佛山市科技发展专项基金(03020031)
- 作品数：4 被引量：12H指数：2
- 相关作者：冼琼珍顾万军叶润全黄良宗黄耿森更多>>
- 相关机构：佛山科学技术学院更多>>
- 发文基金：佛山市科技发展专项基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪胸膜肺炎放线杆菌PCR检测方法的建立及临床应用被引量：4
- 2007年
- 为建立直接检测可疑病料中胸膜肺炎放线杆菌(APP)的PCR诊断方法,对用以扩增apxⅣA毒力基因3′端长约442 bp的核苷酸片段的引物、模板、TaqDNA聚合酶、dNTPs的最适剂量及退火温度进行了优化筛选,并进行了特异性及重复性试验;以筛选出的优化条件,对临床可疑病料进行了PCR检测。结果,在25μL体系中,以5 pmol/μL引物、0.25μLTaqDNA聚合酶、2 mmol/L dNTPs、56℃退火温度对APP标准菌株apxⅣA毒力基因的扩增效果最好,重复性和稳定性高;而对类症菌株的扩增结果则为阴性,表明其特异性强。对分离到APP的病料PCR阳性率为100%(5/5);未分离到APP的纤维渗出性病料中,新鲜与陈旧病料PCR阳性率分别为70.59%(12/17)、50.00%(4/8),而非纤维渗出性病料的PCR结果均为阴性(0/45、0/9)。结果表明,建立的PCR方法特异、快速、稳定、敏感,优于细菌学方法,它可作为APP可疑病料的理想诊断方法。
- 冼琼珍叶润全顾万军王淑敏黄良宗
- 关键词：胸膜肺炎放线杆菌PCR
- 猪胸膜肺炎放线杆菌不同菌种保存方法研究被引量：1
- 2007年
- 为了寻找简便的猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)的菌种保存方法,比较了在不同保存条件下APP菌种的存活期,结果表明:冷冻干燥法效果最好,-70℃下APP可保存2年以上;其次为绵羊脱纤血法,超低温下APP可保存1年以上,是较理想的APP简便保存法;甘油生理盐水法、血清甘油法等保存期较短,均在6个月左右,提出实验室保存APP菌种以冻干法与绵羊脱纤法交替联合使用,可有良好的菌种保存效果。
- 冼琼珍叶润全黄耿森梁浩辉
- 关键词：猪胸膜肺炎放线杆菌菌种保存
- 血清6型猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的分离与鉴定被引量：5
- 2007年
- 从广东某猪场出现呼吸困难、肺脏有出血性纤维渗出性病变的病死猪中分离出1株有多形性趋向的革兰阴性球杆菌,卫星现象观察、CAMP试验及V因子依赖性试验均为阳性,用PCR方法能扩增出各血清型猪传染性胸膜肺炎放线杆菌均有的apxⅣA基因长约422 bp的特异片段,小白鼠攻毒试验显示其有致病性,血清学检测表明该分离菌为血清6型猪传染性胸膜肺炎放线杆菌。
- 冼琼珍黄耿森叶润全顾万军
- 关键词：猪传染性胸膜肺炎放线杆菌
- 猪胸膜肺炎放线杆菌ApxI A毒力基因的克隆及序列分析被引量：2
- 2007年
- ApxI A为猪胸膜肺炎放线杆菌（APP）的重要毒力基因,经PCR扩增从APP标准1型菌株得到长为3 069 bp的ApxI A基因,将该基因克隆到pMD-18 Tsimple Vector载体,重组质粒经PCR鉴定、酶切鉴定及序列测定,与GenBank收录的其它ApxI A基因序列比较分析,核酸序列同源性在98%-99%之间。APP的ApxI A基因的获得,可为进一步研究该基因及建立有效的诊断方法奠定基础。
- 冼琼珍彭启明王淑敏顾万军黄良宗
- 关键词：猪胸膜肺炎放线杆菌克隆
