国家高技术研究发展计划(101-05-03-1)
- 作品数：8 被引量：34H指数：4
- 相关作者：金宁一王兴龙金扩世丁壮殷震更多>>
- 相关机构：解放军军需大学延边大学沈阳农业大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 鸡痘病毒282E4株表达载体构建及新城疫病毒F蛋白的表达
- 将鸡痘病毒282E4株TK基因和1.5kbB片段2个非必需区克隆后,分别在TK基因Nco I位点和B片段EcoR I位点插入复合启动子(由牛痘病毒A型包涵体(ATI)启动子和20个串联的痘苗病毒(VV)突变型p7.5启动...
- 郭志儒金宁一方厚华罗坤金扩世李萍
- 关键词：鸡痘病毒新城疫病毒F蛋白
- 新城疫病毒昌黎株与国外毒株HN蛋白基因核苷酸及氨基酸差异性分析被引量：8
- 2000年
- 参考国外发表的新城疫病毒 ( NDV)的 HN基因序列设计了 1对特异性引物 ,应用 RT-PCR对 NDV昌黎株 (野毒 )的 HN基因进行了扩增 ,扩增产物克隆后测序。扩增出的 HN基因核苷酸长度为 1 74 2 bp,编码 571个氨基酸 ,序列中有 6个糖基化位点 ,1 3个半胱氨酸残基 ,与国外发表的强毒株序列相符。核苷酸同源性在 88.5%～ 92 .9%,推导的氨基酸序列同源性在 90 .0 %～ 94 .2 %之间。
- 丁壮金宁一王兴龙金扩世罗坤郭志儒殷震
- 关键词：新城疫病毒HN蛋白基因
- IBDV VP2/VP0基因在重组鸡痘病毒中的表达及实验免疫研究
- 以FPV 282E4株TK基因为侧翼,分别将IBDV VP2和VP243目的基因克隆到牛痘病毒A型包涵体(ATI)和痘苗病毒P7.5复合型启动子下游,构建成2个重组表达质粒,命名为pUTALacVP2和pUTALacVP...
- 金宁一刘毅郭志儒方厚华古长庆罗坤夏志平
- 关键词：传染性法氏囊病病毒VP基因重组鸡痘病毒免疫原性
- 四个新城疫病毒强毒株HN基因的同源性分析被引量：2
- 2000年
- 新城疫病毒（ＮＤＶ）四平株、昌黎株、青岛株、Ｆ４８Ｅ８株分别接种９日龄ＳＰＦ鸡胚增殖，蚀斑纯化（３代），生物学特性鉴定及结合基因序列分析，表明ＮＤＶ四平株、昌黎株、青岛株均为强毒株。经差数、蔗糖密度梯度离心提纯病毒，分别提取ＲＮＡ，利用一对特异性引物及ＲＴ－ＰＣＲ方法，一次性扩增出 ＮＤＶ四平株、昌黎株、青岛株和 Ｆ４８Ｅ８株的全长 ＨＮ基因，分别将该ＨＮ基因克隆入载体ｐＫＳ（－）并进行测序。序列分析表明，这４个毒株ＨＮ基因核苷酸长度均为１７１３ｂｐ，编码５７１个氨基酸，其中四平株和 Ｆ４８Ｅ８株含有５个糖基化位点，青岛株和昌黎株含有 ６个糖基化位点，四平株含有 １２个半胱氨酸残基，而昌黎株、青岛株和Ｆ４８Ｅ８株含有１３个半胱氨酸残基。３个野生毒株与Ｆ４８Ｅ８相比较，核苷酸序列同源性为８５．７％－９９．３％，推导的氨基酸序列同源性为 ８９．５％－９８．８％，其中 ＮＤＶ四平株与标准强毒 Ｆ４８Ｅ８同源关系最近，核苷酸同源性为 ９９．３％，推导的氨基酸同源性为 ９８． ８％。
- 丁壮金宁一王兴龙金扩世李太元吕杰米志强夏志平殷震
- 关键词：新城疫病毒强毒株HN基因同源性分析
- 新城疫病毒(昌黎株)F蛋白基因的克隆和序列分析
- 2000年
- 以鸡胚尿囊液繁殖的新城疫病毒 (昌黎株 ) ,经差速离心浓缩后 ,提取 RNA,参考国外发表新城疫病毒 F基因序列 ,设计并合成了一对长度皆为 2 6 bp特异性引物。经 RT- PCR扩增出 NDV昌黎株部分 F基因序列 ,将其插入本室构建的 Fp KS(- ) ,进行序列测定。序列分析表明该部分 F基因长度为810 bp,编码 2 6 7个氨基酸 ,有 4个半胱氨酸残基和 2个糖基化位点 ,裂解位点区 (112 - 117)氨基酸序列为 R- R- Q- K- R- F,与所有强毒株在这一区域的序列 (R/ K- R- Q- R/ K- R- F)相符 ,证明
- 米志强金宁一王兴龙丁壮金扩世王承宇
- 关键词：新城疫病毒F基因
- 共表达新城疫病毒F基因、传染性法氏囊病病毒VP0基因的重组鸡痘病毒构建及实验免疫学研究
- 为了使雏鸡能抵抗新城疫病毒(NDV)和传染性法氏囊病病毒(IBDV)的感染,常通过对130日龄左右的产蛋鸡使用NDV—IBDV二联油乳剂灭活苗免疫,以使雏鸡获得高水平的母源抗体。然而这些母源抗体对雏鸡接种弱毒疫苗能产生明...
- 夏志平金宁一金扩世郭志儒许凌峰王宏
- 文献传递
- 表达传染性喉气管炎病毒gB基因重组鸡痘病毒疫苗的遗传稳定性评价
- 为了检测表达鸡传染性喉气管炎病毒糖蛋白gB基因的重组鸡痘病毒(rFPV-ILTVgB)的稳定性,我们对重组病毒第6代和16代进行克隆纯化,对纯化后的病毒通过转瓶连续培养传代20代.结果发现第6代纯化病毒(rFPV-ILT...
- 王云峰智海东王玫仇华吉周艳君田志军张绍杰童光志
- 关键词：传染性喉气管炎鸡痘重组鸡痘病毒
- 文献传递
- 重组鸡痘病毒vFV282活疫苗最小免疫剂量及攻毒保护试验
- 2006年
- 将重组鸡痘病毒vFV282疫苗用生理盐水作10-1,10-2,10-3,10-4系列稀释,分别免疫7天龄鸡,于免疫后21 d,分别用NDVI、BDV和FPV攻毒,观察其保护率,结果除NDV攻毒在10-4组保护率为40%(4/10),其余各组均为100%(10/10)保护。表明该疫苗的最小免疫剂量≤10-3TCID50/0.02 mL。
- 金扩世夏志平金宁一徐敬龙贾雷立郭建顺邢启君
- 关键词：最小免疫剂量NDVIBDVFPV
- 新城疫病毒F_(48)E_8株 HN基因在杆状病毒系统中表达被引量：11
- 2002年
- 目的 采用新型杆状病毒表达系统(Bac to Bac系统)在昆虫细胞Sf-9中进行新城疫病毒F48 E8株HN基因表达。方法NDV F48 E8株 HN基因插入到转座载体 pFast Bac Ⅰ,构建重组转座载体 pFast HN,转化到感受态细胞 DH10后,将目的基因转座到穿梭载体Bacmid中,经筛选获得重组Bacmid HN转染到Sf-9昆虫细胞,并进行检测。结果 表达产物经SDS-PAGE、Westem blot检测获得蛋白特异带,相对分子质量约63000。结论NDVF48E8株HN基因能通过新型杆状病毒表达系统在昆虫细胞Sf-9中进行表达,表达量约为细胞总蛋白的10％。
- 李太元殷震金宁一丁壮王兴龙
- 关键词：HN基因杆状病毒系统
- 新城疫病毒F_(48)E_8株HN基因的克隆和序列分析及与国外NDV HN基因的同源性比较被引量：4
- 2001年
- 目的 克隆ＮＤＶ Ｆ４８Ｅ８株ＨＮ基因，与国外ＮＤＶ ＨＮ基因进行比较分析。方法 提取 ＲＮＡ，应用 ＲＴ－ＰＣＲ一次性扩增出ＮＤＶ Ｆ４８Ｅ８株的全长ＨＮ基因，将该ＨＮ基因插入ｐＫＳ（－）后进行克隆并测序。结果 ＮＤＶ Ｆ４８Ｅ８株的ＨＮ基因核苷酸长度为１７１３ｂｐ，编码５７１个氨基酸，有５个糖基化位点，１２个极保守的半胱氨酸残基，与 国外发表的ＮＤＶ序列相符。结论ＮＤＶＦ１８Ｅ８株ＨＮ蛋白基因与国外发表的ＮＤＶ ＨＮ蛋白基因核苷酸同源性在 ８３．３％～８９．２％之间，推导的氨基酸同源性在８７．６％－９１．１％之间。
- 李太元金宁一丁壮王兴龙金扩世吕杰米志强殷震
- 关键词：新城疫病毒HN蛋白基因RT-PCR同源性
