国家科技支撑计划(2006BAI02A14)
- 作品数：19 被引量：87H指数：6
- 相关作者：陈杰卢朝辉朱明华孙健于双妮更多>>
- 相关机构：北京协和医院第二军医大学中国医学科学院肿瘤医院更多>>
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- 层黏连蛋白对胰腺癌细胞内在性耐药的影响及其机制
- 2012年
- 目的探讨层黏连蛋白(laminin,LN)对胰腺癌细胞内在性耐药的影响,并探讨其作用机制。方法选择胰腺癌细胞系AsPC-1,检测LN对盐酸吉西他滨(健择,gemcitabine,Gem)的细胞毒性及对Gem诱导细胞凋亡能力的影响。通过Westernblot等方法检测LN对下游信号通路的影响;在AsPC-1中,过表达黏着斑激酶相关非激酶(focal adhesion kinase-related non-kinase,FRNK)或应用PF-573,228抑制黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)磷酸化与活性,检测FAK及其下游信号的抑制对LN作用的影响。结果在胰腺癌细胞系AsPC-1中,LN处理使Gem的细胞毒性及Gem诱导细胞凋亡的能力显著降低。Gem作用72h后,LN处理组细胞存活率为57.71%±6.08%,形成的克隆数目为55.33±5.01;而在无LN包被组,细胞存活率与形成的克隆数目分别为36.65%±4.14%及31.43±4.62(P均<0.05);LN处理组AnnexinV标记阳性细胞百分数(41.00%±5.46%)较无LN处理组(55.70%±3.44%)显著下降(P<0.05)。LN能够时间依赖性上调AsPC-1细胞的FAKTyr397位点及Akt磷酸化水平,LN还可以显著增加AsPC-1细胞的survivin蛋白表达水平及BADSer-136位点磷酸化水平。过表达FRNK或应用PF-573,228能够显著抑制FAK磷酸化水平及其下游通路的活化,并能够对抗LN对胰腺癌内在性耐药的效应。应用PF-228可以使LN处理后Gem诱导的AsPC-1细胞凋亡率从26.77%±0.49%升高至38.53%±2.83%(P<0.05)。结论细胞外基质蛋白LN能够诱导胰腺癌细胞系对Gem产生内在性耐药。LN影响胰腺癌细胞内在性耐药的具体机制可能与FAK磷酸化及其下游PI3K-Akt通路活化、BadSer-136位点磷酸化与survivin表达水平改变有关,FAK靶向治疗与Gem联合在胰腺癌治疗中具有重要的潜在应用价值。
- 吴焕文梁智勇师晓华任新瑜刘彤华
- 关键词：层黏连蛋白胰腺癌化疗耐药黏着斑激酶
- Twist转录因子、E-钙黏蛋白和N-钙黏蛋白在乳腺癌中的表达及意义被引量：14
- 2010年
- 目的观察上皮间质转化因子Twist转录因子（简称Twist）和相关蛋白E-和N-钙黏蛋白（cadherin）在乳腺癌中的表达及其与患者临床病理指标的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测56例浸润性导管癌、38例浸润性小叶癌和41例导管内癌以及10例正常乳腺组织中Twist、E-和N—eadherin的表达。结果（1）三种病理类型乳腺癌组织中，Twist阳性率分别为46．4％（26／56）、79．0％（30／38）和26．8％（11／41），其中浸润性小叶癌中Twist阳性率显著高于浸润性导管癌和导管内癌（分别P=0．002、0．000）；E—cadherin阳性率分别为78．6％（44／56）、29．0％（11／38）和80．5％（33／41），其中浸润性导管癌和导管内癌中E—cadherin阳性率显著高于浸润性小叶癌（均P=0．000）；N—eadherin阳性率分别为53．6％（30／56）、68．4％（30／56）和31．7％（13／41），其中在浸润性导管癌和浸润性小叶癌中的阳性表达显著高于导管内癌（分别P=0．033、0．001）。（2）135例乳腺癌组织中Twist和E—eadherin表达呈显著负相关性（P=0．005，Spearman相关系数-0．239）；Twist和N—cadherin表达呈显著正相关性（P=0．000，Spearman相关系数0．319）。（3）乳腺浸润性导管癌差分化组中N．cadherin阳性率显著高于中分化和高分化组（P=0．004）。（4）乳腺浸润性小叶癌淋巴结转移组中Twist阳性率显著高于淋巴结未转移组（P=0．037）。结论三种蛋白在三种乳腺癌组织中的表达差异较大。Twist阳性表达与乳腺浸润性小叶癌淋巴结转移相关。N—cadherin阳性率与乳腺浸润性导管癌组织学分级相关。检测这三个指标可为研究乳腺癌的进展和转移机制及评判其生物学行为提供有价值的参考。
- 马怡晖王凯李磊卢朝辉陈杰
- 关键词：乳腺肿瘤肿瘤转移TWIST转录因子钙黏着糖蛋白类
- 食管鳞癌3、8、10、20和Y染色体的非整倍性分析被引量：2
- 2009年
- 食管鳞状细胞癌(Esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)的临床诊断和治疗方案虽经不断改进,但是总体5年生存率仍然较低。文章应用间期细胞核荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)技术,对220例食管鳞癌组织标本的3、8、10、20和Y染色体进行检测,分析其与临床病理参数之间的相关性。发现所测常染色体在食管癌组织中均存在较高的数目畸变率,主要表现为染色体增益,包括三体、四体及多体。4条常染色体3、8、10和20号染色体增益率分别为84.9%、77.5%、63.7%和83.2%,其中多体率各为24.6%、34.9%、23.4%和31.7%。Y染色体在61.2%的男性患者表现缺失。3、8、10和20号探针联合检测食管癌的阳性率为74.5%,3、8、20和Y染色体探针联合检测男性食管癌的阳性率为85.0%。这些结果提示3、8、10和20号染色体的探针组合和3、8、20和Y染色体探针组合有可能用于食管癌的辅助诊断,且在诊断男性食管癌病例时后者优于前者。
- 康维姚汉清房丽丽蔡岩韩亚铃徐昕张钰贾雪梅王明荣
- 关键词：食管鳞状细胞癌染色体畸变荧光原位杂交
- 累及胃肠道的间变性大细胞淋巴瘤的临床病理学特点被引量：5
- 2012年
- 目的总结累及胃肠道的间变性大细胞淋巴瘤(ALCL)的临床病理学特点。方法收集整理4例累及胃肠道的ALCL病例标本,对其进行临床病理分析、免疫组织化学检测、EB病毒编码的RNA(EBER)原位杂交检测及T细胞受体(TCR)基因重排检测。结果 4例病例中,肿瘤细胞均以多形性大细胞为主,归为普通型ALCL;均表现为弥漫、较强地表达CD30,且至少表达1种细胞毒性抗原;2例为间变性淋巴瘤激酶(ALK)阳性ALCL;4例EBER原位杂交检测均为阴性且均存在TCR基因克隆性重排。结论累及胃肠道的ALCL具有独特的临床病理特点。
- 孙健周皎琳陈杰卢朝辉
- 关键词：胃肠道间变性大细胞淋巴瘤
- 体液中microRNA的研究进展被引量：1
- 2010年
- Lee等[1]和Wightman等[2]1993年发现在线虫体内存在一种RNA（lin-4）,其不编码蛋白但可以生成一对小的RNA转录本,每一个转录本能在翻译水平通过抑制一种核蛋白lin-14的表达而调节了线虫的幼虫发育进程.
- 赵晨燕朱明华
- 关键词：MICRORNA体液编码蛋白翻译水平转录本核蛋白
- hsa-mir-615过表达胰腺癌稳定细胞亚系的构建及功能初步验证
- 2014年
- 慢病毒（Lentivirus）载体可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上,从而达到持久性表达[1].本实验在对胰腺癌差异表达的microRNA进行研究时发现hsa-mir-615在胰腺癌组织和胰腺正常导管上皮组织中呈现差异表达[2],异常表达的microRNA可能具有生物学功能.因此,本实验构建hsa-mir-615过表达慢病毒载体并包装成慢病毒,感染人胰腺癌细胞MIA PaCa-2,建立hsa-mir-615过表达稳定细胞系,使用CCK-8法观察hsa-mir-615对胰腺癌细胞系生长的影响,为进一步研究hsa-mir-615的生物功能构建细胞模型.
- 孙洋张婷婷王翠萍陈杰赵红
- 关键词：胰腺癌组织过表达细胞亚系细胞系生长
- 微小RNA在胰腺导管腺癌中的研究进展被引量：3
- 2011年
- 微小RNA(miRNA)是一种内源性非编码RNA分子,长度19～24个核苷酸,作为转录后调节分子发挥作用。多种肿瘤中都存在miRNA表达谱的改变,差异表达的miRNA发挥癌基因或抑癌基因的作用,与肿瘤的发生、发展和预后有着密切的联系。对胰腺导管腺癌miRNA表达谱的研究及其靶基因的探索有助于了解胰腺导管腺癌的发病机制,同时miRNA表达谱是胰腺导管腺癌早期诊断和预后判断潜在的肿瘤标志物。本文总结了近年已知miRNA在胰腺腺癌中的表达情况,并探讨miRNA在胰腺导管腺癌诊断、治疗及预后中的作用。
- 余春开于双妮卢朝辉陈杰
- 关键词：胰腺导管腺癌微小RNA靶基因生物学标志物
- 胰腺导管腺癌中CD74的表达及临床意义被引量：6
- 2011年
- 目的检测CD74蛋白在胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC)组织中的表达并探讨其临床意义。方法收集59例PDAC和23例慢性胰腺炎(chronic pancreatitis,CP)的存档石蜡包埋标本。HE染色、镜下观察神经纤维周围淋巴细胞病灶。免疫组化检测CD74的表达,统计分析其与PDAC临床病理参数的关系。结果 PDAC神经纤维周围淋巴细胞病灶发生率为67.8%。CD74在肿瘤细胞中阳性表达率为61%(36/59),明显高于CP导管上皮(13%,3/23,P=0.000)。CD74表达与神经纤维淋巴细胞病灶密切相关(P=0.009),与其它临床病理参数无关。CD74阳性的PDAC患者术后生存时间明显短于CD74阴性患者(P=0.006 9)。CD74在肿瘤细胞中的表达(P=0.009;rs=2.590)及pT(P=0.022;rs=1.482)为影响PDAC患者预后的独立危险因素。结论 CD74在胰腺导管腺癌组织中高表达与神经纤维周围淋巴细胞病灶及肿瘤预后相关,可能成为PDAC预后相关的分子靶标。
- 史敏陈颖赵晨燕张晶倪灿荣朱明华
- 关键词：胰腺肿瘤胰腺导管腺癌CD74免疫组化预后
- 胰腺癌中miR-27a靶基因PSMA1的预测及鉴定被引量：2
- 2013年
- 目的 软件预测并筛选miR-27a可能的靶基因,结合胰腺癌比较蛋白质组学结果中表达下调的蛋白,进一步检测胰腺癌中miR-27a的靶基因并进行验证.方法 采用生物信息学预测软件TargetScan、PicTar以及miranda预测miR-27a的靶基因,结合前期比较蛋白质组学的结果,筛选出miR-27a的可能靶基因；构建靶基因3＇非翻译区（UTR）的表达载体,双荧光素酶报告基因检测系统验证miR-27a对靶基因的靶向作用；胰腺癌肿瘤细胞系PANC-1和BxPC-3中转染miR-27a mimics或微小RNA阴性对照序列,Western blot检测靶蛋白的表达情况.结果 软件预测与蛋白质组学分析结合筛选出miR-27a的靶基因为PSMAl.双荧光素酶报告基因检测系统显示,与对照组相比miR-27a对野生型PSMA1的3＇UTR具有靶向作用,实验组较阴性对照组相对活性值下降19.14％,差异具有统计学意义（P=0.016）；而对突变型PSMA1 3＇UTR的靶向作用消失,实验组与阴性对照组相比差异无统计学意义（P=0.249）.Western blot分析显示转染miR-27a mimics组PSMA1蛋白的相对表达量明显低于阴性对照组,PANC-1细胞实验组的PSMA1相对表达量为0.71±0.01;BxPC-3细胞实验组的PSMA1相对表达量为0.58±.0.04,P值均＜0.01.结论 胰腺癌中PSMA1是miR-27a的直接靶基因.
- 张婷婷孙洋贾丛伟于双妮卢朝辉陈杰
- 关键词：胰腺肿瘤微RNAS
- 胃T细胞淋巴瘤临床病理观察被引量：2
- 2010年
- 目的 探讨胃T细胞淋巴瘤的临床病理学特点.方法 收集7例胃T细胞淋巴瘤病例标本,对其进行了临床病理分析、免疫组织化学检测、EBER原位杂交检测及T细胞受体（TCR）基因重排检测.结果 7例病例中6例为男性,1例为女性,平均发病年龄为45岁.6例可获得资料的病例中,1例有长期腹泻史,5例有低蛋白血症.组织学上,7例标本中,有5例表现为肿瘤细胞体积较大而不一致,2例表现为大小一致的中等细胞.1例病例可见肿瘤细胞浸润腺上皮.所有病例的肿瘤组织均不表达CD20及CD79a.7例病例中,各有6例表达CD3及T细胞胞质内抗原,各有4例表达CD5、βF-1及CD30,有3例表达CDM,各有1例病例表达CD8、CD56、问变性淋巴瘤激酶及粒酶B.7例病例肿瘤细胞EBER原位杂交检测均为阴性且都存在TCR基因克隆性重排.结论 胃T细胞淋巴瘤是一种少见的恶性淋巴瘤,具有独特的临床病理特点.
- 孙健卢朝辉罗玉凤凌庆陈杰
- 关键词：胃肿瘤
