国家自然科学基金(30572267)
- 作品数：7 被引量：26H指数：4
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- 聚乳酸-聚乙醇酸纳米粒作为非病毒基因载体被引量：4
- 2009年
- 生物可降解材料聚乳酸-聚乙醇酸制备的载基因纳米粒是一种颇具潜力的非病毒基因载体,可望成为一类新型的安全有效的基因传递系统。本文分别从聚乳酸-聚乙醇酸纳米粒的优势、影响其细胞内摄和基因转染效率的因素以及存在不足与解决措施几个方面对近年来国内外有关聚乳酸-聚乙醇酸纳米粒作为非病毒基因载体的研究进展进行了简要综述。
- 邹伟伟张娜
- 关键词：聚乳酸-聚乙醇酸纳米粒非病毒基因载体
- PLA-PEG纳米粒作为非病毒基因治疗载体的初步研究
- 目的构建阳离子载基因PLA-PEG纳米粒,评价该纳米粒作为非病毒基因治疗载体的可行性。方法采用纳米沉淀法制备阳离子PLA-PEG纳米粒,与报告基因pEGFP复合制备载基因纳米粒,考察其药剂学和生物学性质。结果阳离子PLA...
- 邹伟伟刘春喜张娜
- 关键词：非病毒基因载体
- 文献传递
- 载鱼精蛋白-pDNA复合物固体脂质纳米粒的初步研究被引量：8
- 2007年
- 目的制备非病毒基因载体载鱼精蛋白-pDNA复合物的固体脂质纳米粒(PD-SLN),PD-SLN由多聚阳离子缩合DNA内核与一个脂质外壳组成,从而构成多功能信封式纳米载体(multifunctional envelope-type nano device,MEND)结构,研究其特征,对DNA的保护作用以及DNA的体外释放性质。方法分别采用溶剂扩散法和复乳法制备纳米粒;用透射电镜观察形态;用Zeta电位测定仪测定粒径、多分散指数和Zeta电位;用荧光分光光度法测定基因包封率;分别用琼脂糖凝胶电泳观察复合物及PD-SLN保护pDNA抵抗剧烈外力和核酸酶的降解情况;采用双室扩散法对PD-SLN进行体外释放研究。结果用2种方法制备的SLN呈球形和类球形,平均粒径分别为(231±13.7)和(627±22.9)nm,Zeta电位分别为(-17.8±3.2)和(-25.2±2.7)mV,包封率分别为(41.5±3.62)%和(56.5±5.28)%。pDNA保护性试验表明,PD-SLN对pDNA有保护作用。体外释放实验结果表明PD-SLN缓释能力强。结论PD-SLN是一种制备工艺简单,体外缓释能力好,对pDNA保护性强,具有一定应用前景的非病毒基因载体。
- 叶杰胜张娜马春红黄桂华栾芳
- 关键词：固体脂质纳米粒非病毒基因载体
- 纳米粒沉淀法制备阳离子载基因PLA-PEG纳米粒被引量：6
- 2009年
- 目的建立纳米粒沉淀法制备阳离子PLA-PEG纳米粒的方法。方法采用单因素设计考察不同影响因素对纳米粒粒径大小的影响,在单因素考察的基础上采用正交设计优化处方,制备了粒径较小,正电荷适中的阳离子PLA-PEG纳米粒。并对纳米粒的物理性质如物理形态,平均粒径,粒度分布,Zeta电位,DNA结合率,体外细胞转染能力等进行了考察。结果采用纳米粒沉淀法,通过优化处方和工艺制得的纳米粒外观圆整,呈类球形,大小均匀,平均粒径为89.7 nm,粒径分布指数为0.185,表面荷较高的正电荷,Zeta电位为+28.9 mV,能够高效的结合DNA且能够成功的转染Hela细胞。结论优化确定了纳米粒沉淀法制备阳离子PLA-PEG纳米粒的处方和工艺,可以制备满足细胞转染要求的阳离子载基因纳米粒。
- 邹伟伟张娜
- 关键词：非病毒基因载体
- 阳离子固体脂质纳米粒/pDNA二元复合物的初步研究被引量：4
- 2008年
- 目的制备阳离子固体脂质纳米粒/pDNA二元复合物(SLNs-pDNA),并研究该复合物的药剂学和生物学特征。方法复乳法制备空白阳离子固体脂质纳米粒,与报告基因复合,加入不同浓度Ca^(2+)调节体系的荷正电量,分别对纳米粒的相关理化性质,细胞毒性,体外释药特性及其保护pDNA抵抗核酸酶降解的能力进行考察,通过体外基因转染实验对复合物在COS-7细胞中的转染效率进行了初步评价。结果本实验中制备的纳米粒呈球形或类球形,平均粒径(51.9±0.58)nm,Zeta电位(47.4±1.1)mV,加入Ca^(2+)显著提高了纳米粒复合pDNA的能力,制得的复合物平均粒径为(91.6±5.3)nm,Zeta电位为(31.5±1.4)mV。细胞毒性实验表明,纳米粒对COS-7细胞的毒性较小,凝胶阻滞分析表明,阳离子固体脂质纳米粒能够充分结合pDNA,形成稳定的复合物。pDNA保护性实验表明,该复合物对pDNA有很好的保护作用。体外释放实验结果表明,SLNs-pDNA具有缓释能力。体外基因转染实验表明,该复合物能够转染COS-7细胞,复合物所荷基因能够在该细胞中表达。结论阳离子固体脂质纳米粒/DNA复合物是一种制备工艺简单,复合物粒径较小,细胞毒性小,对pDNA保护作用强,所载DNA能够从复合物中缓慢释放,体外转染效率较高的具有一定开发前景的非病毒纳米基因载体。
- 刘春喜叶杰胜张娜马春红栾芳
- 非病毒基因载体在肺癌基因治疗中的应用
- 2007年
- 对近年采用非病毒载体(裸DNA、阳离子聚合物、阳离子脂质体)治疗肺癌的基本原理和研究进展作一综述。此法有望成为治疗肺癌的新方案。
- 叶杰胜张娜邹伟伟王举涛
- 关键词：肺癌基因治疗非病毒载体
- SYBR Green Ⅰ-荧光法测定载鱼精蛋白缩合基因纳米粒中pDNA的含量和包封率被引量：4
- 2007年
- 目的:建立微量 DNA 含量测定方法,用于载基因纳米粒中 DNA 的含量和包封率测定。方法:利用 SYBR Green Ⅰ与 pD-NA 结合后能激发出强烈荧光,荧光分光光度计检测荧光强度建立标准曲线,测定载基因纳米粒提取液中的 pDNA 含量,计算纳米粒的包封率。结果:SYBR Green Ⅰ荧光分光光度法的检测灵敏度为10.188 ng·mL^(-1),线性范围20.375～1062.5 ng·mL^(-1)(r=0.9998),高、中、低3个浓度的回收率分别为101.0%,97.5%,99.6%;RSD 分别为1.26%,1.09%,1.19%(n=3);日内精密度的 RSD 分别为2.13%,1.88%,2.25%(n=5);日间精密度的 RSD 分别为3.86%,4.97%,3.41%(n=5)。结论:本方法准确可靠、灵敏度高、简便快速,可用于载基因纳米粒中 pDNA 的含量和包封率测定。
- 叶杰胜张娜马春红黄桂华
- 关键词：SYBR荧光分光光度法包封率
- 阳离子PLGA载基因纳米粒的初步研究被引量：4
- 2009年
- 目的制备并评价阳离子PLGA载基因纳米粒(pDNA-CTAB-NPs)。方法纳米沉淀法制备空白阳离子PLGA纳米粒(CTAB-NPs),与报告基因pEGFP复合,考察其理化性质、抗核酸酶降解能力、体外释药特性、细胞毒性及其在A549细胞中的转染情况。结果pDNA-CTAB-NPs呈球形或类球形,平均粒径175.5 nm,Zeta电位+12.54mV,pDNA结合充分(>95%),抗核酸酶降解能力强,具有缓释效果,符合Higuchi释放动力学方程(r=0.997 7),细胞毒性较低,能在A549细胞中表达。结论pDNA-CTAB-NPs是一种制备工艺简单,性能良好,极富潜力的非病毒纳米基因载体。
- 李洪英邹伟伟刘春喜张娜
- 关键词：CTAB非病毒基因载体
