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大白菜SRAP反应体系的建立与优化被引量：29: 2007年; 以大白菜基因组DNA为模板,通过正交试验设计,从Mg2+、Taq酶、dNTPs、引物、模板5种因素4个水平对大白菜SRAP(Sequence-related amplified polymorphism,序列相关扩增多态性)反应体系进行优化,建立了适合于大白菜的SRAP-PCR优化反应体系,该体系为25μL:Mg2+浓度为3.0 mmol/L,dNTPs为0.2mmol/L,Taq酶1.5 U,引物为0.2μmol/L,模板DNA73.2 ng。PCR反应程序为:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,35℃复性1 min,72℃延伸1 min,5个循环;94℃变性1 min,50℃复性1 min,72℃延伸1 min,35个循环,72℃延伸10 min。; 杨琦张鲁刚; 关键词：大白菜 SRAP 正交试验

大白菜线粒体DNA有效、快速提取方法被引量：11: 2006年; 目的：建立一种有效，快捷的大白菜线粒体DNA（mtDNA）提取方法。方法：采用差速离心和蔗糖衬垫相结合的方法先从大白菜胞质雄性不育系及保持系叶片中分离出线粒体，然后用SDS-蛋白酶K裂角法提取mtDNA。结果：琼脂糖凝胶电泳表明，采用该方法提取的mtDNA片段大小的30-40kb之间，电泳条带清晰，无明显降解发生；以提取的mtDNA为模板进行RAPD反应，不育系和保持系均扩增出较多的条带，而且呈现出丰富的多态性，大小分布在500bp-3000bp之间，且条带清晰，没有脱尾现象。结论：该方法提取mtDNA，省时、省钱，对实验设备要求较低，而且分离出的mtDNA质量较高，能满足后续分子生物研究工作需要。; 张战凤张鲁刚王绮张明科惠麦侠; 关键词：大白菜线粒体

大白菜胞质雄性不育系育性相关线粒体DNA片断的克隆及*序列分析被引量：11: 2006年; 利用PCR技术从大白菜(Brassica campestrisL.ssp.Penkinsis)新型胞质雄性不育材料CMS7311的线粒体基因组中扩增出与细胞质雄性不育相关的片断,并克隆测序。序列分析表明,该片断和报道的Poli-ma-orf224序列完全相同,没有发生变异,说明CMS7311的不育机理与PolimaCMS相似,也反映了细胞质雄性不育变异的保守性。; 张战凤张鲁刚王绮惠麦侠张明科; 关键词：大白菜

与大白菜温度敏感胞质雄性不育系育性转化相关的同工酶分析初报被引量：5: 2005年; 以经过低温处理发生育性转化的大白菜胞质不育系(AT系)、未经处理的不育系(A系)及对应的保持系(B系)6叶苗龄期的根,叶和花期的大、中、小花蕾为试材,采用薄层垂直板聚丙烯酰胺凝胶不连续电泳的方法,分析了POD、ATP、AMY、EST同工酶。结果表明:POD、ATP、AMY同工酶与大白菜不育性没有显著关系;苗期A系与B系酯酶同工酶也无差异,小花蕾差异很大,B系酶活性明显强于A系,且B系比A系多5条α-EST带,其迁移率分别为0.62、0.68、0.72、0.75、0.83等,B系比A系多4条β-EST带,其迁移率分别为0.68、0.72、0.75、0.83。A系经低温处理(9℃下处理18d)发生育性转化后,迁移率为0.83的α-EST带消失,可能与不育性转化有关。结合试验结果还对细胞质雄性不育产生的机理进行了探讨。; 张少丽张鲁刚吉雪花张剑; 关键词：胞质雄性不育系大白菜同工酶分析温度敏感 EST同工酶胞质不育系

白菜类作物雄性不育研究新进展: 回顾了白菜类作物雄性不育研究利用的历史,系统分析了近年来自菜类作物细胞质雄性不育机理研究以及原生质体融合技术和现代生物技术在雄性不育研究上的应用方面取得的新成果和新进展。; 张鲁刚; 关键词：白菜雄性不育不育机理原生质体; 文献传递

利用RNA指纹技术分析大白菜胞质雄性不育相关基因的差异表达被引量：4: 2006年; 采用改进的RNA指纹技术(RAP-PCR)对两套大白菜胞质雄性不育材料及其杂种F1花蕾的总RNA进行了分析,通过对186条随机引物的筛选,获得4个重复性较好的差异片段S47-412,S93-622,S176-343,S199-904,并对其克隆、测序。根据各差异条带的测序结果合成长引物进行验证,S47,S93所对应的差异消失,而S176,S199长引物验证的结果与RAP-PCR相似,序列分析表明:S176-343,S199-904两差异片段均和油菜Polima不育胞质线粒体基因组orf224/atp6位点有着极高的同源性,两差异片段序列部分重叠,这说明两差异片段可能和大白菜胞质雄性不育有很高的相关性。; 张战凤张鲁刚王绮惠麦侠张明科; 关键词：大白菜

温度敏感大白菜胞质雄性不育系微量花粉活力研究被引量：13: 2003年; 以大白菜[Brassica campestris L.sap.pekinensis(Lour.)Olsson]的欧洲油菜(Brassica napusL.)胞质雄性不育系CMS3411-7和CMS7311为试材,通过人工低温诱导产生微量花粉,研究了不同育性级别花药中的相对正常花粉率以及1-2级花药中花粉的相对生活力和杂交竞争力。结果表明:诱导产生的1、2、3级花药中的花粉量分别相当于正常花药的73.5％-84.4％、47.6％-51.5％(半不育)和28.4％-32.5％,4级花药中均无花粉;1、2级花药中的花粉具有授粉能力,自交单荚结籽3.9粒,相当于低自交不亲和;在提前4 h授粉的情况下,1、2级花药中花粉的杂交竞争力仅是紫菜薹(Brassica campestris L.ssp.chinensis L.var.purpurea Bailey)正常花粉的9.1％-16.6％,即正常花粉的1/6-1/10。最后提出了利用温度敏感胞质雄性不育制杂交种时应注意的问题,讨论了利用人工诱导微量花粉进行不育系自身保持的可行性。; 张鲁刚惠麦侠张明科; 关键词：温度敏感大白菜胞质雄性不育系花粉活力

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国家自然科学基金(30270913)