广西壮族自治区科技攻关计划(0815009-3-9)
- 作品数：9 被引量：81H指数：6
- 相关作者：李晓成张志刘爽吴发兴张燕霞更多>>
- 相关机构：中国动物卫生与流行病学中心云南农业大学福建农林大学更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区科技攻关计划国家科技支撑计划陕西省“13115”科技创新工程重大科技专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 2011年我国猪病流行特征分析被引量：9
- 2012年
- 通过流行病学调查和实验室监测数据分析,认为2011年我国猪群疫病有以下特点:一是腹泻病成为影响猪群的重要疫病,二是多重感染非常普遍,三是圆环病毒感染居高不下,四是繁殖障碍仍然严重影响猪群,据此提出了加强管理、合理使用疫苗和兽药等疫病防控的具体措施,并期望猪伪狂犬病能成为下一个净化的疫病。
- 张志刘爽吴发兴郑辉张燕霞李晓成
- 关键词：猪病疫病防控
- 猪精液中五种病毒的初步检测被引量：13
- 2012年
- 为探明猪精液在疫病传播中的作用,应用PCR和RT-PCR技术分别从发病猪场和未发病猪场采集种公猪精液进行猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)和牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的检测。结果发现,发病猪场的种公猪精液中CSFV、PRRSV、PRV、PCV-2的感染率分别为30.0%、50.0%、4.0%和30.0%,而未发病猪场的感染率分别为4.0%、20.0%、0.0%和8.0%,这表明精液是多种猪病原传播的良好媒介,提示种公猪对于疫病的发生和传播起着重要作用。
- 张志刘爽张燕霞吴发兴郑辉李晓成黄保续
- 关键词：种公猪精液
- 牛病毒性腹泻病毒RT-PCR检测方法的建立及应用被引量：8
- 2010年
- 根据GenBank中登录的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)5′UTR基因序列,设计合成了1对特异性引物,建立了检测BVDV218bp片段的RT-PCR方法。通过对该方法的特异性、敏感性和重复性进行试验,结果显示,该方法从BVDV标准毒株OregonC24V中扩增出了218bp的特异性片段,而对猪瘟病毒、蓝舌病病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病病毒、MDBK正常细胞的扩增结果均为阴性。经对标准毒株的细胞毒进行检测,其敏感度达10-1TCID50。不同人员用该方法进行检测,结果均一致,表明其重复性好。应用该方法对70份临床疑似发病猪样品进行检测,结果检出11份阳性,阳性检出率约为15.7%。在对5份细胞培养用犊牛血清的检测中,亦检出2份阳性。表明,建立的RT-PCR方法具有特异、灵敏、高效、快速的特点,可用于BVDV的临床检测及流行病学监测。
- 孟雨吴发兴朱紫祥张志张燕霞刘爽李晓成王晶钰
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒反转录聚合酶链反应
- 北美型猪蓝耳病病毒鉴别RT-PCR检测方法的建立及应用被引量：5
- 2011年
- 参考Genbank发表的美洲型猪蓝耳病病毒(porcine reproductive and respiratory syndrone virus,PRRSV)CH-1a(北美型经典PRRSV)、JXA1(北美型HP-PRRSV)等毒株的的主要结构蛋白基因序列,应用Primer5.0软件设计了一对特异性的北美型PRRSV鉴别检测引物,其对经典PRRSV的扩增片段为511bp,对HP-PRRSV的扩增目片段为421bp。进行了该方法的特异性、敏感性、重复性试验,建立了美洲型PRRSV鉴别RT-PCR检测方法。应用此法对2010年1—12月收集的126份临床样品进行了检测,总体检出率达53.17﹪。结果表明该方法具有特异、敏感、重复性好等优点,可用于北美型PRRSV的临床发病鉴别检测及流行病学监测等工作。
- 张燕霞吴发兴郑辉刘爽张志李晓成
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP2基因RTPCR
- 猪全血中多种病原流行病学监测的初步研究被引量：4
- 2012年
- 本文利用PCR或RT-PCR技术连续两年对规模猪场采集的猪全血分别进行猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖障碍综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和日本乙型脑炎病毒(JEV)的检测,结果发现2008年猪全血中CSFV、PRRSV、PRV、PCV2的感染率为30.0%、50.0%、4.0%和30.0%,2009年猪全血中CSFV、PRRSV、PRV、PCV2、BVDV和JEV的感染率分别为19.8%、13.7%、1.1%、31.9%、0.7%和2.7%,这表明用猪的全血可进行猪瘟等6种疫病的监测和流行,为更深入研究疫病的流行病学奠定了基础。
- 张志王赛赛李岚李蕾刘爽张艳霞郑辉吴发兴李晓成黄保续
- 关键词：全血
- 猪圆环病毒Cap基因重组质粒的构建及对小鼠免疫效果研究
- 2014年
- 用PCR方法扩增出猪圆环病毒2型的Cap基因,将1个Cap基因、2个串联Cap基因和3个串联Cap基因定向克隆于真核表达载体pcDNA4-His/Max,构建真核表达载体pcDNA4-His/Max-Cap、pcDNA4-His/Max-2Cap和pcDNA4-His/Max-3Cap。将构建好的重组质粒以100μg/只腿部肌肉注射昆明小鼠,同时设置pcDNA4-His/Max和生理盐水对照,于首免后14d、28d再次免疫,并分别于首免后7、14、28、35、49d用ELISA方法检测小鼠抗体水平,对不同串联重组质粒免疫原性进行初步评价。结果显示,重组质粒于35d能诱导小鼠产生较高的体液免疫,2个Cap和3个Cap串联基因的免疫效果远远高于1个Cap基因的免疫效果,差异极显著(P<0.01)。
- 刘自立张志吴发兴刘爽董雅琴邵卫星段纲李晓成
- 关键词：猪圆环病毒核酸疫苗
- 猪流行性腹泻病毒PCR检测及其M基因的遗传变异分析被引量：10
- 2013年
- 为了解我国猪流行性腹泻病毒(PEDV)的流行情况,利用套式反转录-聚合酶链反应(nRT-PCR)技术,从表现腹泻症状的仔猪粪便中扩增出6份阳性样品,测序表明,一扩PCR产物的大小为854bp,涵盖PEDV的M基因。选择34个参考毒株基于M基因进行进化树分析,结果显示PEDV可以分为G1和G2两个基因型7个基因亚型。G1型以2007年前的经典毒株为主,包括CV777、Br1/87、KPEDV-9、JMe2和CH/S株等;G2型则以近年分离的毒株为主,包括GDXS5、JS-2004-2、PFF188、KU06RB08等。其中G2.3亚型已经成为目前世界上主要的PEDV流行毒株,包括本次检测的6株PEDV、泰国的KU06RB08及GenBank中我国和韩国2011年的流行毒株。通过同源性比较发现,这6株PEDV之间的同源性为98.2%～100%,与经典毒株CV777的同源性为97.6%～98.2%。结果表明,尽管PEDV之间的同源性仍较高,但PEDV流行毒株已经逐渐形成独特的流行进化分支。
- 张志李岚董雅琴王赛赛刘爽吴发兴李晓成
- 关键词：猪流行性腹泻病毒M基因进化分析
- 猪蓝耳病病毒通用RT-PCR检测方法的建立及应用被引量：10
- 2011年
- 参考Genbank发表的美洲型猪蓝耳病病毒(Porcine Reproductive and RespiratorySyndrome Virus,PRRSV)VR-2332、CH-1a、JXA1等毒株的主要结构蛋白基因序列,设计了一对引物,扩增目的片段为690 bp,进行了RT-PCR检测方法的特异性、敏感性、重复性试验,建立了美洲型PRRSV通用RT-PCR检测方法。应用此方法对2009年1-12月收集的126份临床样品进行了检测,检出率达44.4%。符合性检测结果表明,该方法比高致病性PRRSV检测方法具有更广的监测范围。该方法具有特异、敏感、重复性好等优点,可用于PRRSV的临床发病检测及流行病学监测等工作。
- 张燕霞吴发兴刘爽郑辉张志李晓成
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF
- 猪流行性腹泻新毒株的分离鉴定和致病性研究被引量：25
- 2012年
- 为探明2011年我国猪群仔猪腹泻的病因,采用巢式RT-PCR方法对河南和辽宁省2个规模猪场采集43份出现腹泻的粪便进行猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和轮状病毒(PRoV)的检测,结果表明:43份腹泻样品均为PEDV,没有检测出TGEV和PRoV。对扩增的PEDV进行测序和分析显示,这些PEDV流行毒株均属于基因G2.3亚型,彼此之间的同源性高达99.2%～100%,与2011年韩国和2008年泰国流行的PEDV毒株同属于一个进化分支。将其中3份病料在Vero细胞传代后接种2日龄仔猪,结果发现接种后13～57h内仔猪全部死亡,接种仔猪呈现典型的腹泻症状和病理变化特征,提示了这些PEDV流行毒株具有较强的致病性。
- 张志李岚王赛赛刘爽吴发兴郑辉李蕾张燕霞李晓成
- 关键词：猪流行性腹泻RT-PCR
