国家自然科学基金(81000332)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 相关作者：苏青张洪梅李晓永林宁林宁更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属新华医院江苏省省级机关医院更多>>
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- 糖化终末产物刺激胰岛中NADPH氧化酶水平升高被引量：3
- 2014年
- 目的:研究体外糖化终末产物(AGEs)对大鼠胰岛NADPH氧化酶表达的影响。方法:分离大鼠胰岛,用AGEs刺激胰岛细胞2、12、24、48 h,采用实时荧光定量PCR检测Nox2表达水平的变化,化学发光法检测NADPH氧化酶活力。结果:AGEs作用12、24 h后,Nox2 mRNA水平较对照组分别上升1.75、2.31倍(P<0.05),随着AGEs作用时间的延长,NADPH氧化酶活力逐渐升高,24 h时达最高,后有所下降,但仍高于对照组。结论:糖化终末产物作用于胰岛后导致NADPH氧化酶活性增加,进而引起胰岛损害。
- 林宁李晓永张洪梅苏青
- 关键词：糖化终末产物NADPH氧化酶氧化应激
- 抑制活性氧可改善AGEs诱导的3T3-L1细胞脂联素水平下调
- 2014年
- 目的 研究体外模拟细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）抑制对晚期糖基化终末产物（advanced glycation end products,AGEs）引起的小鼠3T3-L1脂肪细胞脂联素（adiponectin,ADPN）表达水平的影响.方法 制备AGEs,体外培养3T3-L1前脂肪细胞,并将其诱导分化为成熟脂肪细胞,油红O染色鉴定脂肪细胞分化程度和脂质积聚情况.予以AGEs刺激脂肪细胞不同的时间,以活性氧（ROS）捕获剂双氢-乙酰乙酸二氯荧光黄（DCFH-DA）孵育细胞,通过流式细胞仪检测细胞内二氯荧光黄（DCF）的荧光强度而测得细胞内ROS水平,采用实时荧光定量PCR与酶联免疫吸附法检测脂联素的mRNA和蛋白水平;予以抗氧化剂N-乙酰-半胱氨酸（N-Acetylcysteine,NAC）预处理后,再次检测脂联素的mRNA和蛋白水平.结果 AGEs处理3T3-L1脂肪细胞后,细胞内ROS水平明显升高,脂联素mRNA及蛋白水平均显著下调;将ROS抑制后,脂联素的mRNA和蛋白水平均有不同程度回升.结论 AGEs诱导3T3-L1脂肪细胞ROS生成增高,从而抑制了脂联素的表达,参与了胰岛素抵抗的病理生理过程.
- 林宁代玲俐李晓永张洪梅苏青
- 关键词：3T3-L1脂肪细胞活性氧脂联素
- 氯化钴诱导低氧对3T3-L1脂肪细胞脂连蛋白表达的影响
- 2014年
- 目的研究体外模拟低氧对小鼠3T3-L1脂肪细胞脂连蛋白(ADPN)表达的影响。方法体外培养小鼠3T3-L1前脂肪细胞,将其诱导分化成为成熟的脂肪细胞,油红O染色鉴定脂肪细胞分化程度和脂质积聚情况。氯化钴(CoCl2)化学模拟脂肪细胞低氧环境,采用实时PCR(Real-Time PCR)检测低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和ADPN mRNA的表达,蛋白质印迹法(Western blotting)检测低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的蛋白表达;酶联免疫吸附测定(ELISA)分析细胞培养上清液中ADPN蛋白的分泌水平。结果在CoCl2诱导3T3-L1脂肪细胞低氧的条件下,细胞内HIF-1αmRNA和蛋白的表达水平均显著上调;细胞内ADPN mRNA表达和细胞培养上清液中ADPN蛋白的分泌水平均显著下降;HIF-1αmRNA与ADPN mRNA的表达水平呈显著负相关(r=-0.854,P<0.001)。结论 CoCl2诱导低氧能够下调3T3-L1脂肪细胞ADPN的表达,该作用可能与脂肪细胞代谢功能障碍和胰岛素抵抗有关。
- 林宁张珠华李晓永张洪梅苏青
- 关键词：3T3-L1脂肪细胞氯化钴低氧诱导因子-1
