国家自然科学基金(30270889)
- 作品数：12 被引量：104H指数：7
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- 相关机构：南京农业大学中国科学技术大学更多>>
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- 抗Bt棉棉铃虫幼虫Bt受体氨肽酶N(APN2)基因克隆被引量：15
- 2004年
- 通过对Bt棉抗性和敏感棉铃虫幼虫中肠氨肽酶N的克隆和测序 ,鉴定了氨肽酶N基因家族的 1个成员Haapn2 ,其cDNA序列具有 32 0 9个核苷酸 ,含有 30 96bp的开放阅读框 ,编码产生1 0 32个氨基酸的蛋白质。其推定氨基酸序列具有锌结合模体HEXXHX18E ,N 末端具有 1 7个氨基酸的疏水性信号序列 ,C 末端还具有 2 2个氨基酸的糖基磷酯酰肌醇 (GPI)添加信号肽。比对抗性和敏感棉铃虫cDNA的开放阅读框 ,抗性品系的开放阅读框中 ,有 5 7个点突变 ,共导致了 1 5个氨基酸的改变 ,其中 2个突变 (谷氨酰胺13 7→谷氨酸、缬氨酸173 →苏氨酸 )位于Cry1A毒素结合区域 ,可能与棉铃虫对转Bt基因棉产生抗性有关。报道的氨肽酶cDNA序列已提交GenBank ,AY346383和AY2 795 35分别是Bt抗性和敏感品系的Haapn2。
- 苏建亚周晓梅沈晋良
- 关键词：抗B开放阅读框氨肽酶NAPN棉铃虫BT棉幼虫
- 棉铃虫对转Bt棉抗性遗传的AFLP连锁图谱分析被引量：1
- 2008年
- 利用AFLP分子标记方法，对抗Bt棉棉铃虫（Helicoverpa armigera）抗性品系和敏感品系回交BC1代（F1（YCR♀×YCS♂）♀×YCR♂）群体进行连锁图谱的构建。经23组AFLP引物的选择性扩增，共得到406个多态位点，√检验后有217个为有效位点。利用Mapmaker／Exp（Version3．0b）软件进行连锁分析，其中126个标记分属35个连锁群，连锁群标记数变化范围为2～11个，平均每个连锁群标记数为3．6个，该图覆盖的基因组长度为1138．4cM（图距单位），连锁群长度变化范围为4．0～166．1cM，连锁群的平均长度为32．53cM。连锁图谱的构建为棉铃虫对抗Bt棉抗性基因的定位奠定了基础。
- 杨杨王怀银沈晋良
- 关键词：棉铃虫AFLP
- F_1代法监测田间棉铃虫对转Bt基因棉的抗性被引量：15
- 2008年
- 采用表达单价Cry1Ac毒素的转Bt基因棉棉叶喂饲法比较了棉铃虫Helicoverpa armigera(Hbner)抗、感亲本及正反交后代在Bt棉上5d的发育速率,确定棉铃虫在Bt棉上5d发育到2龄中期以上、体重≥0.6mg的个体作为判别抗性纯合子的标准。2006年采用F1代法在室内用Bt棉叶喂饲法检测河北省邱县Bt棉田棉铃虫对Bt棉的抗性等位基因频率。结果表明,127头田间雄虫中24头携带抗性基因,估测抗性等位基因频率为0.94(95%CI:0.044～0.145),该值为在国内首次检测到的高抗性等位基因频率。该地区长期大面积种植转单价Bt棉和缺少非Bt棉作为有效庇护区导致田间抗性快速进化,需要尽快采取有效的抗性治理策略。本文还讨论了影响大田产生抗性的因素以及田间存在的抗性风险等。
- 刘凤沂朱玉成沈晋良
- 关键词：转BT基因棉棉铃虫抗性监测
- 抗转Bt基因棉棉铃虫幼虫中肠氨肽酶N基因的克隆与序列特征被引量：8
- 2004年
- 通过对抗性和敏感棉铃虫中肠氨肽酶的克隆和测序,鉴定了氨肽酶基因家族的2个成员:Haapn3和Haapn4,其cDNA序列具有3053和2862个核苷酸,分别具有3045和2853bp的开放阅读框,编码产生1014和951个氨基酸的蛋白质。其推定氨基酸序列均具有锌结合模体HEXXH和所有锌依赖氨肽酶共有的序列GAMEN。N 末端分别具有18和20个氨基酸的疏水性信号肽,C 末端均具有21个氨基酸的GPI添加信号肽。比对抗性和敏感棉铃虫cDNA的开放阅读框,在Haapn3的开放阅读框中,抗性品系的cDNA具有25个核苷酸的不同,其中9个碱基替代造成氨基酸的变化:苏氨酸189→天冬酰胺、甘氨酸229→天冬氨酸、赖氨酸231→精氨酸、谷氨酸250→丙氨酸、异亮氨酸275→缬氨酸、天冬酰胺281→天冬氨酸、酪氨酸302→组氨酸、缬氨酸648→异亮氨酸、脯氨酸975→谷氨酰胺,其它16个碱基替代为无义突变。在Haapn4的开放阅读框中,有15个点突变,其中8个突变为无义突变,其它7个导致了氨基酸的改变,即赖氨酸4→天冬酰胺、组氨酸162→酪氨酸、脯氨酸185→丝氨酸、谷氨酸297→甘氨酸、苯丙氨酸385→丝氨酸、甲硫氨酸450→异亮氨酸、缬氨酸630→异亮氨酸。本文报道的氨肽酶4个cDNA序列已提交GenBank,AY279536和AY279537分别是抗性和敏感品系的Haapn3。
- 苏建亚周晓梅张天翼沈晋良
- 关键词：棉铃虫幼虫氨肽酶N基因
- 棉铃虫对转Cry1Ac基因棉的抗性遗传及AFLP标记研究被引量：14
- 2005年
- 抗性遗传分析结果表明,转Cry1Ac基因棉选育抗性棉铃虫(Helicoverpa armigera(Hübner))对Bt毒素Cry1Ac的抗性遗传方式为不完全隐性,其回交后代(BC)用40μg.ml-1Cry1Ac的饲料饲喂5 d后,存活虫数∶死亡虫数的比例为1∶1(X2
- 周晓梅沈晋良
- 关键词：棉铃虫抗性遗传AFLP分子标记
- 转基因棉对高抗Bt棉棉铃虫生长发育及活动频率的影响被引量：5
- 2004年
- 以敏感品系棉铃虫在苏棉12和玉米上的生长发育及活动频率为对照,研究了新棉33B对高抗Bt棉棉铃虫生长发育及活动频率的影响。结果表明,高抗品系棉铃虫在转基因棉中后期主茎顶部嫩叶、侧枝嫩芽及嫩叶、蕾、铃上完成幼虫和蛹期的发育时间,分别比敏感品系棉铃虫在常规棉上的发育时间长13.4,10.7及7.0d,比敏感品系在玉米上完成发育时间长13.2～20.6d;且取食转Bt基因棉的高抗棉铃虫幼虫死亡率和活动频率高,蛹重减轻,化蛹率和羽化率降低。
- 高聪芬沈晋良钱燕陈进
- 关键词：转基因棉生长发育
- 转双价基因棉对高抗Bt棉棉铃虫的抗虫性被引量：4
- 2004年
- 采用喂饲法 ,测定了转双价基因棉 (中棉 4 1、SGK32 1)、转单价基因棉 (中棉 2 9)及常规棉 (苏棉 12 )对抗性和敏感棉铃虫的抗虫性。结果表明 :转双价基因棉主茎叶片对抗性和敏感棉铃虫初孵幼虫的抗虫性明显高于或稍高于转单价基因棉 ,且随棉花生长发育期的推移抗虫性下降速度较慢 ,如第 8叶后中棉 4 1(ZM4 1)对抗性和敏感初孵幼虫的平均死亡率分别为 80 0 %～ 4 0 0 %和 10 0 %～ 85 6 % ,而中棉 2 9(ZM2 9)分别为 30 0 %～ 15 6 %和 84 0 %～ 71 1%。转单、双价基因棉生长中后期主要受害部位对抗、感棉铃虫的抗性高低次序均为 :嫩蕾、顶部嫩头、侧枝嫩叶 ,其中转双价基因棉嫩蕾对敏感棉铃虫和顶部嫩头对抗性棉铃虫的抗虫性显著高于转单价基因棉。转单、双价基因棉对抗性棉铃虫的抗虫性低于敏感棉铃虫。
- 高聪芬沈晋良须志平陈进
- 关键词：转双价基因棉棉铃虫抗虫性
- 昆虫抗药性与适合度被引量：23
- 2008年
- 昆虫抗药性的产生常伴有适合度劣势(即适合度代价),即抗性个体常表现出发育速率较慢、存活率和生殖力较低。文章主要阐述害虫抗药性与生物适合度和适合度代价的关系以及适合度代价产生的机制、特性及影响因素。并从生态学角度论述害虫抗药性的进化,为探索抗性发展规律及害虫抗性治理提供理论依据。
- 刘凤沂须志平薄仙萍沈晋良
- 关键词：昆虫抗药性适合度
- 棉铃虫幼虫中肠非糖基磷酯酰肌醇锚着氨肽酶N基因的克隆和测序被引量：5
- 2005年
- 通过对棉铃虫Helicoverpaarmigera(H櫣bner)幼虫中肠氨肽酶N的克隆和测序,鉴定了1个氨肽酶N基因APN1,其cDNA序列具有3220个核苷酸,具有3042bp的开放阅读框,编码产生1014个氨基酸的蛋白质。其推定的氨基酸序列具有氨肽酶N所共有的锌结合模体HEXXHX18E和N末端20个氨基酸的疏水性信号序列,但C末端没有糖基磷酯酰肌醇(glycosylphosphatidylinositol,GPI)锚添加信号序列。该氨肽酶N的cDNA序列已提交GenBank,登录号为AY358034。
- 苏建亚沈晋良
- 关键词：棉铃虫氨肽酶N受体
- 两种转Bt基因棉杀虫蛋白Cry1Ac表达量的检测被引量：11
- 2005年
- 用EnvirologixCry1Ab/Cry1Ac平板试剂盒检测了两种转Cry1Ac基因的棉花品系 (NUCOTN33B、NUCOTN99B) 以及常规对照品系 (苏棉 12) 不同生育期主茎嫩叶、侧枝嫩叶、蕾及蕾的苞叶中杀虫蛋白Cry1Ac的含量。结果表明, 两种转Bt基因棉主茎嫩叶杀虫蛋白Cry1Ac的含量随生育期的推移呈明显下降趋势, 花铃期 (NUCOTN33B和NUCOTN99B分别为 4 43和 2 93μg·g-1 ) 和吐絮期 (3 87和 2 86μg·g-1 ) 的含量分别降至苗期第 6叶 (7 64和 8 38μg·g-1 )的 58%、35%和 51%、34%; 相同时期的主茎嫩叶和侧枝嫩叶中Cry1Ac的含量均显著高于蕾及蕾的苞叶, 前两者均为后两者的两倍以上。
- 周晓梅沈晋良高聪芬
- 关键词：转基因棉花
