湖南省自然科学基金(10JJ5027)
- 作品数：11 被引量：65H指数：4
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- 2010年湘雅医院细菌耐药性监测被引量：3
- 2012年
- 目的了解2010年1月1日～12月31日中南大学湘雅医院临床常见分离病原菌的分布及耐药性。方法采用Vitek 2对临床常见分离病原菌进行鉴定及药敏试验,按CLSI 2010版标准判断结果。用WHONET5.4软件对实验结果进行分析。结果 2010年临床分离的5 011株病原菌中,革兰阳性菌为1 417株,占28.3%,革兰阴性菌为2 684株,占53.6%,真菌910株,占18.2%。金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌中耐甲氧西林菌株的分离率分别为60.4%(142/235)和55.6%(262/471)。未出现对万古霉素、利奈唑胺和替考拉宁耐药的葡萄球菌,分离到3株对万古霉素耐药的屎肠球菌。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs的检出率分别为77.6%(470/606)和58.4%(211/361),肠杆菌科细菌对头孢哌酮/舒巴坦和碳青霉烯类仍具有较高的敏感性,耐药率分别为0.9%～15.8%和0.5%～10.1%。铜绿假单胞菌对亚胺培南和美洛培南的耐药率分别为15.8%和17.3%,鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美洛培南的耐药率分别为49.4%和29.7%。发现几株泛耐药菌株,其中铜绿假单胞菌3株,不动杆菌属3株。结论该院临床分离病原菌耐药状况较为严重,应加强细菌耐药监测,密切关注其耐药性变迁,为临床经验用药提供实验依据。
- 邹明祥李军邬靖敏梁伟张宁洁李虹玲刘文恩
- 关键词：细菌耐药性抗菌药物药敏试验泛耐药菌
- 湘雅医院细菌耐药性监测被引量：17
- 2011年
- 目的了解中南大学湘雅医院2009年临床常见分离菌的分布及耐药性。方法采用Vitek 2全自动微生物鉴定分析系统对临床分离菌株进行鉴定及药敏试验,WHONET 5.4统计软件对数据进行分析。结果 7 841株临床分离菌株中,革兰阳性菌占28.5%(2 237/7 841),革兰阴性菌占55.7%(4 369/7 841),真菌占15.8%(1 235/7 841)。革兰阳性球菌居前五位的分别为凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、屎肠球菌和血液链球菌。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率分别为63.7%和67.2%,未发现万古霉素耐药或中介的葡萄球菌,但分离到万古霉素耐药肠球菌(VRE)7株。革兰阴性杆菌中分离率居前五位的依次为铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌。肠杆菌科细菌中,大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌对碳青霉烯类抗生素的耐药率最低(<2.3%),大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦的耐药率<13.0%,而阴沟肠杆菌对哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦的耐药率分别达40.0%和28.4%。非发酵菌中,铜绿假单胞菌对美洛培南、头孢哌酮/舒巴坦的耐药率较低,分别为9.1%和12.4%;鲍曼不动杆菌对头孢哌酮/舒巴坦、左氟沙星及氨苄西林/舒巴坦耐药率较低,分别为7.0%、7.6%和16.3%,对美洛培南耐药率达28.8%;对其他抗菌药物耐药率均超过40%。结论该院常见病原菌以革兰阴性杆菌为主;病原菌对多种临床常用抗菌药物耐药,尤其是对万古霉素耐药肠球菌的出现及对碳青霉烯类耐药非发酵菌的增加,应引起临床高度重视,及时采取有效措施,控制耐药菌在医院内播散和暴发流行。
- 邹明祥邬靖敏李军梁伟李虹玲刘文恩廖经忠
- 关键词：耐药性监测抗菌药物药敏试验多重耐药菌
- 2011年湘雅医院临床分离病原菌分布及耐药性分析被引量：16
- 2012年
- 目的了解2011年中南大学湘雅医院临床常见分离菌的分布及耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法采用全自动微生物鉴定系统Vitek-2对临床分离病原菌进行鉴定及药敏试验,用WHONET5.4软件对实验结果进行分析。结果 2011年湘雅医院共分离菌株7 272株,其中革兰阳性菌2 85株,占28.67%;革兰阴性菌4 109株,占56.51%;真菌1 078株,占14.82%。葡萄菌属中耐甲氧西林金黄葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRSCN)的检出率分别为51.37%和68.16%,未检出对万古霉素、替考拉宁及利奈唑胺耐药株;屎肠球菌和粪肠球菌对万古霉素的耐药率分别均为3.91%和3.83%;大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的检出率分别为78.30%和63.10%,肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗菌药物仍高度敏感(耐药率<6.00%),首次监测到泛耐药肠杆菌科细菌;与2010年相比,铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌中泛耐药株数显著增加。结论临床分离病原菌以革兰阴性杆菌为主;分离菌株耐药性十分严重;泛耐药肠杆菌科细菌的出现及泛耐药非发酵革兰阴性杆菌的增加,应引起临床高度重视,并及时采取防控措施。
- 晏群李军李虹玲邬靖敏邹明祥刘文恩
- 关键词：药敏试验耐药监测多重耐药菌泛耐药菌
- 金黄色葡萄球菌甲氧西林耐药辅助基因femB的克隆和原核表达被引量：1
- 2012年
- 金黄色葡萄球菌femB基因与甲氧西林高水平耐药密切相关,可能成为开发抗MRSA药物的新靶位.以金葡菌基因组DNA为模板,PCR扩增femB全长基因,所得片段与pGM-T载体连接并转化感受态大肠杆菌DH5α,阳性克隆以PCR、双酶切及测序鉴定.将鉴定正确的目的片段定向克隆到pGEX-4T-1表达载体中,转化至大肠杆菌BL21后经IPTG诱导表达GST/FemB融合蛋白;采用SDS-PAGE及Western blot对融合蛋白进行鉴定.结果显示,重组质粒在宿主菌中获得了高效表达,融合蛋白相对分子质量为75 kD,该融合蛋白可与抗GST-tag抗体特异结合;表明femB基因的原核表达系统构建成功,为进一步研究其生物学功能奠定了基础.
- 邹明祥武文君李军邬国军张宁洁刘文恩范学工
- 关键词：金黄色葡萄球菌基因克隆融合蛋白
- 6种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌方法的应用评价被引量：1
- 2012年
- 目的对6种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测方法进行应用评价。方法分别采用6种方法检测134株临床分离的金黄色葡萄球菌耐甲氧西林的情况:聚合酶链反应(PCR)检测mecA基因、苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁纸片扩散法、琼脂稀释法检测苯唑西林最小抑菌浓度、琼脂稀释法检测头孢西丁最小抑菌浓度、显色培养基法。结果以PCR检测mecA基因为"金标准",65.7%的金黄色葡萄球菌耐甲氧西林;苯唑西林纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的敏感性和特异性分别为95.5%和97.8%;头孢西丁纸片扩散法敏感性和特异性分别为97.7%和97.8%;苯唑西林和头孢西丁琼脂稀释法敏感性均为100%,特异性分别为97.8%和91.3%;显色培养基法敏感性和特异性分别为98.9%和97.8%。结论 6种检测方法具有较好的一致性。头孢西丁纸片扩散法简便、可靠,可作为临床实验室常规检测MRSA的方法。
- 晏群邬靖敏李军张宁洁刘文恩邹明祥
- 关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性MECA基因苯唑西林头孢西丁
- 长沙地区临床分离金黄色葡萄球菌的耐药监测被引量：4
- 2012年
- 目的了解长沙地区临床分离金黄色葡萄球菌(以下简称金葡菌)对常用抗菌药物的耐药现状,探讨金黄色葡萄球菌对甲氧西林的耐药水平。方法收集长沙地区11家医院2009年11月至2010年11月临床分离的非重复金葡菌279株,应用Vitek-2全自动微生物分析系统进行鉴定,K-B法检测金葡菌对24种药物的敏感性,产色头孢菌素试验检测β-内酰胺酶以及D试验检测诱导型克林霉素耐药。应用头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法筛查耐甲氧西林的金葡菌(MRSA),琼脂稀释法检测头孢西丁和苯唑西林的最低抑菌浓度(MIC)。结果在被检测的24种药物中,敏感率>50%的药物为9种,未发现对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药菌株;耐药率>50%的抗菌药物有11种,其中以青霉素和氨苄西林的耐药率最高(均为97.1%)。MRSA的分离率达54.5%,且对常用的16种抗菌药物的耐药率均显著高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)。279株金葡菌中,β-内酰胺酶阳性250株(89.6%);红霉素耐药而克林霉素敏感或中介的30株中,D试验阳性22株(73.3%)。苯唑西林(OXA)和头孢西丁(FOX)MIC范围分别为0.125～>256μg/mL和2～>256μg/mL,苯唑西林的MIC50和MIC90分别为128μg/mL和256μg/mL,头孢西丁的MIC50和MIC90分别为64μg/mL和256μg/mL。结论长沙地区临床分离金葡菌对常用抗菌药物呈多重耐药;MRSA不仅分离率高,而且对甲氧西林呈高水平耐药。
- 邹明祥武文君邬靖敏李军张宁洁刘文恩范学工
- 关键词：金黄色葡萄球菌耐药性药敏试验
- His-FemA融合蛋白表达载体的构建及其在原核细胞中的表达被引量：1
- 2012年
- 目的构建His标签的金黄色葡萄球菌甲氧西林耐药相关蛋白FemA的融合蛋白表达载体,并在大肠埃希菌中表达,为进一步研究femA基因的生物学功能和临床应用奠定基础。方法根据GenBank中金黄色葡萄球菌femA基因序列,利用Primer Premier 5.0设计PCR引物,并在引物的5'加入BamHI及SalI酶切位点;以金黄色葡萄球菌基因组DNA为模版,PCR扩增出femA基因片段。将目的 DNA片段及质粒pQE30分别进行双酶切、连接并转化大肠埃希菌DH5α;阳性克隆以PCR、双酶切及测序进行鉴定。将鉴定正确的pQE30-femA重组质粒转化大肠埃希菌JM109,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达His-femA融合蛋白;采用SDS-PAGE及Western blot分析对表达蛋白进行验证。结果经PCR、双酶切鉴定及序列测定,证实重组质粒pQE30-femA构建成功;重组质粒pQE30-femA转化大肠埃希菌JM109经IPTG诱导后,SDS-PAGE和Western blot分析显示表达出53 kD目的蛋白;经Bandscan软件分析,目的蛋白质在4 h的表达量占细胞总蛋白的27.5%。结论成功构建了His-FemA原核表达载体(pQE30-femA),并在大肠埃希菌中高效表达。
- 邹明祥李军邬国军武文君张宁洁刘文恩范学工
- 关键词：FEMA基因融合蛋白
- 2006～2010年长沙地区临床分离金黄葡萄球菌耐药性监测被引量：2
- 2013年
- 目的了解长沙地区2006～2010年临床分离金黄葡萄球菌的耐药特征,为临床合理应用抗菌药物提供依据。方法收集长沙地区11家综合医院2006～2010年临床分离非重复金葡菌572株;纸片扩散法检测金葡菌对23种抗菌药物的敏感性,产色头孢菌素试验检测β-内酰胺酶,双纸片扩散法(D试验)检测诱导型克林霉素耐药;苯唑西林、头孢西丁纸片扩散法筛查耐甲氧西林金葡菌(MRSA);琼脂稀释法检测苯唑西林、头孢西丁和万古霉素的最低抑菌浓度(MIC)。结果长沙地区11家医院门诊及住院病人分离的金黄葡萄球菌572株;在被检测的23种药物中,耐药率大于50%的达13种,其中,青霉素和氨苄西林耐药率最高,均为96.85%;敏感率高于50%的有10种,以替考拉宁、万古霉素和利奈唑胺的敏感率最高,均为100%。91.43%的金葡菌产β-内酰胺酶,59.79%的金葡菌表现为甲氧西林耐药。红霉素耐药而克林霉素敏感的58株金葡菌中有48为诱导型克林霉素耐药。苯唑西林、头孢西丁和万古霉素对金葡菌的MIC范围分别为0.125μg/ml～>256μg/ml、2μg/ml～>256μg/ml和1μg/ml～2μg/ml。结论长沙地区临床分离金葡菌多重耐药严重,对甲氧西林呈高水平耐药。临床应加强金葡菌耐药性监测,合理选用抗菌药物。
- 晏群豆清娅武文君李军刘文恩邹明祥
- 关键词：金黄葡萄球菌药敏试验耐药性
- 检测金黄色葡萄球菌诱导型克林霉素耐药的两种方法比较被引量：5
- 2011年
- 目的了解临床分离金葡菌的耐药性及诱导型克林霉素耐药的发生率,评价微量肉汤稀释法检测诱导型克林霉素耐药的临床应用价值。方法 VITEK-2微生物分析系统及K-B法药敏试验对临床分离菌株进行鉴定和药物敏感性测定;红霉素和克林霉素双纸片扩散法和微量肉汤稀释法检测诱导型克林霉素耐药,并比较检测结果。结果受试的23种抗菌药物中,耐药率大于50.0%的药物品种达14种。其中,对青霉素和氨苄西林的耐药率最高,均为97.0%;其次对红霉素和四环素的耐药率分别为71.7%和68.7%;对替考拉宁、万古霉素和利奈唑胺的敏感率最高,均为100%;其次对呋喃妥因、氯霉素和磺胺甲口恶唑-甲氧苄啶的敏感率分别为95.0%、93.9%和88.9%。MRSA和MSSA各为63株(63.6%)和36株(36.4%)。对红霉素耐药和克林霉素敏感的菌株共10株,且D试验均为阳性,占所有菌株的10.1%。所有D试验阳性菌株微量肉汤稀释法也均为阳性,两者符合率为100%。结论临床分离金葡菌多重耐药现象十分严重。D试验和微量肉汤稀释法均可用于检测金葡菌诱导型克林霉素耐药。
- 邹明祥武文君曾娇辉梁伟邬靖敏刘文恩范学工
- 关键词：金黄色葡萄球菌耐药性D试验微量肉汤稀释法诱导型耐药
- 无菌部位金黄色葡萄球菌耐药性及分子流行病学特征被引量：4
- 2013年
- 目的:了解无菌部位分离的金黄色葡萄球菌对常用抗菌药物的耐药性及分子流行病学特征,为临床预防和控制其感染以及合理使用抗菌药物提供实验依据。方法:收集2011年8月至2012年6月某三甲医院无菌部位分离的非重复金黄色葡萄球菌50株。VITEK-2微生物分析系统进行菌株鉴定,PCR检测耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)杀白细胞毒素(PVL)基因,多重PCR对MRSA进行SCCmec基因分型。结果:在18种抗菌药物中,青霉素和红霉素的耐药率最高,分别为90.0%和62.0%;尚无对万古霉素、替加环素、替考拉宁、利奈唑胺、达托霉素的耐药菌株。50株金葡菌中,MRSA 15株(30.0%),MSSA35株(70.0%),MRSA对12种抗菌药物的敏感率明显低于MSSA。15株MRSA中,SCCmecⅢ型11株(73.3%),SCCmecⅣ型4株(26.7%),PVL基因扩增均为阴性。结论:该院无菌部位分离的金黄色葡萄球菌以MSSA为主;MRSA对抗菌药物呈多重耐药性,且以SCCmecⅢ型为主。
- 袁鲲邬靖敏豆清娅李军邹明祥
- 关键词：金黄色葡萄球菌耐药性分子流行病学
