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siMDR1基因转染人类BT325胶质瘤细胞系的表达被引量：1: 2007年; 目的探讨siMDRl基因转染人类胶质母细胞瘤细胞BT325后细胞的表达能力。方法设计并合成siRNA质粒，取培养对数期生长良好的胶质母细胞系BT325，传代培养。将阳离子脂质体（Lipofectamine 2000）和质粒MDR1DNA按比例共转染。瞬时对转染成功的细胞系应用抗性药物-嘌呤霉素进行筛选，筛出稳定的细胞系后，分别在荧光显微镜下分析转染情况。通过免疫细胞化学染色及图像分析对瞬时转染和稳定转染的BT325细胞进行检测，确定MDR1基因产物P-糖蛋白（P-gP）表达水平。阿霉素对瞬时转染及稳定转染的BT325耐药性进行分析。结果成功构建了逆转录病毒siRNA质粒载体，经过瞬时转染BT325细胞生长状态良好，48h表达绿色荧光最强。加入嘌呤霉素筛选后，在第8天出现单细胞克隆。免疫细胞化学染色证实瞬时转染与稳定转染BT325细胞P-gP的表达下降。细胞的转染效率为70％～80％。BT325细胞经过RNA干扰，细胞对MDR1耐药性明显下降，IC50降低，细胞的耐药因子（RF）有所升高。结论 siMDR1基因瞬时转染和稳定转染都可以抑制P-gP蛋白的表达，其可以作为基因治疗的重要手段。; 赵岩赵澎郑永日张亚卓; 关键词：神经胶质瘤 RNA干扰基因疗法

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