脑泰方含药血浆、血清中明显变化的蛋白质可能与其抗凝血促纤溶作用机制相关,这些蛋白参与血管新生、炎症调控等病理生理过程,对研究脑泰方作用的可能有效靶点及其信号转导通路意义重大。 王国佐 朱惠斌 杨梅 周瑜 钱荣华 易亚乔 袁紫薇 葛金文关键词:脑泰方 血浆 血清 二维电泳 蛋白质组学 质谱 活血化瘀方药对血瘀证模型的作用机制的研究进展 被引量:24 2015年 对近年血瘀证模型实验、药理研究进行总结,分析了活血化瘀方药对血瘀病证模型在血流动力学、血液流变学、微循环、血小板功能、血管内皮功能乃至分子生物学的方面的作用机理的研究进展。 周瑜 方锐 王国佐 葛金文关键词:活血化瘀 血瘀证 NTE Treatment Results in Increased Fpn Expression in Hippocampus of Rats Subjected to Cerebral Ischemia Objective: To observe the expression ofFerroportin (Fpn) at different time points in rats after focal cerebral... Jun Liao Xing Xia Guo-zuo Wang Yong-mei Shi Jin-wen Ge关键词:FERROPORTIN NAOTAIFANG ISCHEMIA 脑泰方干预的MCAO模型大鼠血浆差异蛋白筛选及其生物信息学分析 被引量:1 2018年 目的:应用蛋白质组学技术探索脑泰方干预脑梗死大鼠血浆中的特异蛋白,筛选出药物作用的关键蛋白,为明确中药治疗脑梗死的作用靶点和作用机制研究提供依据。方法:建立MCAO大鼠模型,将脑梗死+脑泰方组、脑梗死组大鼠的血浆采用2-DE技术结合质谱分析进行蛋白质的比较分析,筛选出差异蛋白,运用生物信息学技术对差异蛋白质进行功能分析。结果:(1)对"脑梗死组"血浆与"脑梗死+脑泰方组"血浆的胶图扫描结果进行比较显示:有21个显著差异蛋白点;其中"脑梗死组"血浆中的5个蛋白质(肽)在"脑梗死+脑泰方组"血浆中不存在;另外有13个蛋白质(肽)在"脑梗死+脑泰方组"血浆中比在"脑梗死组"血浆中明显减少,有3个蛋白质(肽)在"脑梗死+脑泰方组"血浆中比在"脑梗死组"血浆中明显增加。结论:通过分析发现脑泰方干预脑梗死的相关特异性蛋白,发现脑泰方可能是通过改善脑血液流变学、血管内皮细胞损伤等途径起作用,阐明中药对于脑梗死可能的治疗靶点和作用机制。 王国佐 龚盛强 兰斌 杨梅 贺超 葛金文关键词:脑梗死 脑泰方 生物信息学分析