湖南省自然科学基金(10JJ5006)
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
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- 以葛根素为辣根过氧化物酶底物的新体系及其分析应用被引量：1
- 2012年
- 以一种天然活性成分葛根素(Puerarin)为辣根过氧化物酶(HRP)底物建立了葛根素-辣根过氧化物酶-过氧化氢反应新体系.在反应体系中HRP催化H2O2氧化葛根素(弱荧光)形成二聚体产物(强荧光),该产物在315 nm的激发光下能发射波长为478 nm的强荧光,并且反应体系荧光强度增加与HRP量在一定浓度范围内呈线性相关.根据此关系和竞争型免疫定量原理,以兔布氏杆菌抗体为分析对象建立了基于葛根素的酶联荧光免疫传感分析新方法.对葛根素性质的研究结果证实,葛根素在空气中稳定、对温度稳定,对H2O2+HRP敏感性优于传统底物如对羟基苯乙酸、Amplex Red和高香草酸.优化了酶联荧光免疫传感分析方法的实验条件如HRP-BrAb用量、温度等.运用新体系测定了兔血清样品的布氏杆菌抗体,该方法线性范围为1.3～120 ng/mL,检测限为1.3 ng/mL(3σ),相对标准偏差为3.8%.
- 龚福春刘平林尤宜唐志姣刘剑平
- 关键词：葛根素
- 以荧光高分子为相分离载体和指示物的免疫分析新方法
- 2011年
- 以6-甲氧基-β-(5-乙烯基-2-奎宁环基)-4-喹啉甲醇(奎尼丁,Qd)为单体合成了一种pH敏感荧光高分子聚N-异丙基丙烯酰胺(NIP)-奎尼丁-N,N,-二甲基氨丙基甲基丙烯酰胺(DMAPM)[P(NIP-DMAPM-Qd)]。采用共聚法将布氏杆菌抗原(BrAg)与P(NIP-DMAPM-Qd)连接,制备了P(NIP-DMAPM-Qd)-BrAg连接物。加入待测布氏杆菌抗体(BrAb),免疫反应后,调节至pH7.6,使高分子相变,从而将体系中的免疫反应复合物P(NIP-DMAPM-Qd-BrAg)-BrAb和未反应连接物P(NIP-DMAPM-Qd)-BrAg与非特异性组分以及未反应的待测BrAb分离.利用蛋白A对抗体的亲和性,捕获P(NIP-DMAPM-Qd-BrAg)-BrAb,从而将其与P(NIP-DMAPM-Qd-BrAg)分开,通过测定P(NIP-DMAPM-Qd-BrAg)-BrAb的荧光来定量BrAb。该方法通过高分子相变分离和蛋白A捕获双重分离作用,基本消除了非特异性组分以及未反应的特异性免疫成分等的干扰;以高分子自身荧光为检测信号源,无须另外的标记物,大大提高了免疫分析的灵敏度和简便性。以布氏杆菌抗体(BrAb)为检测对象,测得线性范围为0～168ng/L,抗体检出限为1.2ng/L,结果令人满意。
- 龚福春唐志娇林尤宜曹忠谭淑珍
- 雪莲果低聚果糖提取物的树脂脱色工艺条件优化
- 2011年
- 探讨了D941、D318、DM-2、860021四种树脂对雪莲果中低聚果糖提取液的脱色情况,采用静态吸附法确定了D318树脂脱色效果最佳,优化了脱色工艺,最优脱色工艺条件为:树脂用量为3.4%,pH为5,脱色时间为3 h,脱色温度为50℃,透光率达到90%以上。
- 游懿魏建科蔡安安刘平龚福春
- 关键词：雪莲果低聚果糖脱色透光率
