国家重点基础研究发展计划(2002CB513100-2)
- 作品数：12 被引量：59H指数：5
- 相关作者：龚建平胡俊波罗学来陶德定高霞更多>>
- 相关机构：华中科技大学中国医学科学院北京协和医学院上海中医药大学附属曙光医院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 口腔黏膜细胞凋亡率与患者手术前后营养状况的关系被引量：5
- 2006年
- 目的通过对比一组胃肠道手术患者手术前、后口腔黏膜细胞凋亡率和一系列传统的营养状况评价指标的动态变化,探讨口腔黏膜细胞凋亡率与人营养状况的相关性。方法连续观察一组经胃肠道手术患者。手术前至手术后一段时间内连续检测患者口腔黏膜细胞凋亡率,同时在术前、术后第3、7天测定总淋巴细胞计数、前白蛋白、视黄醇结合蛋白、转铁蛋白、白蛋白。结果术后首先观察到口腔黏膜细胞凋亡率显著下降(P＜0．01),约在术后7 d后口腔黏膜凋亡率逐渐上升(P＜0．01),这变化同我们测量的各营养指标的变化是基本一致的。结果证明口腔黏膜细胞凋亡率同淋巴细胞计数、转铁蛋白、前白蛋白等传统的营养指标具有显著相关性(P＜0．05)。结论口腔黏膜细胞凋亡率随着机体营养状况的改变而变化。口腔黏膜细胞凋亡率有可能成为一个新的评价,监测甚至预测机体营养状况的评价指标。
- 周毅罗学来杨传永吴在德裘法祖龚建平
- 关键词：口腔黏膜细胞脱噬作用营养
- 绿色荧光蛋白细胞的保存及细胞周期分析被引量：4
- 2007年
- 目的探讨在绿色荧光蛋白（GFP）质粒转染后的细胞中，既能最大限度地保存GFP阳性细胞又有利于细胞周期分析的固定方法。方法以胃癌MKN-28和乳腺癌MCF-7细胞为模型，脂质体Lipofectamine2000转染细胞，转染后的细胞分别用：①80％乙醇固定；②0．1％、0．25％、0．5％和1．0％的多聚甲醛固定；③0．1％、0．25％、0．5％、1．0％多聚甲醛4℃固定30min后再用80％乙醇固定等3种方法固定细胞，然后用含0．1％triton的PI染色，在流式细胞仪上检测GFP的自发绿色荧光及行细胞周期分析。结果单纯乙醇固定的细胞中GFP均消失。单纯0．25％～1．0％的多聚甲醛固定后的细胞不能得到有效的DNA直方图，单纯0．1％的甲醛固定的细胞虽可得到良好的直方图，但PI染液中的triton破坏了大部分的GFP。先甲醛再乙醇固定的细胞中，0．5％～1．0％的甲醛可较好地防止乙醇和triton对绿色荧光蛋白的破坏作用，保留下2／3的GFP阳性细胞，0．5％的甲醛固定的细胞可得到CV值〈8％的G0／G1期峰，而1．0％甲醛固定后的细胞CV值〉8％。结论在GFP质粒转染后的细胞中，先用0．5％的多聚甲醛固定细胞30min后再用乙醇固定，既能最大限度地保存GFP，又可得到CV值良好的DNA直方图。若不考虑保留GFP，或普通细胞作细胞周期分析时，单纯0．1％的多聚甲醛固定细胞，即可得到与传统的单纯乙醇固定细胞相似的CV值很小的DNA直方图。
- 刘双又李小兰肖薇陶德定罗学来高霞胡俊波龚建平
- 关键词：绿色荧光蛋白流式细胞术细胞周期多聚甲醛
- 乳腺癌休眠动物模型的建立被引量：2
- 2007年
- 目的模拟乳腺癌患者术后体内有少量肿瘤细胞存在,但长期无症状,也无特殊体征的特点而建立小鼠乳腺癌休眠模型并确定休眠细胞的存在。方法采用500个小鼠乳腺癌 Ca761-03细胞肌肉接种于30只615小鼠,以小鼠2个月(相当人5年)不成瘤为休眠标准,按休眠观察组、休眠验证组和复发验证组三组(各10只小鼠)连续观察肿瘤休眠发生情况。肿瘤细胞休眠的确认方法为,采用给予连续外伤刺激,接种部位取材,组织固定和 HE 染色观察肿瘤再生成情况。结果 500个小鼠乳腺癌 Ca761-03细胞肌肉接种于小鼠2个月后,有30%小鼠成瘤,70%处于休眠状态。休眠肿瘤给予连续外伤刺激5个月后,有90%小鼠成瘤。显示乳腺癌肿瘤细胞可以在小鼠体内长期保持休眠状态,在外伤刺激的作用下,休眠的肿瘤细胞可以再次增殖,成为肿瘤复发的根源。结论成功建立了小鼠乳腺癌休眠模型,并用外伤刺激休眠细胞增殖的方法确定了休眠肿瘤细胞在体内的存在。这一动物模型填补了实体瘤休眠动物模型缺乏的空白。
- 苏广彦刘玉琴任乐荣刘险峰顾蓓董继红高进
- 关键词：乳腺肿瘤动物休眠
- Cyclin B1的表达与结直肠癌病理学特征的相关性
- 2007年
- 目的探讨结直肠肿瘤中人类主要细胞周期蛋白Cyclin B1的表达与结直肠肿瘤病理学特征的相关性。方法用流式细胞术双参数标记法及免疫组织化学方法检测66例结直肠肿瘤标本的细胞周期素Cyclin B1表达,分析Cyclin B1的表达高低与结直肠肿瘤细胞分化程度,肿瘤细胞浸润深度以及淋巴结转移的相关性。结果Cyclin B1表达的高低与结直肠肿瘤的细胞分化程度相关(P<0.05),而细胞浸润深度,以及淋巴结转移无相关性(P>0.05)。结论Cyclin B1高表达的结直肠肿瘤中细胞明显高分化,随着Cyclin B1表达变化至Cyclin B1低无表达时,结直肠肿瘤中细胞呈明显低分化趋势。
- 龙浩成高霞许三鹏何小军夏耘胡俊波龚建平
- 关键词：CYCLINB1结直肠肿瘤流式细胞术
- 不同营养状态下大鼠口腔与肠道黏膜细胞凋亡率的关系研究被引量：3
- 2012年
- 目的通过研究手术前后不同营养状态下大鼠口腔与肠道黏膜细胞凋亡率,探讨两者间的相关性。方法雄性SD大鼠(250±20g)60只,随机分为术前组、手术组并建立胃大部切除模型。用亚G1峰法检测大鼠口腔与肠道黏膜细胞凋亡率,方差分析和相关性分析手术前后不同营养状态下,口腔与肠道黏膜细胞凋亡率的相关性。结果术后可观察到口腔及肠道黏膜细胞凋亡率均有显著下降(P<0.05),均约在术后7d后凋亡率逐渐上升(P<0.05),这变化同我们测量的营养指标的变化是基本一致的。结果证明口腔及肠道黏膜细胞凋亡率具有显著相关性(P<0.05)。结论通过对口腔及肠道黏膜细胞凋亡率及传统的营养状况评价指标的观察,发现口腔及肠道黏膜细胞凋亡率均随着机体营养状况的变化而变化。口腔黏膜细胞凋亡率可以及时反映肠道黏膜凋亡状况并有可能成为监测甚至预测机体营养状况的评价指标。
- 冯煜黄建平胡俊波裘法祖龚建平
- 关键词：口腔黏膜细胞营养状态凋亡
- N24p55γPI3K靶向抑制胃癌细胞增殖的研究被引量：15
- 2006年
- 目的探讨P13K的调节亚基p55γN端24个氨基酸-N24p55γP13K对胃癌细胞系MKN-28增殖及细胞周期的影响。方法通过免疫沉淀及Western blot检测胃癌细胞系MKN-28中Rb家族蛋白(p130/107,p110)和p55γP13K蛋白的表达。采用脂质体转染的方法,将质粒N24p55-GFP导入MKN-28,通过流式细胞仪分析细胞周期,通过BrdU掺入法,激光共聚焦及流式检测Cyclin D1,Cyclin A的表达以观察其对细胞增殖的影响。结果胃癌细胞系MKN-28含有Rb家族蛋白p130/107而无p110,也含p55γP13K蛋白,且p130/107与p55γP13K相结合。与对照质粒pEGFP-C1相比,转染了N24p55-GFP的MKN-28细胞增殖受抑制,G_0/G_1期增加,S期减少,Cy- clin D1和Cyclin A的表达明显降低。结论这种新的N24P55γP13K调节亚单位可通过p130/p107途径阻滞细胞周期进程,抑制细胞增殖,从而为胃癌的基因治疗提供了一个新的分子靶点。
- 王晶刘双又高霞罗学来夏献民陶德定龚建平胡俊波
- 关键词：胃癌磷脂酰肌醇-3激酶细胞周期DNA合成
- 情绪因素及抗焦虑药物对肿瘤休眠及复发的影响被引量：11
- 2008年
- 目的:研究情绪因素以及通过药物控制情绪因素对肿瘤休眠状态的维持与打破及后续复发转移的影响。方法:利用肿瘤休眠模型,附加单笼饲养和不定时空瓶刺激联合诱导小鼠产生焦虑、愤怒等应激情绪的小鼠慢性情绪应激模型。通过灌胃给予常规抗焦虑药物地西泮来控制焦虑情绪,探讨情绪及抗焦虑药物对肿瘤休眠状态的维持及防止肿瘤复发的作用。实验分为五组,分别为休眠对照组、单纯给药组、诱导焦虑组、焦虑给药组和外伤刺激组。以500个小鼠乳腺癌细胞Ca761-03接种于小鼠左腿肌肉。休眠对照组、单纯给药组和外伤刺激组常规饲养,其中外伤刺激组在第1个月末切除右爪作为外伤刺激,单纯给药组每天定量灌胃给予地西泮溶液。诱导焦虑组和焦虑给药组以单笼饲养和不定时空瓶刺激联合诱导小鼠产生焦虑、愤怒等应激情绪,其中焦虑给药组每天定量灌胃给予地西泮溶液。连续观察2个月,观察小鼠焦虑情况,观察肿瘤休眠打破(肿瘤发生)及肿瘤转移发生情况。结果:各组肿瘤休眠率分别为70%、100%、60%、90%和40%。各组成瘤率分别为30%、0、40%、10%和60%。各组的肺转移率分别为20%、0、30%、0和60%。结论:本项研究结果证实,长期负面情绪会促进肿瘤休眠状态的打破,加速肿瘤的生长、复发及转移。抗焦虑药物可以明显减少焦虑行为,并有利于肿瘤休眠状态的维持,减少肿瘤的复发。
- 苏广彦刘玉琴任乐荣刘险峰顾蓓董继红高进
- 关键词：肿瘤休眠情绪因素抗焦虑药物复发
- p55PIK N末端24个氨基酸抑制甲状腺癌细胞增殖的研究被引量：4
- 2008年
- 目的观察P55PIK的N端的24个氨基酸抑制甲状腺癌细胞增殖的作用。方法构建含有P55PIK-N端24个氨基酸的腺病毒载体Ad-N24p55PIK-GFP及对照病毒Ad-GFP，以其感染甲状腺癌FTC236细胞，流式细胞仪检测细胞周期进程，应用BrdU掺入的方法检测其对细胞DNA合成的影响，通过建立体内肿瘤裸鼠移植瘤模型，进一步证实Ad-N24p55PIK-GFP的抗肿瘤作用。结果对照腺病毒Ad-GFP感染的细胞中G0／G1期细胞为（69．83±3．50）％，S期和G2／M期细胞数分别为（18．56±3．10）％和（11．61±2．90）％，而带有插入目的基因的腺病毒Ad-N24p55PIK-GFP感染后的细胞G0／G1期细胞减少为（45．81±2．10）％，S期和G2／M期细胞增加至（30．12±2．60）％和（24.07±2．90）％，BrdU掺入显示BrdU阳性的细胞数由（21．2±3．0）％降至（8．1±2．2）％，FTC236细胞裸鼠移植瘤模型局部应用Ad-N24p55PIK-GFP后肿瘤生长显著减慢。结论在FTC236细胞中，过表达p55PIK的N末端的24个氨基酸可有效阻滞细胞周期进程，抑制细胞DNA合成，体外有效抑制甲状腺癌裸鼠移植瘤模型的肿瘤生长。
- 黄焕军王桂华罗学来李小兰陶德定胡俊波龚建平
- 关键词：腺病毒BRDU
- 分化抑制蛋白类家族与肿瘤关系研究的进展被引量：2
- 2004年
- 金日天刘玉琴高进
- 关键词：细胞周期
- 磷脂酰肌醇-3激酶p55γ-N末端24个氨基酸抑制结肠癌细胞增殖的作用被引量：10
- 2008年
- 背景与目的:p55γ是磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)的调节亚单位之一,在调节PI3K活性上具有重要的作用。本研究旨在观察PI3K的一个调节亚基p55γ-N末端24个氨基酸抑制结肠癌细胞增殖的作用。方法:构建含有PI3K-p55γ-N末端24个氨基酸的腺病毒载体Ad-N24p55-GFP及对照病毒Ad-GFP,以其感染结肠癌HT29细胞,流式细胞仪检测细胞周期进程,应用BrdU掺入法检测其对细胞DNA合成的影响,通过建立体内肿瘤裸鼠移植瘤模型进一步证实Ad-N24p55-GFP的抗肿瘤作用。结果:对照腺病毒Ad-GFP感染的细胞中G0/G1期细胞为65.11%,S期和G2/M期细胞数分别为17.37%和17.51%;而带有插入目的基因的腺病毒Ad-N24p55-GFP感染后的细胞G0/G1期细胞增至73.39%,S期和G2/M期细胞减少至15.08%和11.13%。BrdU掺入法结果显示BrdU阳性的细胞数由24.82%降至9.27%(P<0.05)。HT29细胞裸鼠移植瘤模型局部应用Ad-N24p55-GFP后肿瘤生长显著减慢,其瘤重明显低于空白对照组和腺病毒对照组[(0.32±0.08)gvs.(0.67±0.30)g,(0.72±0.28)g,P<0.05]。结论:过表达PI3K-p55γ-N末端24个氨基酸可有效阻滞HT29细胞周期进程,抑制细胞DNA合成;并可有效抑制结肠癌裸鼠移植瘤模型的肿瘤生长。
- 王桂华罗学来孙黎邓豫李小兰陶德定胡俊波龚建平
- 关键词：HT29细胞磷脂酰肌醇-3激酶DNA合成
