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葡萄核心种质建立的构想被引量：4: 2010年; 对有关核心种质的概念、特点及相应的研究进展进行了概述,对开展葡萄核心种质研究的步骤、方法及核心种质的检验指标等方面均做出了全面的阐述,并提出葡萄核心种质建立的构想。; 刘鑫铭刘崇怀张国海郭大龙樊秀彩孙海生; 关键词：葡萄核心种质

一种简便快速高效的DNA银染方法被引量：8: 2010年; 以葡萄叶片为试材,对变性聚丙烯酰胺凝胶（PAGE）中DNA银染及显色方法进行了改良,改良后的方法省略了预处理、固定、用试剂终止显色过程等步骤。使用改进的显带方法得到的PAGE胶图片,DNA带型和背景具有更高的对比度和分辨率;同时操作简单,耗时短,使用试剂少。改良方法使PAGE中DNA银染显色全程时间缩短至15~20 min,且效果较好,可较好的替代常规的银染方法。; 郭大龙张君玉石春梅张国海白晓燕高姗姗; 关键词：聚丙烯酰胺凝胶银染显色

葡萄目标起始密码子多态性反应体系的优化被引量：43: 2011年; SCoT标记是一种新型目的基因分子标记方法,采用L16(45)正交试验和单因素试验2种方法优化了葡萄SCoT-PCR反应体系,结果表明正交试验中关键影响因子为dNTPs浓度,单因素试验中为dNTPs和Mg2+浓度。综合2种方法,优化的葡萄SCoT-PCR反应体系为:Mg2+2.0 mmol.L-1、dNTPs 0.3 mmol.L-1、Taq酶1.0 U、引物0.3μmol.L-1、DNA模板30 ng,总体积20μL。扩增程序为:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,54℃退火1 min,72℃复性2 min,34个循环;最后72℃延伸8 min。该反应体系在20个葡萄品种的验证中表现出良好的稳定性和可重复性,该反应体系的建立为葡萄种质遗传多样性评价、基因组分析、指纹图谱构建、分子标记辅助选择育种等研究提供了新的技术手段。; 张君玉郭大龙龚莹刘崇怀李猛张国海; 关键词：葡萄正交设计单因素试验

葡萄核心种质的构建被引量：26: 2012年; 【目的】在已建立的葡萄初级核心种质的基础上,利用SSR分子标记技术构建葡萄核心种质。【方法】利用M策略(Core Finder和Power Core)、遗传距离法(least distance stepwise sampling,LDSS和geneticdistance optimization,GDOPT)和Core Hunter法构建核心种质,并对He、Ho和I值等遗传多样性指数和方差差异百分率(VD%)、均值差异百分率(MD%)、极差符合率(CR%)和变异系数变化率(VR%)等表型指标进行统计检验,同时采用SSR和SRAP分子标记的主坐标分析对其进行确认。【结果】M策略构建的核心种质能保留初级核心种质全部的等位基因,遗传距离法抽取的核心种质对原始种质具有较好的代表性。为使所构建的核心种质具有最大的遗传距离和最大的遗传多样性,对M策略、遗传距离法和Core Hunter法构建的核心种质进行了合并,48份葡萄核心种质以最少的种质材料保留了初级核心种质96.21%的等位基因,以5.53%的取样比例代表了原始整体种质92.90%的遗传多样性。【结论】经分子和表型检验,所构建的核心种质具有较好的代表性和遗传多样性。同时本研究所采用的方法对其它作物核心种质的构建具有重要的参考价值。; 郭大龙刘崇怀张君玉张国海; 关键词：葡萄核心种质 SSR SRAP

葡萄SRAP反应体系优化及引物筛选被引量：33: 2010年; 本试验利用L16(45)正交试验设计探寻葡萄SRAP-PCR反应体系中的关键因子,同时结合单因素试验简单、快捷的特点逐个对PCR反应体系的主要成分进行优化。充分利用两种方法的优点并降低试验工作量取得了较好的效果,建立了适于葡萄的SRAP反应体系。结果表明Mg2+浓度为影响葡萄SRAP-PCR反应的关键因素;优化的20μL SRAP-PCR反应体系中各组分的最适含量为:10×Buffer2.0μL,Mg2+2.5mmol/L,dNTPs0.3mmol/L,引物0.4μmol/L,Taq DNA聚合酶1.0U,模板DNA1.0ng/μL。利用SRAP反应体系,从100对SRAP引物组合中筛选出扩增稳定,条带清晰,多态性好的引物19对。本研究建立的适于葡萄SRAP-PCR扩增的反应体系,将为葡萄种质遗传多样性评价、基因组分析、指纹图谱构建,分子标记辅助育种和遗传改良研究提供基础。; 郭大龙张君玉李猛张国海刘崇怀; 关键词：葡萄 SRAP 引物筛选

葡萄叶片表型多样性分析被引量：5: 2010年; 对国家果树种质郑州葡萄资源圃内562份栽培品种叶片性状进行了调查,分析了葡萄资源叶片表型性状的多样性。结果表明:葡萄资源在幼叶表面颜色、花青素着色、表面光泽;成龄叶形状、裂片数、泡状凸起等方面均存在着丰富的多样性。以幼叶表面红棕色、成龄叶五角形、上裂刻开张、叶柄洼半开张、锯齿双侧凸等类型居多。; 刘鑫铭张国海刘崇怀郭大龙樊秀彩孙海生; 关键词：葡萄叶片表型性状多样性

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河南省教育厅自然科学基金(2009B210003)