温州市科技局科研基金(Y20100020)
- 作品数：3 被引量：18H指数：2
- 相关作者：顾玲佳倪连松高倩更多>>
- 相关机构：台州市第一人民医院温州医学院附属第一医院绍兴市第六人民医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 法舒地尔对高糖培养肾小管上皮细胞增殖和纤维化的影响被引量：2
- 2014年
- 目的:探讨法舒地尔(Fasudil)对高糖培养的肾小管上皮细胞(HK-2)增殖和纤维化的影响。方法:将HK-2细胞分为正常对照组(NG组,葡萄糖浓度5.5 mmol/L)、高张组(HM组,葡萄糖浓度5.5 mmol/L+甘露醇54.5 mmol/L)、高糖组(HG组,葡萄糖浓度60 mmol/L)、高糖+小剂量法舒地尔干预组[FA(5)组,D-葡萄糖60 mmol/L+法舒地尔5μmol/L]、高糖+中剂量法舒地尔干预组[FA(10)组,D-葡萄糖60 mmol/L+法舒地尔10μmol/L];6高糖+大剂量法舒地尔干预组[FA(20)组,D-葡萄糖60 mmol/L+法舒地尔20μmol/L]。四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定HK-2细胞增殖;免疫共沉淀法检测p-MYPT1-Thr853;Western印迹法检测结缔组织生长因子(CTGF)的表达;ELISA法检测细胞培养上清液转化生长因子β1(TGF-β1)和纤维连接蛋白(Fn)的含量。结果:与NG组比,HG组HK-2细胞出现增殖增加,p-MYPT1-Thr853、TGF-β1、CTGF和Fn的表达增加。与HG组比,FA(5)组、FA(10)组、FA(20)组均抑制了HK-2细胞的过度增殖,p-MYPT1-Thr853、TGF-β1、CTGF和Fn的表达均减少。结论:法舒地尔可能通过抑制Rho激酶活性抑制高糖培养的肾小管上皮细胞增殖和纤维化。
- 顾玲佳倪连松
- 关键词：法舒地尔肾小管上皮细胞纤维化糖尿病肾病
- 法舒地尔对高糖诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响被引量：15
- 2013年
- 目的探讨法舒地尔对高糖诱导的人肾小管上皮细胞（HK-2）转分化的影响及可能的作用机制。方法HK-2细胞分别加入葡萄糖5．5mmol·L^-1、葡萄糖5．5mmol·L^-1＋甘露醇54．5mmol·L^-1、葡萄糖60mmol·L^-1（高糖）以及葡萄糖60mmol·L^-1＋法舒地尔5，10和20ummol·L^-1。免疫共沉淀法检测葡萄糖60mmol·L^-1作用0—24h后磷酸化肌球蛋白磷酸酶目标亚单位1-苏氨酸696（p—MYPTl一Thr696）和P—MYPTl．Thr853的表达，以评估Rho相关的卷曲螺旋形成的蛋白激酶（ROCK）的活性；免疫细胞化学法检测a-平滑肌肌动蛋白（a-SMA）表达；Western蛋白质印迹法检测E-钙黏素、波形蛋白和结缔组织生长因子（CTGF）蛋白表达。结果与未加高糖刺激前比较，高糖培养3h后，细胞p—MYPTl-Thr696表达明显增加．积分吸光度（IA）值由1．08±0．09增加到2．4±0．09（P〈0．01）；与未加高糖刺激前比较，高糖培养7h后，细胞P—MYPT1-Th旧53表达明显增加，IA值由0．57±0．01增加到1．45±0．14（P〈0．01），表明高糖能导致HK-2细胞ROCK分子活化。与正常对照组相比，葡萄糖60mmol·L。组HK-2细胞培养72h后E·钙黏素表达减少（P〈0．01），oc—SMA、波形蛋白和CTGF表达增多（P〈0．01）；葡萄糖5．5mmol·L^-1＋甘露醇54．5mmol·L一组与正常对照组比较无明显变化。与葡萄糖60mmol·L^-1组相比，葡萄糖60mmol·L^-1＋法舒地尔5，10和20umol·L^-1组E-钙黏素表达增多（P〈0．01），a—SMA、波形蛋白和CTGF表达减少（P〈0．01），且法舒地尔20ummol·L^-1组改变更为明显，法舒地尔3个浓度组组间比较差异有显著性（P〈0．05）。结论法舒地尔能抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞转分化，可能部分通过减少CTGF的表达而产生作用。
- 倪连松顾玲佳高倩
- 关键词：法舒地尔肾小管转分化高糖
- 法舒地尔对高糖培养的肾小管上皮细胞转分化的抑制作用被引量：2
- 2012年
- 目的探讨法舒地尔对高糖培养人肾小管上皮细胞(HK-2)转分化的影响及可能作用机制。方法人肾小管上皮细胞同时加入葡萄糖60 mmol·L-1和法舒地尔20μmol·L-1。配体结合沉淀法检测葡萄糖60mmol·L-1作用0～24 h后细胞Rho A活性,免疫细胞化学技术检测上皮钙黏素表达,Western印迹法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,ELISA法检测细胞培养上清液转化生长因子β1(TGF-β1)的含量。结果在一定时间范围内,高糖能刺激细胞Rho A分子活化;与正常对照组比较,葡萄糖60 mmol·L-1培养HK-2细胞72 h后上皮钙黏素表达明显减少(P<0.01),α-SMA表达明显增多(P<0.01),TGF-β1分泌增多(P<0.01),而葡萄糖5.5 mmol·L-1+甘露醇54.5 mmol·L-1高张组无明显差异。法舒地尔20μmol·L-1同步干预后,与高糖组比较,细胞上皮钙黏素表达明显增多〔(0.03±0.01)vs(0.08±0.02),P<0.05〕,α-SMA表达下降(P<0.05),48 h时TGF-β1分泌明显减少〔(128±11)vs(49±5)μg.g-1(P<0.05)〕。结论法舒地尔能抑制高糖培养的肾小管上皮细胞转分化,可能部分通过减少TGF-β1的分泌发挥作用。
- 倪连松高倩顾玲佳
- 关键词：法舒地尔糖尿病性肾病肾小管上皮细胞
