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佐剂性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞的体外培养与鉴定被引量：11: 2007年; 目的:建立佐剂性关节炎(AA)大鼠成纤维样滑膜细胞(FLS)的体外培养及鉴定方法,为进一步的实验研究奠定基础。方法:制备AA大鼠模型,用组织块培养法培养AA大鼠滑膜细胞,并通过形态学和流式细胞仪(FCM)进行鉴定。结果:培养的滑膜细胞具有成纤维细胞的形态和特征,呈长梭形极向生长,FCM检测VCAM-1表达率94%以上。结论:成功地培养出了AA大鼠滑膜细胞,可作为进一步实验研究的靶细胞。; 张晓明陈飞虎黄学应夏丽娟刘永靖; 关键词：类风湿性关节炎滑膜细胞体外培养

重组人内抑素对佐剂性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞周期和PCNA表达的影响被引量：4: 2009年; 目的观察重组人内抑素(rhEndostatin)对佐剂性关节炎(AA)大鼠成纤维样滑膜细胞(FLS)细胞周期及增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响,探讨rhEndostatin抑制AAFLS增殖的分子机制。方法制备AA大鼠模型,应用流式细胞仪分析rhEndostatin对AA FLS细胞周期的影响;分别采用实时荧光定量PCR和Western blot方法,定量分析rhEn-dostatin对AA大鼠滑膜组织PCNA mRNA及蛋白表达的影响。结果与正常组相比,AA FLS G1期细胞减少(P<0.01),S期和G2/M期细胞增加(P<0.01);AA大鼠滑膜组织PCNA mRNA和蛋白表达增加(P<0.05,P<0.01)。与AA模型组相比,rhEndostatin治疗组细胞G1期比例增加(P<0.01),S期和G2/M期细胞比例减少(P<0.01);滑膜组织PCNA mRNA和蛋白表达减少(P<0.01)。结论rhEn-dostatin可引起AA FLS细胞周期G1期阻滞,该作用可能与其抑制AA FLS PCNA表达有关。; 黄学应陈飞虎张晓明刘永靖袁凤来; 关键词：内抑素佐剂性关节炎成纤维样滑膜细胞

重组人内抑素对佐剂性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞内钙离子稳态的影响: 2009年; 目的观察重组人内抑素（rhEndostatin）对佐剂性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞（AAFLSs）内钙离子（Ca2＋）稳态的影响，探讨rhEndostatin促进AAFLSs凋亡的离子机制，为RA药物治疗及寻找其治疗新靶点提供实验依据。方法雄性sD大鼠12只，体质量140～160g，分为正常组（n=3）和AA模型组（n=9）。模型组大鼠制备AA模型，体外培养AAFLSs，应用Ca2＋荧光指示剂Fluo-3／AM孵育培养的细胞，激光扫描共焦显微镜检测有、无细胞外Ca2＋，而rhEndostatin作用所致AAFLSs胞内Ca2＋荧光强度发生动态变化，可以判断rhEndostatin对AAFLSs胞内Ca2＋浓度（[Ca2＋]i）的影响。结果在胞外有Ca2＋的情况下，rhEndostatin可引起静态AAFLS[Ca2＋]i快速增加，rhEndostatin作用10s后，[Ca2＋]i急剧增加达峰值，继之随时间缓慢下降，停止加药50s后，[Ca2＋]i尚未回复到加药前基础水平；而在无细胞外钙环境中，rhEndostatin未引起AAFLSs[Ca2＋]i变化。结论rhEndostatin可促进AAFLSs胞外Ca2＋内流，引起胞内Ca2＋超载，从而促进AAFLSs凋亡。; 黄学应陈飞虎张晓明刘永靖; 关键词：内抑素类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞钙离子

内抑素抗血管生成及抗类风湿性关节炎治疗被引量：9: 2009年; 血管生成是类风湿性关节炎(RA)早期滑膜病理改变特征之一,也是产生和维持RA血管翳的主要因素。内抑素可特异性抑制新生血管内皮细胞增殖、迁移、诱导其凋亡而发挥抗血管生成作用,应用内抑素抑制滑膜新生血管生成可成为治疗RA的一种全新方法。内抑素还可通过抑制成纤维样滑膜细胞增殖,促进其凋亡发挥抗RA效应。; 黄学应陈飞虎张晓明刘永靖; 关键词：类风湿性关节炎血管生成内抑素血管内皮生长因子

重组人内抑素对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织凋亡相关基因表达的影响被引量：7: 2007年; 目的:观察重组人内抑素(rh-end)对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织p53、fas和bcl-2基因表达的影响。方法:采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法,定量检测该药对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织p53、fas和bcl-2 mRNA表达的影响。结果:与模型组相比,rh-end治疗组大鼠滑膜组织fas和bcl-2 mR- NA表达水平增加,p53 mRNA表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:rh-end可经fas介导诱导佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞凋亡,且不依赖于p53,不能被bcl-2所抑制。; 黄学应陈飞虎刘永靖张晓明袁凤来; 关键词：重组人内抑素佐剂性关节炎滑膜细胞凋亡相关基因

重组人内抑素对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织p21c、yclin D1及CDK4表达的影响: 2009年; 目的观察重组人内抑素（rhEndostatin）对佐剂性关节炎（AA）大鼠滑膜组织p21,细胞周期素D1（cyclin D1）及细胞周期素依赖性激酶4（CDK4）基因表达的影响,探讨rhEndostatin抑制AA大鼠成纤维样滑膜细胞（FLS）增殖的分子机制。方法雄性SD大鼠36只,随机分为正常组（n=12）、AA模型组（n=12）和rhEndostatin（2.5mg/kg）治疗组（n=12）。制备AA大鼠模型,分别采用实时荧光定量PCR和Western blotting方法,定量分析rhEndostatin对AA大鼠滑膜组织p21、cyclin D1、CDK4 mRNA及cyclin D1蛋白表达的影响。结果rhEndostatin治疗组大鼠滑膜组织p21、cyclin D1 mRNA和cyclin D1蛋白表达水平降低,CDK4 mRNA表达水平增加,与AA模型组比较,差异均有统计学意义（P〈0.01）。结论rhEndostatin降低AA大鼠滑膜组织cyclin D1表达水平可能是其抑制AA FLS增殖的分子机制之一。; 黄学应陈飞虎张晓明刘永靖袁凤来; 关键词：内抑素佐剂性关节炎 CDK4

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安徽省博士后基金资助项目(07-08)