国家高技术研究发展计划(2009AA06Z404)
- 作品数：6 被引量：13H指数：2
- 相关作者：金敏李君文邱志刚陈照立谌志强更多>>
- 相关机构：军事医学科学院贵州大学扬州大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学建筑科学更多>>
- 三种水体中病毒浓缩方法效果比较
- 目的比较三种水体中病毒浓缩方法,评价各方法的浓缩效果,为水体中病毒浓缩方法的选择提供依据。方法将不同浓度的指示病毒(脊髓灰质炎病毒1型PV1)加入经高压灭菌处理后的污水处理厂二级出水中,采用钙离子法、牛肉汤洗膜法和载阳电...
- 徐露李金娟欧阳雅博金敏谌志强邱志刚王景峰陈照立王新为李君文
- 关键词：RT-PCR技术肠道病毒二级出水
- 文献传递
- 水中肠道食源性病毒的多重RT-PCR检测法被引量：2
- 2012年
- 目的建立能同时检测水环境中肠道病毒(Enterovirus,EVs)、诺如病毒GⅡ(Norovorus,Nov GⅡ)、轮状病毒(Rotavirus,RVs)、腺病毒(Adenovirus,AdVs)的多重RT-PCR检测方法。方法根据GenBank收录的肠道食源性病毒核酸序列,利用软件DNAMAN设计肠道病毒通用引物以及Nov GⅡ、RVs、AdVs的特异性引物;将这4对引物置于同一体系中进行多重RT-PCR,利用各种肠道食源性病毒的核酸模板检测其特异性并通过不同滴度[100～107pfu(copies)/ml]病毒测试其灵敏度;利用加标实验验证该方法的准确性;通过对5份河水或某水厂出水大体积水样(50 L)进行病毒富集与检测,以确定该方法的实用性,同时,采用传统细胞培养法验证其结果。结果该方法对目的病毒均获得了理想的电泳条带,而对其他病毒无非特异扩增;对EVs、AdVs的最低检出滴度均为10 pfu/ml,Nov GⅡ-4为10 copies/ml,对RVs的最低检出滴度为102pfu/ml;加标实验检测结果准确率为100%;对5份河水或某水厂出水大体积水样进行病毒富集与检测,对以上各种病毒均有检出且与细胞培养结果一致。结论该方法不仅特异性强、灵敏度高、简便快捷,而且准确率高,实际应用性强,适用于水中肠道食源性病毒的快速检测。
- 郭旋李君文王新为何丽邱志刚谌志强陈照立金敏
- 关键词：诺如病毒轮状病毒腺病毒
- 量子点标记的基因芯片在食源性致病细菌检测中的应用被引量：4
- 2013年
- 目的基于链霉亲和素修饰的CdSe/ZnS量子点标记的基因芯片技术,建立快速、准确、高通量的检测食源性致病细菌的方法。方法以16s rDNA为靶基因,针对待检的食源性致病细菌合成一系列寡核苷酸探针,制成寡核苷酸芯片,生物素化标记的PCR产物与芯片杂交,然后用链霉亲和素修饰的CdSe/ZnS量子点进行标记,应用激光共聚焦扫描仪进行信号的检测。对量子点标记的基因芯片技术平台的特异性、敏感性和重复性进行评估。结果链霉亲和素修饰的CdSe/ZnS量子点标记的基因芯片可有效区分常见致病细菌,检测灵敏度为10 cfu/ml,变异系数<10%。结论链霉亲和素修饰的CdSe/ZnS量子点标记的基因芯片可对致病细菌进行快速检测鉴定,其敏感性和重复性良好。
- 黄爱华邱志刚金敏陈照立谌志强王新为李君文
- 关键词：量子点
- 城市供水生物污染及其生物因素被引量：4
- 2012年
- 城市供水生物污染事件在全球范围内不仅发生频率高,而且由于能导致肠道传染病或其他疾病的暴发流行,对人民的生命安全和社会的安定团结具有一定的威胁。介绍了城市供水生物污染现状和我国城市供水水质,探讨了造成生物污染的主要生物因素,并提出我国应高度重视城市供水生物安全及其污染事件并建立强大的水源性疾病和城市供水系统生物学监测系统,掌握我国的水源性疾病流行病学特点和城市供水生物污染特点,为今后我国城市供水系统生物污染的快速检测和处置奠定基础。
- 金敏李君文
- 关键词：生物污染城市供水
- 水体中病毒的三种浓缩方法及其效果比较被引量：2
- 2011年
- 目的比较水体中病毒的三种浓缩方法,评价各方法的浓缩效果,为水体中病毒浓缩方法的选择提供依据。方法将不同浓度的指示病毒(脊髓灰质炎病毒1型PV1)加入经高压灭菌处理后的污水处理厂二级出水中,采用钙离子法、牛肉汤洗膜法和载阳电荷滤料法对水样分别进行浓缩,采用逆转录-PCR技术检测灵敏度,观察指示病毒的某一特征基因片段PCR结果来确定各方法的浓缩效果,并测定回收率。结果钙离子法和载阳电荷滤料法对含最低病毒滴度的水样浓缩后均能检测出特定基因片段,钙离子法的回收率为(91.18±1.77)%,牛肉汤洗膜法的回收率为(85.49±5.59)%,滤料法的回收率为(68.63±2.45)%。结论三种方法均能浓缩水样中较低浓度的肠道病毒,钙离子法回收病毒效果最佳,牛肉汤洗膜法其次,载阳电荷滤料法回收率最低。
- 徐露李金娟欧阳雅博金敏谌志强邱志刚王景峰陈照立王新为李君文
- 关键词：RT-PCR技术肠道病毒二级出水
- 水中肠道病毒三种富集方法的效果比较被引量：1
- 2013年
- 目的探讨一种效果较好的水中病毒富集方法,为水中病毒的检测提供依据。方法向高压灭菌处理的水样中接种已知滴度的脊髓灰质炎Ⅰ型病毒,采用载阳电荷滤料法、膜吸附-洗脱法Ⅰ、膜吸附-洗脱法Ⅱ对水样分别进行病毒富集后,利用荧光定量RT-PCR技术检测并计算回收率。结果当水中病毒载量为7×102～7×105pfu/L时,载阳电荷滤料法的病毒回收率为92%～94%;2种膜吸附-洗脱法的回收率为72%～77%。结论载阳电荷滤料法富集水中病毒的效果好于2种膜吸附-洗脱法。
- 何丽王新为王永广陈照立邱志刚谌志强金敏
- 关键词：肠道病毒实时荧光定量PCR
- 水中致病菌浓集回收方法优化及检测
- 2013年
- 公众健康和环境安全需要安全的饮用水，要求饮用水中必须不含有致病菌。而且生态毒理学研究、维护公共健康以及预防生物恐怖袭击都对水源性病原体的监／检测技术提出了更高要求。为保证公共饮水安全，水处理设施的源水和出水都需要对细菌进行监测。水环境中的致病菌含量一般都非常低，需要将细菌的浓集技术与灵敏检测技术联合起来应用，才能实现对低浓度致病菌含量水样的快速定量检测。
- 邱志刚金敏于连媛王新为王景峰谌志强陈照立张斌李君文
- 关键词：细菌灵敏度
