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石蒜悬浮细胞系的建立及其生物碱累积的研究被引量：10: 2013年; 目的研究由石蒜愈伤组织建立细胞悬浮培养体系的条件及其生物碱的累积。方法以石蒜鳞茎为外植体进行愈伤组织的诱导,筛选出优质的愈伤组织进行悬浮培养,考察了激素、接种量、肌醇和条件培养对石蒜悬浮细胞系建立的影响,并利用HPLC检测石蒜悬浮细胞和培养基中生物碱的量。结果石蒜悬浮细胞系培养的最佳条件为:MS为基本液体培养基,添加2,4-D 0.5 mg/L+KT 0.1 mg/L,肌醇300 mg/L,接种量15%;对数期的培养基能明显缩短细胞系生长的延迟期;细胞系和培养基中加兰他敏分别是石蒜鳞茎中的4.18和0.69倍。结论利用石蒜愈伤组织建立了较好的细胞悬浮培养体系,且石蒜悬浮细胞系是一种获取加兰他敏的较好途径。; 张玉琼陈娜周建辉董召荣李勇王梅方高翠云; 关键词：石蒜加兰他敏生物碱愈伤组织

石蒜生物碱的双向薄层色谱分析及气质联用鉴定: 2013年; 建立双向薄层色谱分离石蒜多种生物碱组分的方法,并初步制备了生物碱单品。研究了石蒜生物碱各组分分离的单向及双向展开剂,结果表明:单向薄层色谱分离以氯仿∶甲醇∶氨水=9∶1∶0.2的展开剂分离效果最好,分离出的斑点数为13个。双向薄层色谱分离以乙酸乙酯∶甲醇∶氨水=9∶1∶0.2为第1向展开剂,氯仿∶甲醇∶氨水=9∶1∶0.2为第2向展开剂,分离石蒜生物碱效果最好,斑点数多达16个,且非常清晰。利用该方法对石蒜不同器官中生物碱进行了分析,结果显示:根中生物碱种类最多且含量最高,鳞茎其次,叶最低。经HPLC对分离得到的16个斑点进行检测,其中15个生物碱色谱峰明显,8种生物碱的纯度在90%以上,其中5种的纯度达93%以上,经气质联用鉴定,分别是石蒜碱、力克拉敏、加兰他敏、多花水仙碱和普鲁维因。此法适于石蒜生物碱组分的分析及微量制备。; 张玉琼高翠云朱景存董召荣陈娜; 关键词：薄层色谱石蒜生物碱 GC-MS

高效液相色谱法测定石蒜中加兰他敏、力可拉敏及石蒜碱3种生物碱被引量：11: 2012年; 以石蒜鳞茎为材料,建立了石蒜生物碱的反相高效液相色谱(HPLC)分析方法。探讨了流动相中乙腈含量、三乙胺含量、pH值、流速等对生物碱分离的影响,结果表明在ZORBAX ODS-C18(150 mm×4.6mm,5μm)反相色谱柱上,以0.9%三乙胺水溶液(pH 8.0)-乙腈-甲醇为流动相,梯度洗脱,流速为1mL/min,检测波长为234 nm时,石蒜样品可有效分离出14种石蒜生物碱,分离度良好。加兰他敏、力可拉敏和石蒜碱的检出限分别为3.375、0.475、0.495 mg/L,平均加标回收率均为98%。运用此法测定了石蒜不同部位中3种生物碱的含量,结果表明石蒜不同部位的3种生物碱含量差异较大,叶子中的含量最高;同一部位中,石蒜碱的含量最高,力可拉敏次之,加兰他敏最低。; 李明凯张玉琼董召荣高翠云仲延龙陈娜王梅方; 关键词：石蒜高效液相色谱加兰他敏石蒜碱

高效液相色谱法分离和测定小麦中的5种内源激素被引量：33: 2013年; 建立了高效液相色谱法(HPLC)用于分离和测定小麦中的吲哚乙酸(IAA)、脱落酸(ABA)、赤霉素(GA3)、玉米素(ZT)和水杨酸(SA)5种植物内源激素。经过条件优化,选用甲醇作为样品提取溶剂。然后,经石油醚和乙酸乙酯萃取,经Sep-Pak C18小柱纯化。液相色谱的分离采用Eclipse XDB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)反相色谱柱;流速为1 mL/min;进样量10μL。检测器波长设置为254 nm;14.5 min时切换到240 nm;SA洗脱后即18 min时切换回254 nm。流动相A为甲醇,B为乙酸溶液(pH3.6)。梯度条件为0～7 min,20%A;7～10 min,20%A～28%A;10～17 min,28%A;17～19 min,28%A～40%A;19～35 min,40%A。结果表明,小麦中各激素的分离效果理想,加标回收率达96.9%～98%,相对标准偏差在1.54%～2.29%之间。因此,该方法的建立为快速、准确地分离和测定小麦内源激素提供了可靠的方法。; 张玉琼仲延龙高翠云董召荣陈娜王梅方; 关键词：高效液相色谱法内源激素小麦

前体物对石蒜悬浮细胞生长和生物碱积累的影响被引量：1: 2014年; 为探究苯丙氨酸、酪氨酸和酪胺3种前体物对石蒜悬浮细胞系生长和生物碱积累的影响。通过向培养基添加不同浓度的3种前体物,以及同时添加苯丙氨酸和酪氨酸,考察其对细胞生长量及细胞中生物碱累积的影响。结果表明:苯丙氨酸对细胞的生长和生物碱的积累影响不明显;酪氨酸和酪胺作用显著:添加200μmol/L酪氨酸,细胞中生物碱的含量是对照组的2.56倍,其中力可拉敏和加兰他敏含量为3.77 mg/g和4.46 mg/g,分别是对照组的6.61倍和6.97倍;添加200μmol/L酪胺,细胞中生物碱含量是对照组的2.63倍,力可拉敏和加兰他敏含量为4.45 mg/g和5.14 mg/g分别是对照组的9.08倍和9.18倍;在200μmol/L酪氨酸的基础上添加苯丙氨酸没有明显的增效作用。; 张玉琼李勇周建辉陈娜王梅方董召荣高翠云仲延龙; 关键词：石蒜悬浮细胞系前体物生物碱

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安徽省自然科学基金(1208085mc48)