国家自然科学基金(30873426)
- 作品数：12 被引量：74H指数：7
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- 猪苓及猪苓多糖对膀胱癌模型大鼠腹腔巨噬细胞吞噬和表面免疫相关分子表达的影响被引量：12
- 2011年
- 目的:观察猪苓及猪苓多糖(PPS)对BBN加糖精诱导的膀胱癌大鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能、体外NO释放及共刺激分子和表面分子表达的影响。方法:实验分为空白对照组、模型组、PPS组和猪苓高中低剂量共6组。用流式细胞术检测膀胱癌大鼠腹腔巨噬细胞的荧光微球吞噬率、TLR4/CD14、CD86、CD40的表达。Griess试剂盒检测并分析猪苓及PPS对腹腔巨噬细胞体外NO释放的影响。结果:PPS组与模型组比较,PPS显著促进巨噬细胞吞噬率的增加、NO释放的比值均降低、巨噬细胞表面分子TLR4/CD14、CD86、CD40的表达均显著升高(P<0.05)。不同浓度猪苓组与模型组比较巨噬细胞吞噬率增加、NO释放的比值均降低(P<0.05),巨噬细胞表面分子CD86表达增加。低浓度猪苓组巨噬细胞CD40表达百分率显著升高(P<0.05);但TLR4/CD14的表达无明显变化;中、高剂量猪苓组TLR4/CD14的表达百分率与模型组比较则降低(P<0.05),CD40的表达无统计学差异。结论:PPS可显著促进膀胱癌大鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能和表面免疫相关分子的表达,但猪苓组对巨噬细胞功能的影响因剂量不同而表现出不同结果,可能与猪苓诸多成分同时作用或各成分作用的靶点不同有关。
- 曾星李彩霞李彩霞张国伟张娴杨明
- 关键词：猪苓猪苓多糖膀胱癌腹腔巨噬细胞
- TLR2基因稳定沉默膀胱癌细胞株T739-TLR2Δ建立及生物学特征鉴定
- 2010年
- 目的通过载体表达的RNA干扰技术(RNAi)阻断小鼠膀胱癌T739细胞TLR2基因的表达,建立TLR2基因稳定沉默的细胞株。方法构建3种pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR-TLR2重组质粒,脂质体法转染T739细胞,用RT-PCR法筛选干扰效果最强的重组质粒。再将该重组质粒转染T739细胞,用杀稻瘟菌素筛选抗性细胞克隆,即获得TLR2受体及其mRNA稳定表达最低的稳转细胞株,并鉴定其生物学特征。结果测序结果显示设计合成的DNA片段已正确插入载体,将沉默效果最强的重组质粒pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR-TLR2转染T739细胞,筛选出有效沉默T739细胞TLR2基因表达的细胞株T739-TLR2Δ。TLR2mRNA和受体表达分别下降95%和90%以上;T739-TLR2Δ细胞增殖指数降低、群体倍增时间延长,未发现明显凋亡细胞。结论构建pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR-TLR2重组质粒能稳定抑制T739细胞TLR2表达,可用于研究TLR2基因在T739细胞的功能与作用。
- 危建安曾星韩凌黄羽
- 关键词：RNA干扰基因沉默TOLL样受体2膀胱肿瘤
- 甘草酸对膀胱癌T24细胞增殖和凋亡的影响被引量：1
- 2011年
- 目的通过研究甘草酸(glycyrrhizic acid,GL)对人膀胱癌细胞T24增殖、细胞凋亡的影响,初步探讨甘草酸对人膀胱癌细胞的抑制作用及其可能的机制。方法用MTT方法检测GL对T24增殖的影响,并通过流式细胞术检测GL对T24细胞细胞凋亡的作用,同时结合形态学观察。结果 GL(500,800,1 000μg/ml)作用24,48,72 h后,与对照组比较,T24增殖减慢,OD值降低,细胞凋亡率增高,从24 h开始出现明显的凋亡,并随时间增长凋亡率逐渐增高,并呈现一定的剂量依赖性。结论甘草酸可以抑制T24细胞的增殖,并诱导T24细胞的凋亡。
- 郑芳黄永佳张娴曾星
- 关键词：甘草酸膀胱癌T24细胞凋亡
- 甘草苷对T24细胞增殖和凋亡影响被引量：1
- 2012年
- 目的:探讨甘草苷(Liquiritin,LQ)对人膀胱癌细胞T24增殖和凋亡的影响及其可能作用机制。方法:实验分为对照组、LQ20、50、100μg/mL组。MTT观察LQ对T24细胞增殖的影响,Annexin V/PI染色,流式细胞术检测LQ对T24细胞细胞凋亡的诱导作用,Western blot检测Caspase 3蛋白表达。结果:与对照组比较,LQ20、50、100μg/mL在24、48、72h均对T24有明显的细胞增殖抑制作用,LQ作用72h后细胞凋亡率增高,Casepase3蛋白含量明显增高。结论:LQ能抑制T24细胞的增殖和诱导细胞凋亡,其机制与Csaepase3蛋白表达增高有关。
- 张娴黄永佳曾星
- 关键词：甘草苷膀胱癌细胞T24细胞增殖细胞凋亡
- 猪苓及猪苓多糖对BBN诱导的膀胱癌大鼠胸腺、脾指数及CD86表达的影响被引量：13
- 2012年
- 目的观察猪苓及猪苓多糖(PPS)对BBN诱导膀胱癌过程中对大鼠胸腺、脾指数和膀胱组织免疫细胞浸润及CD86表达的影响,从而探讨其抗肿瘤作用中的免疫学机理。方法用N-丁基-N-4-羟丁基亚硝胺(BBN)和糖精水诱导建立Fisher344大鼠膀胱肿瘤模型,实验分6组即对照组、模型组、PPS组(130 mg.kg-1)及猪苓低、中、高剂量组(剂量分别为50、250、500 mg.kg-1)。用称重法测定大鼠的体质量和胸腺、脾脏质量,计算胸腺指数和脾指数;苏木素-伊红(HE)染色观察各组间质淋巴细胞浸润情况,免疫组化法观察各组大鼠膀胱组织CD86的表达情况。结果模型组大鼠胸腺指数显著降低(P<0.05);PPS组的胸腺指数明显高于模型组(P<0.05),猪苓各组脾指数与模型组比较差异无统计学意义。PPS组、猪苓低剂量和中剂量组淋巴细胞浸润较明显,可见淋巴滤泡形成;PPS组与模型组比较有显著性差异(P<0.05)。模型组膀胱肿瘤组织中CD86弱表达或几乎不表达;PPS组膀胱癌上皮CD86表达明显增强,且癌旁上皮CD86有表达。结论猪苓和PPS可通过影响膀胱癌模型大鼠胸腺、脾指数和膀胱组织及癌旁组织淋巴细胞浸润及CD86表达,PPS的作用更显著,猪苓和PPS参与了抑制肿瘤的发生发展过程。
- 李彩霞曾星黄羽张国伟张娴杨明
- 关键词：猪苓猪苓多糖膀胱癌
- 猪苓多糖对膀胱癌细胞TLR2/4-NF-κB信号通路相关基因影响被引量：12
- 2010年
- 目的:研究猪苓多糖(PPS)对膀胱癌细胞(T739)TLR2/4-NF-κB通路相关基因表达的影响及其与TLR2/4关系。方法:应用qRT-PCR、Western blot和流式细胞术(FCM)等方法检测PPS作用T739细胞后IKKβ、NF-κBp65、ICAM1和CCL2mRNA与蛋白表达变化;应用标记探针结合酶联免疫吸附法检测PPS作用T739细胞后NF-κBp65DNA结合活性改变;应用免疫组化方法观察PPS作用T739细胞后NF-κBp65胞核表达变化。结果:PPS作用T739细胞后,IKBKB(IKKβ)、RelA(NF-κBp65)、ICAM1和CCL2mRNA表达均显著下降,IKKβ、CCL2蛋白表达也下调,ICAM1蛋白表达无明显变化,并且沉默TLR4后能抑制上述基因表达下调,沉默TLR2作用不明显。同时PPS能减弱T739细胞胞核的NF-κBp65DNA结合活性及下调NF-κBp65胞核表达;沉默TLR4后能抑制NF-κBp65的DNA结合活性的降低与NF-κBp65胞核表达的下调。结论:猪苓多糖主要经TLR4信号通路抑制相关基因表达、NF-κBp65DNA结合活性与胞核表达,TLR2信号通路也参与了2个基因表达的介导作用。
- 曾星危建安韩凌黄羽
- 关键词：猪苓多糖膀胱肿瘤核转录因子ΚB信号通路
- 猪苓及猪苓多糖对BBN诱导的膀胱癌大鼠外周血T淋巴细胞亚群表达的影响被引量：21
- 2010年
- 目的观察猪苓及猪苓多糖(PPS)对BBN诱导的膀胱癌大鼠外周血T淋巴细胞亚群分布的影响。方法药物干预膀胱癌大鼠第6周、第12周后眼眶后静脉丛采血,流式细胞术检测外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+和CD8+、CD28+、CD25+及TCRγδ+表达变化。结果模型组外周血CD3+、CD4+CD3+和CD8+CD3+、CD28+的T淋巴细胞的百分率(均值)均明显低于空白对照组;药物干预第6周后,PPS及不同剂量猪苓组CD8+CD3+和CD28+与模型组比较均显著升高(P<0.05);第12周后,PPS组CD4+CD3+的T淋巴细胞的百分率显著升高(P<0.05),不同剂量猪苓组CD28+表达均升高,其中中剂量组升高显著(P<0.05)。PPS组TCRγδ+的T淋巴细胞的百分率(均值)同模型组比较显著升高(P<0.05)。结论 PPS可通过上调膀胱癌大鼠外周血的CD8+CD3+、CD28+及TCRγδ+T淋巴细胞水平,增强膀胱癌大鼠对抗原的免疫应答水平,从而促进免疫功能的恢复。
- 李彩霞曾星黄羽张国伟张娴周丹
- 关键词：猪苓猪苓多糖T淋巴细胞亚群膀胱癌
- 猪苓多糖/卡介苗诱导的热休克蛋白对巨噬细胞表面分子的影响被引量：7
- 2009年
- 目的:观察猪苓多糖/卡介苗诱导T24膀胱癌细胞产生的细胞外热休克蛋白对J774A.1巨噬细胞TLR、共刺激分子、粘附分子、活化分子表达的影响,探讨猪苓多糖/卡介苗灌注治疗膀胱癌的天然免疫启动机制。方法:(1)ELISA检测猪苓多糖/卡介苗与T24膀胱癌细胞共培养上清中HSP90、HSP70、HSP60、HSP27的表达。(2)流式细胞术检测含HSP共培养上清(eHSP)对小鼠J774A.1巨噬细胞表面分子CD14、TLR2/4、MHCⅠ/Ⅱ;活化分子CD25;共刺激分子CD80、CD86、CD40;粘附分子CD44、CD62L、CD11b、CD18表达的影响。(3)用流式细胞术检测TLR4/MD2抗体复合物阻断J774A.1巨噬细胞表面TLR4后,eHSP对其表面分子MHCⅠ/Ⅱ、CD25、CD80、CD86、CD40、CD44、CD62L、CD11b、CD18的表达。结果:(1)猪苓多糖/卡介苗诱导T24膀胱癌细胞产生的热休克蛋白呈剂量和时间依赖性,猪苓多糖(2mg/ml)和卡介苗(250μg/ml)作用48小时时HSP的表达至峰值,其中HSP70呈优势表达;(2)含HSP的共培养上清可上调J774A.1巨噬细胞TLR4、MHCⅠ、CD86、CD40、CD25分子的表达,增强粘附分子CD44、CD62L荧光强度;(3)含HSP的共培养上清作用于用TLR4/MD2阻断后的巨噬细胞,其表面分子CD86、MHCⅠ、CD40、CD25的表达降低。结论:猪苓多糖/卡介苗可诱导T24膀胱癌细胞产生危险信号热休克蛋白,并且热休克蛋白可通过激活小鼠J774A.1巨噬细胞TLR4信号通路,上调其表面分子的表达,启动抗膀胱癌天然免疫应答。
- 黄羽曾星张娴周丹
- 关键词：猪苓多糖卡介苗热休克蛋白膀胱癌巨噬细胞表面分子
- 猪苓化学成分及药理作用浅述被引量：9
- 2011年
- 猪苓味甘、淡,性平,归肾、膀胱经,功效利水渗湿,常用于治疗小便不利,水肿,泻泄,淋浊等病,现代研究表明:猪苓中所含麦角甾醇、精蛋白、多糖等成分还具有抗肿瘤、防治肝炎的作用。
- 崔大鹏和瑞欣
- 关键词：猪苓麦角甾醇猪苓多糖药理作用
- The Regulatory Effects of Polyporus Polysaccharide on the Nuclear Factor Kappa B Signal Pathway of Bladder Cancer Cells Stimulated by Bacillus Calmette-Guerin被引量：12
- 2011年
- 检测 Polyporus 多糖(PPS ) 的效果的目的，杆菌 Calmette-Guerin (BCG ) ，和他们表明小径伙伴基因表示的原子因素 kappa B (NF-B ) 上的联合并且对膀胱癌症与 BCG 在协作调查 PPS 的有毒减少的效果的分子的机制。
- 危建安曾星韩凌黄羽
- 关键词：信号转导通路猪苓多糖DNA结合活性ELISA检测
