国家杰出青年科学基金(30425019)
- 作品数：5 被引量：15H指数：3
- 相关作者：韩泽广郑大利章莉滕小梅张敏更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院华东理工大学更多>>
- 发文基金：国家杰出青年科学基金国家高技术研究发展计划上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- HBx基因转染对Huh7细胞中基因转录的影响被引量：5
- 2008年
- 目的:研究HBx基因对肝癌细胞Huh7中基因表达的影响,为探讨HBx在肝癌发生发展中的分子机制提供依据。方法:以pcDNA3.1b质粒为载体,将HBx转入Huh7细胞中,同时将pcDNA3.1b作空白对照。用Western印迹法证实基因转染成功。应用Affymetrix公司的人类全基因组寡核苷酸基因芯片分析转染HBx基因前后,Huh7细胞的基因表达谱。随机选择转染前后有明显差异的6个基因(3个上调,3个下调),用荧光定量PCR技术进行验证。结果:从基因芯片结果分析中发现,与对照组相比,HBx转染后Huh7细胞中明显上调的基因有88个,下调的基因有111个,这些差异基因的功能涉及多个方面。结论:HBx基因对肝癌细胞的影响是双向的,既有转录激活的作用,同时又有转录抑制的功能。这些数据对于理解HBx基因在肝癌发生发展中的作用具有重要的参考意义。
- 章莉郑大利黄健韩泽广
- 关键词：寡核苷酸序列分析HBX基因
- 肝癌相关基因DLK1转基因小鼠的构建与鉴定
- 2008年
- 目的构建并鉴定肝脏特异性表达的DLK1转基因小鼠。方法通过基因重组方法，将小鼠DLK1 cDNA片段置于小鼠白蛋白基因增强子和启动子序列下游，构建肝脏特异性表达的DLK1重组质粒，酶切重组质粒得到转基因片段，转基因在体外进行表达鉴定后，显微注射获得DLK1转基因首建小鼠，对首建小鼠进行传代，利用F1代小鼠进行DLK1转基因表达的鉴定。结果逆转录（RT）-PCR和细胞免疫荧光显示，转基因DLK1片段可在小鼠肝癌细胞系Hep1-6中表达。RT-PCR和免疫组化结果显示，DLK1在F1代成年转基因小鼠肝脏中特异性表达。结论成功构建了肝脏特异性表达的DLK1转基因小鼠。
- 黄丽钰王克生韩泽产张新
- 关键词：肝肿瘤基因表达转基因
- PRM1,一个新的候选结肠癌相关CT抗原基因的识别及其在结肠癌组织中的表达分析被引量：5
- 2008年
- 目的筛选新的肿瘤/睾丸抗原相关基因,为肿瘤的诊断和治疗提供理论依据。方法利用文献报道的大规模平行信号测序技术获得的人类33种正常组织的基因表达谱,经生物信息学分析筛选出睾丸富集表达基因。利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,在15种人类正常组织中对候选基因进行验证,最后利用荧光定量PCR技术对睾丸特异基因在结肠癌组织和癌旁组织中的表达差异进行分析。结果在15种人类正常组织中,PRM2,PRM1,TNP1,AKAP4,TCP11为睾丸特异性表达,在其它组织中均无表达。其中PRM1基因在50%(6/12)的结肠癌组织中有明显的上调(>2倍)。其它基因在结肠癌中表达与癌旁组织比较无统计学差异。结论PRM1可能是一个新的CT基因,结果显示PRM1基因可能会在结肠癌的分子诊断或者免疫治疗中起到重要作用。
- 滕小梅韩泽广黄健
- 关键词：肿瘤睾丸抗原结肠癌逆转录聚合酶链反应
- 重组腺病毒介导RNA干扰人DLK1基因表达的研究被引量：1
- 2009年
- 构建抑制人DLK1基因表达的重组腺病毒载体,利用腺病毒载体介导的RNA干扰技术评价其在肝癌细胞株中的基因沉默效应.将针对人DLK1基因的RNAi寡核苷酸序列,连接到腺病毒穿梭质粒中,在含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的大肠杆菌BJ5183内进行同源重组.重组腺病毒载体在HEK-293细胞中包装扩增,得到高滴度的重组腺病毒.通过绿色荧光蛋白示踪腺病毒的感染效果,并通过荧光实时RT-PCR,Western blot的方法证实重组腺病毒能够显著抑制DLK1基因在肝癌细胞株中的表达.
- 邢文明徐晓陈斐张新韩泽广
- 关键词：RNA干扰腺病毒肝癌
- DLK1的研究进展被引量：4
- 2005年
- 穿膜蛋白DLK1是表皮生长因子(EGF)家族的成员之一,其结构特征为蛋白的细胞外区域拥有6串在结构及氨基酸序列上与表皮生长因子高度同源的重复结构。DLK1基因为父系表达的印记基因,定位于人类染色体14q32。DLK1可以抑制脂肪前体细胞向脂肪细胞分化,在正常神经内分泌细胞及其肿瘤细胞中表达,提示DLK1在神经内分泌轴中起着调控细胞生长分化的作用,同时DLK1在胚胎肝、造血干细胞及早期肌肉组织中均有表达。
- 张敏张新韩泽广
- 关键词：DLK1神经内分泌细胞NOTCH信号
