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强磁重力环境对人成骨细胞发动蛋白-2表达和定位的影响被引量：4: 2008年; 研究强磁重力环境对人成骨细胞MG-63中发动蛋白-2表达和分布的影响。采用大梯度超导磁体模拟空间重力环境,该超导磁体可以提供3种不同的强磁重力环境(high magnetic gravitational environment,HMGE),即0g(12T),1g(16T)和2g(12T)。将MG-63细胞分别在0g(12T)、1g(16T)、2g(12T)及对照环境(1g,地磁)中培养24h后,采用Real Time PCR、Western印迹以及激光扫描共聚焦显微术等方法检测HMGE对发动蛋白-2的表达及定位的影响。结果显示,与对照组相比,0g(12T)、1g(16T)、2g(12T)环境处理组MG-63细胞中发动蛋白-2在mRNA上的表达量分别上调6.43、15.57、1.29倍;在蛋白质水平上,0g(12T)、1g(16T)环境处理组细胞发动蛋白-2分别上调89%和7%,而2g(12T)环境处理组则下调41%;在对照组中发动蛋白-2弥散分布于细胞质中,而0g(12T)处理组发动蛋白-2则有从细胞边缘向核周集中的趋势。上述结果说明强磁重力环境影响了发动蛋白-2在MG-63细胞中的表达和定位。; 狄升蒙骞爱荣田宗成张维胡丽芳尹大川续惠云瓮媛媛商澎; 关键词：模拟失重成骨细胞

Co取代介孔磷铝分子筛的合成、表征及催化性能被引量：3: 2009年; 以十六烷基三甲基氯化铵为模板剂,在碱性条件下采用水热晶化法合成Co取代介孔磷铝分子筛。研究溶剂种类和用量、反应温度、反应时间、催化剂用量以及H2O2和苯乙烯摩尔比等因素对反应的影响。催化性能测试表明:该分子筛在苯乙烯氧化制苯甲醛反应中有很好的活性,以乙腈为溶剂,当H2O2和苯乙烯摩尔比为3、催化剂用量为5%时,在70℃反应4h后,苯乙烯的转化率为42.2%,苯甲醛的选择性为82.0%,苯甲醛产率达到34.6%。; 李新柱张记市; 关键词：CO 苯乙烯苯甲醛

基于免疫荧光图像的微管蛋白半定量分析被引量：9: 2009年; 目的:建立一种基于免疫荧光图像的快速、简便、半定量分析微管蛋白的方法.方法:小鼠成骨样细胞MC3T3分别在正常及三维回转条件培养48h后,免疫荧光细胞化学技术标记对照组和回转组的成骨细胞微管骨架,激光共聚焦显微镜采集荧光图像;采用三种不同的专业图像分析软件SimplePCI,Imagepro-Plus6.0(IPP)及ImageJ定量分析三维回转培养条件对小鼠成骨样细胞MC3T3-E1微管细胞骨架的影响;用Western Blot检测α-微管蛋白表达量;用ImageJ软件确定MC3T3-E1细胞微管骨架的分形维数.结果:对采集到的细胞骨架荧光染色图像做定量分析发现,与对照组相比,经过48h三维回转培养,MC3T3-E1细胞图像的荧光强度明显降低(P<0.01);Western Blot结果表明,经过48h三维回转培养,MC3T3-E1细胞α-微管蛋白表达量表达量明显下降;Im-ageJ软件分析结果表明,经过48h三维回转培养,MC3T3-E1细胞微管的分形维数也明显低于对照组(P<0.05).结论:图像分析软件的结果和实验结果一致,表明基于免疫荧光图像的分析方法是可行的,为细胞形态学的定量研究提供了新思路和手段.; 韩晶骞爱荣胡丽芳王哲于丹张蓉商澎; 关键词：微管细胞骨架分形维数

铬取代介孔磷铝分子筛合成与催化性能研究被引量：4: 2010年; 在碱性条件下以十六烷基三甲基氯化铵为模板剂,采用水热晶化法合成了Cr取代介孔磷铝分子筛,并通过XRD、N_2吸附、EPR等分析测试手段进行了表征。结果表明,合成的分子筛为缺乏长程有序的介孔结构。催化性能测试结果表明,该分子筛(Cr-MAP)在乙苯选择性氧化制备苯乙酮反应中呈现优良的催化性能:同时研究了反应时间、反应温度、催化剂用量、TBHP/乙苯摩尔比等因素对反应的影响。以氯苯为溶剂、叔丁基过氧化氢(TBHP)为氧化剂,在8 mmol乙苯、16mmol TBHP、40mg Cr-MAP、5mL氯苯、100℃、反应时间8h的条件下,乙苯转化率为72.8%,苯乙酮选择性为85.4%,苯乙酮产率达到62.2%。; 李新柱张记市杨树林; 关键词：铬乙苯苯乙酮

基因重组酵母工程菌优化表达人源胶原蛋白被引量：1: 2011年; 通过响应曲面法(RSM)优化巴氏毕赤酵母基因工程菌GS115/pPIC9KG6表达高亲水性重组人源胶原蛋白的摇瓶培养条件。采用Box-Behnken设计(BBD)考察初始诱导pH值、温度和甲醇添加量三个主要影响因子对重组人源胶原蛋白表达量的影响,利用DX7Trial软件设计实验方案,根据该方案设置不同培养条件进行实验并测定相关参数。响应面分析确定的最优因素水平组合为:初始诱导pH值为5.0,诱导温度为28℃,甲醇添加量为2.2%/24 h。通过响应面法优化发酵的内在因素水平,找出最佳条件,为利用其指导在发酵罐中进行高密度发酵生产人源胶原蛋白奠定基础。; 刘斌郭红丽钮小松张小霞杨树林; 关键词：巴氏毕赤酵母响应曲面法 BOX-BEHNKEN设计

细胞骨架染色中不同固定方法的探讨被引量：9: 2010年; 探讨不同细胞固定方法对细胞骨架染色的影响,以期发现适合于微丝与微管细胞骨架染色的固定方法。本文分别采用0.5%戊二醛、95%乙醇、4%甲醛及无水冷丙酮等四种固定液对人骨肉瘤细胞MG-63进行固定,然后分别对微丝和微管进行染色、封片,采用激光共聚焦扫描显微镜观察细胞微丝及微管骨架的形态。同时采用图像分析方法对细胞骨架微丝、微管荧光图像进行定量分析。结果表明,0.5%戊二醛固定的细胞,微丝呈清晰的束状纤维,微管呈有规律的束状纤维;95%乙醇固定的细胞,微丝纤维连贯性差,微管纤维非常清晰;4%甲醛固定的细胞,微丝纤维之间比较模糊,微管纤维呈圆弧状,联贯性较差;无水冷丙酮固定的细胞,微丝明显皱缩,呈模糊状,微管清晰可见,连贯性较好。因此,不同固定液固定的原理不同,要根据实验目的,选择合适的固定方法。; 张维骞爱荣高翔胡丽芳瓮媛媛韩晶商澎; 关键词：细胞骨架人骨肉瘤细胞

亚磁场及静态中强磁场影响后肢去负荷大鼠骨重塑: 2009年; 目的观察亚磁场及静态中强磁场对后肢去负荷大鼠骨重塑的影响,并通过亚磁场对主要骨代谢相关细胞细胞增殖、凋亡、周期的研究,探讨亚磁场及静态中强磁场环境影响骨重塑的机制。; 贾斌郑琦谢丽张卫菊骞爱荣商澎; 关键词：基因表达谱

In-cell Western和Cell ELISA在大分子量蛋白质相对定量中的应用被引量：2: 2009年; 探讨两种新的检测方法—In-cell Western和Cell ELISA在大分子量蛋白质相对定量中的应用。将培养细胞原位固定、通透化、封闭,然后加入目标蛋白质的一抗、红外荧光标记的二抗或酶标记的二抗,使用双红外成像系统或多功能酶标仪对目标蛋白质进行相对定量。通过这两种方法检测模拟失重环境对成骨细胞中大分子量骨架相关蛋白——微管微丝交联因子(microtubule actin cross-linking factor 1,MACF1)含量的影响,结果表明模拟失重环境促进了MACF1表达,且这两种方法检测结果一致。In-cell Western和Cell ELISA这两种检测方法灵敏迅速、操作简便,可以用于大分子量蛋白质的相对定量。; 高翔骞爱荣李京宝商澎; 关键词：WESTERN CELL ELISA

基于电渗流驱动的涡流诱导微混合器被引量：3: 2010年; 以电渗流为驱动,设计出一种采用涡流诱导增强混合的微米级混合器。通过控制混合方腔上下壁面电渗流的大小和方向,可诱导腔内流体产生不同的涡流形态,本文重点研究电渗流驱动下形成一个涡流和两个涡流时的混合特性,称相应涡流形态诱导混合下的模式为单涡模式和双涡模式,并采用数学模拟方法定量地研究了两种混合模式下典型的稳态特性和动态特性。研究结果表明:所设计的混合器具有流道短、结构简单,调控方便,可实现高效、连续和稳定的混合等特点;两种混合模式中,双涡诱导混合模式具有更好的应用价值。; 汪源王萍徐远清; 关键词：电渗流

In-Cell Western检测细胞纤连蛋白: 2009年; 目的:利用In-Cell Western技术建立检测细胞纤连白(cFN)的方法.方法:对微孔培养的成骨样细胞进行固定封闭后,使用单克隆抗体对FN进行标记,经红外荧光二抗育后使用Odysssey系统对细胞进行扫描成像和数据分析.在此基础之上优化了固定剂、通透化、封闭剂和一抗浓度.果:免疫印迹法证实了In-Cell Western方法检测的特异性,当MG-63细胞密度低于90%汇合度(细胞数约1.6×104/孔)时,信号与细胞密度呈现较好的线性关系,最低每孔4×103个MG-63细胞的cFN可被检出.结论:成功地建立了一种快速、经济且高通量的cFN检测方法并将其应用于细胞外基质研究.; 李京宝胡丽芳张维骞爱荣商澎; 关键词：WESTERN 纤连蛋白细胞外基质

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国家高技术研究发展计划(2008AA12A218)

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机构

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