湖南省医药卫生科研计划课题(C2014-13)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 相关作者：蒋明张杰秦华丽艾金刚吴学文更多>>
- 相关机构：中南大学湘雅三医院长沙市妇幼保健院温州医科大学更多>>
- 发文基金：湖南省医药卫生科研计划课题更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 神经营养因子-3联合全反式维甲酸与β-巯基乙醇诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化效果比较被引量：2
- 2018年
- 目的:探讨神经营养因子-3(NT-3)联合全反式维甲酸(RA)与β-巯基乙醇(β-BME)体外诱导SD大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向神经元样细胞分化的差异性。方法:SD大鼠全骨髓经贴壁法培养BMSCs并传代,P3代细胞行流式细胞仪检测其表面标志物CD29、CD90及CD45的表达。P3代BMSCs用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)预诱导24h后,再分别加入NT-3+RA和β-BME进行诱导,用免疫荧光法鉴定神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达情况。结果:(1)全骨髓贴壁法可以获得的细胞经流式细胞仪检测,细胞CD29和CD90阳性,CD45阴性,证实细胞为BMSCs,数量多且纯度高。(2)2组NSE均阳性表达,NT-3+RA组7d阳性率高于其他时间点(P<0.01);β-BME组5h阳性率高于1h,NT-3+RA组1h及5h阳性率均低于β-BME组(均P<0.01),但β-BME组24h后细胞大量死亡。结论:全骨髓贴壁筛选法是一种提取BMSCs的合适的方法,2种诱导方法均能在体外诱导BMSCs向神经元样细胞转化,NT-3+RA组细胞生存时间及后期阳性率均优于β-BME组。
- 张杰秦华丽蒋明
- 关键词：骨髓间充质干细胞神经元样细胞分化
- 豚鼠骨髓间充质干细胞培养及体外转染神经营养因子-3的研究被引量：1
- 2017年
- 目的建立豚鼠骨髓间充质干细胞(bone-mesenchymal stem cells,BMSCs)的体外培养体系,体外脂质体2000介导神经营养因子-3(neurotrophic factor-3,NT-3)转染BMSCs,为内耳移植提供前期研究基础。方法 (1)采用全骨髓贴壁法培养豚鼠BMSCs并传代,取P3代做生长曲线图,流式细胞仪上检测BMSCs的表面标志物CD29,CD90以及造血细胞表面标志物CD45;(2)按照不同质粒-脂质体配比介导p EGFP-N1-NT3转染P3代BMSCs,转染后48 h计算转染效率,选择最佳配比将p EGFP-N1-NT3质粒转染P3代BMSCs,转染后1、3、7、14 d,观察其荧光表达情况;(3)转染后3 d的BMSCs提取蛋白,Western Blot验证NT-3蛋白表达。结果 (1)全骨髓贴壁法获得细胞数量多,增殖快,传代可以纯化细胞。生长曲线符合Logistic生长曲线。流式细胞仪检测细胞CD29和CD90阳性表达,CD45阴性表达,符合BMSCs特征;(2)不同配比中质粒:脂质体为4μg:12μl时转染率最高,为最佳配比;(3)转染后48 h荧光表达较强,7 d荧光表达但较前明显减弱,14 d基本未见明显荧光表达。Western Blot验证NT-3基因成功表达。结论 (1)全骨髓贴壁法可以成功培养出增殖快,细胞纯度高的BMSCs;(2)脂质体法成功介导NT-3真核质粒在BMSCs内表达,BMSCs可能作为内耳基因治疗的理想载体。
- 秦华丽张杰蒋明
- 关键词：骨髓间充质干细胞神经营养因子-3基因转染
- 鼻腔神经纤维瘤2例报道及文献复习被引量：1
- 2014年
- 目的探讨单发于鼻腔的神经纤维瘤的临床特点,以提高诊断及治疗水平。方法回顾性分析2例单发于鼻腔的神经纤维瘤的临床资料并复习相关文献。结果 2例患者均因鼻塞就诊,鼻内镜下完整切除肿瘤;术后随访症状缓解,未见肿瘤复发。结论单发于鼻腔的神经纤维瘤少见,免疫组化为确诊手段,首选鼻内镜下手术治疗效果好。
- 张杰吴学文艾金刚许孜蒋明
- 关键词：神经纤维瘤鼻腔病理学手术治疗鼻内镜术
