黄土高原土壤侵蚀与旱地农业国家重点实验室开放基金(10501-178)
- 作品数：9 被引量：69H指数：5
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- 相关机构：西北农林科技大学中国科学院更多>>
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- 相关领域：农业科学环境科学与工程生物学更多>>
- 氮肥缺失对旱地土壤细菌群落多样性的影响被引量：3
- 2009年
- 本文旨在研究氮肥缺失对旱地土壤细菌群落多样性的影响。采用直接提取土壤微生物总DNA的方法,对不施肥（CK）、适量施肥（F1）、和缺氮施肥（F2）3种不同施肥水平土样DNA进行提取,扩增细菌16S rDNA基因片段,建立克隆文库。用限制性内切酶HhaI和RsaI进行PCR-RFLP分析,分别得到146、187、11个酶切类型。采用α多样性的测度对试验结果进行分析统计结果表明,不同处理间土壤细菌的多样性（H′、Ds和Dg）和物种丰富度（dMa、R2和E）均为F1〉CK〉F2;λ、dMa、E和H′指数在不同施肥处理间的变异系数达到56.96%-163.1%,尤其Simpson指数λ是非常敏感的指标,处理间的差异最大,表明氮肥缺失严重影响土壤细菌群落多样性,合理施肥有利于土壤细菌的多样性。
- 李杨岑剑王保莉曲东
- 关键词：氮肥旱地土壤细菌多样性RFLPRDNA
- 铜胁迫下硫对玉米叶片叶绿素及MDA含量的影响被引量：4
- 2013年
- 以农大108号玉米为供试材料,通过室内盆栽方法,测定Cu(+Cu)和S(+S)处理及二者共同处理(+Cu+S)下玉米苗期和拔节期生物量、叶片SPAD值及丙二醛(MDA)含量变化。结果表明,不同处理在玉米苗期和拔节期的生物量分别表现为CK>+S>+Cu+S>+Cu及+S>CK>+Cu+S>+Cu,说明铜污染对玉米生长有明显的抑制作用,而增加硫营养可减轻铜对植株的毒害。玉米苗期不同处理间叶绿素含量差异显著。在拔节期,+Cu处理对SPAD值的影响显著增加,但补充硫营养后可明显减小铜对叶绿素的抑制作用。苗期铜对叶片MDA含量的影响显著,可导致MDA含量增大,说明铜胁迫可引起膜质过氧化程度加剧,其产物MDA的积累增加;+S与CK处理间变化不明显,但+Cu+S较+Cu处理的MDA的积累明显减少,说明硫营养体现出一定的抵御铜胁迫的作用。
- 孔大为贾蓉周莉娜
- 关键词：硫营养铜胁迫SPADMDA玉米
- 过量施肥下氮素形态对旱地土壤细菌多样性的影响被引量：16
- 2011年
- 采用细菌16SrDNA的PCR-RFLP技术,以西北地区土垫旱耕人为土为材料,模拟田间过量施肥水平,经室内恒温短期培养,研究了过量施肥下酰胺态氮、硝态氮和铵态氮对土壤细菌多样性的影响。结果显示:PCR-RFLP分析酰胺态氮(T1)、硝态氮(T2)和铵态氮(T3)过量施肥处理的细菌16SrDNA克隆文库,分别得到17、25和130个酶切分型,不施肥对照(CK1)和正常施肥对照(CK2)分别得到119和187个酶切分型,表明正常施肥处理的酶切分型最多,过量使用酰胺态氮和硝态氮减少了酶切类型,而过量施用铵态氮可以维持与不施肥对照相近的酶切类型数量。采用α多样性测度对试验结果进行分析统计表明,不同处理间土壤细菌的多样性指数(H'、Ds)和物种丰富度指数(dM)a均为CK2>T3>CK1>T2>T1处理,表明合理施肥可显著增加土壤中细菌的多样性,而过量施用酰胺态氮则减少细菌的多样性,使用铵态氮处理可维持细菌多样性;除正常施肥对照(CK2)外,其余各处理都出现了优势菌种。通过对优势菌的16SrDNA序列比对发现,酰胺态氮处理都为未培养细菌,硝态氮处理和铵态氮处理的优势菌呈现了菌属多样性,前者包括变形菌门的假单胞菌属和寡养单胞菌属、芽单胞菌门的未培养芽单胞菌属和未培养土壤细菌,后者为未培养酸杆菌属、变形菌门寡养单胞菌属和厚壁菌门芽孢杆菌属,表明不同施肥方式改变了土壤细菌的群落结构。
- 王保莉岑剑武传东曲东
- 关键词：细菌多样性过量施肥氮素形态PCR-RFLP
- 铬污染土壤修复过程中土壤细菌群落多样性的RFLP分析被引量：1
- 2009年
- 【目的】对污染土壤修复过程中土壤细菌群落多样性的变化进行研究。【方法】以淹水培养后的模拟铬污染土壤为供试材料,通过直接提取土壤中总细菌DNA,利用细菌专一引物克隆细菌16S rDNA片段,分别建立克隆文库。利用PCR-RFLP技术,分析比较了土壤淹水10 d(对照,S1)、添加Cr(Ⅵ)淹水10 d(S2)、添加Cr(Ⅵ)和Fe(OH)3淹水10 d(S3)及20 d(S4)4个处理中土壤细菌群落的变化。【结果】用专一引物克隆细菌16S rDNA片段,分别建立了克隆文库;用限制性内切酶RsaⅠ进行细菌16S rDNA PCR-RFLP分析,分别得到123,120,97和69个酶切类型,库容值分别为54.92%,55.43%,65.33%和76.60%;Shannon-Wiener指数、Gini指数、物种丰富度指数(dMa)和物种均匀度指数(Jgi)均表现为S1>S2>S3>S4,以上4个指数的变异系数分别为11.51%,1.84%,23.64%和1.55%;基于细菌多样性参数的聚类分析结果,将对照S1和添加Cr(Ⅵ)处理的S2归于一类,而2个添加Fe处理的土壤S3和S4聚为一类。【结论】经过10 d淹水处理,土壤中添加的Cr(Ⅵ)有98%以上可发生转化,土壤残留的Cr(Ⅵ)含量基本达到稳定。添加铬矿渣处理(S2)的土壤细菌群落多样性和对照(S1)基本一致,添加氧化铁的2个处理(S3和S4)的细菌群落多样性基本接近,但低于S1和S2;添加氧化铁的处理(S3和S4)中,均出现了明显的优势细菌群落,其分别属于荧光假单胞菌属和不动杆菌属。
- 翟文王保莉曲东李杨
- 关键词：铬污染土壤细菌群落多样性土壤修复RFLP分析
- 渭北旱塬长期施肥试验中氨氧化细菌的多样性及群落结构分析被引量：13
- 2010年
- 以中国科学院长武黄土高原农业生态试验站23 a长期施肥定位试验的土壤样品为研究对象,通过构建氨氧化细菌的amoA基因克隆文库,采用PCR-RFLP方法分析了裸地(LD)、种植不施肥(CK)、单施氮肥(N)、单施磷肥(P)和氮磷共施(NP)这5个处理条件下土壤中氨氧化细菌的多样性及其群落结构。结果表明,N处理的土壤中氨氧化细菌的Shannon-Wiene(rH′)和Margalef(dM)a指数均最高,其次是CK、NP、P,而LD处理中最低,表明长期单施氮肥后增加了土壤中氨氧化细菌的多样性和丰富度,长期种植作物后也同样会增加土壤中氨氧化细菌的多样性和丰富度,但单施磷肥和氮磷共施后土壤中氨氧化细菌的多样性和丰富度都有所降低。基于amoA基因建立的系统进化树显示,所有来自于各处理条件下土壤中氨氧化细菌的优势种群都是属于Nitrosospira和Nitrosospira-like,与Nitrosospira cluster 3聚为一组,但优势菌种在克隆文库中所占的比例不同,表明不同的施肥处理下土壤中氨氧化细菌的群落结构发生了改变。
- 程林刘桂婷王保莉曲东
- 关键词：氨氧化细菌长期施肥多样性群落结构
- 长期不同施肥对黄土旱塬黑垆土氨氧化细菌多样性的影响被引量：19
- 2010年
- 【目的】通过分析长期不同施肥制度下土壤氨氧化细菌的群落结构及多样性,认识土壤氨氧化细菌对不同施肥制度的响应,以期明确氨氧化细菌对环境质量变化的指示作用。【方法】构建氨氧化细菌amoA基因克隆文库,利用PCR-RFLP方法研究无肥(CK)、有机肥(M)、氮肥+有机肥(NM)、磷肥+有机肥(PM)、氮磷肥+有机肥(NPM)等5种不同施肥处理对土壤氨氧化细菌多样性及群落结构的影响。【结果】5种施肥处理分别得到59、56、83、71、42个RFLP酶切类型。α多样性指数表明不同施肥处理的多样性存在差异,NM处理多样性最高,NPM处理多样性最低。β多样性指数表明M与NPM处理之间Sorenson指数为0.61,群落相似性最高;NM、PM与CK之间Sorenson指数均为0.15,群落相似性最低;其余均介于0.23-0.38。基于amoA氨基酸序列建立的系统进化树表明,各处理均以Nitrosospira cluster3为优势种群,但不同处理间属于Nitrosospira cluster3a和3b中克隆子所占的比例大小不同,同时发现有Nitrosospira cluster4种属。【结论】长期施肥改变土壤中氨氧化细菌的多样性,不同施肥环境可导致土壤中氨氧化细菌种属间的显著差异。
- 刘桂婷程林王保莉赵其国曲东
- 关键词：长期施肥氨氧化细菌
- 不同施肥水平下旱地土壤细菌群落多样性的RFLP分析被引量：10
- 2010年
- 采用直接提取土壤微生物总DNA的方法,通过对不施肥(CK)、低量施肥(F1,N∶P2O5∶K2O为0·1gkg-1∶0·075gkg-1∶0·15gkg-1)、适量施肥(F2,N∶P2O5∶K2O为0·2gkg-1∶0·15gkg-1∶0·3gkg-1)和过量施肥(F3,N∶P2O5∶K2O为1·0gkg-1∶0·75gkg-1∶1·5gkg-1)等4种不同施肥水平土样DNA提取,扩增细菌16SrDNA基因片段,建立克隆文库。用限制性内切酶HhaI和RsaI进行PCR-RFLP分析,分别得到146、133、187、170个酶切类型。采用α多样性的测度对试验结果进行分析统计表明,不同处理间土壤细菌的多样性和物种丰富度均为F2>F3>CK>F1,表明合理施肥有利于土壤细菌的多样性;λ、R2、dMa和E指数在不同施肥处理间的变异系数达到12·86%～118·9%,尤其是Simpson指数λ变化最为敏感,处理间的差异最大。序列分析和系统发育树结果表明,不同施肥处理下供试土壤优势细菌的分布发生了改变。
- 李杨王保莉朱超曲东
- 关键词：施肥水平旱地土壤细菌多样性RFLP
- 长期施用氮肥和磷肥对渭北旱塬土壤中氨氧化古菌多样性的影响被引量：8
- 2012年
- 采用基于氨单加氧酶基因的PCR-RFLP和DNA测序技术,以黄土高原旱地黑垆土为材料,研究长期施用氮肥和磷肥对土壤氨氧化古菌多样性的影响。结果显示,不同施肥处理土壤样品得到的氨氧化古菌的OTU数分别为25(种植不施肥,CK)、21(不施肥不种植,LD)、18(单施氮肥,N)、25(单施磷肥,P)和13(氮、磷共施,NP)。氨氧化古菌的多样性指数H′和优势度指数Ds变化趋势基本相同,分别为P>CK>LD>NP>N和P>CK>NP>LD>N;种群丰富度和均匀度指数在不同处理间变化较大,分别为CK>P>LD>N>NP和P>NP>LD>N>CK。各处理优势氨氧化古菌绝大部分属于Cluster S,少数属于Cluster M,获得的序列全部属于难培养泉古菌门。不同施肥方式的长期定位试验土壤中氨氧化古菌多样性变化较大,而优势氨氧化古菌系统进化定位没有显著变化。
- 武传东闫倩辛亮王保莉曲东
- 关键词：氨氧化古菌长期施肥群落结构
- 玉米ST和ATPS部分cDNA序列克隆及分析被引量：4
- 2007年
- 硫酸盐转运蛋白(ST)和ATP硫酸化酶(ATPS)是根系吸收硫酸盐和植物体内硫酸盐同化过程的关键蛋白和酶,在硫酸盐的生物转运过程中具有重要作用.以水培玉米农大108根系为材料,并根据已报道的玉米的硫酸盐转运蛋白和ATP硫酸化酶基因保守序列分别设计PCR引物对,采用RT-PCR方法克隆到783 bp和820 bp的部分硫酸盐转运蛋白和ATP硫酸化酶cDNA片段,分别命名为ST_ND108和ATPS_ND108.序列分析和比对结果显示,ST_ND108与已报道的玉米和水稻的高亲和型硫酸盐转运蛋白基因同源性分别为99%和85%;而ATPS_ND108与已报道的玉米ATP硫酸化酶基因同源性达到97%,进化树聚类分析和预测氨基酸的BLAST结果证实ST_ND108为高亲和性硫酸盐转运蛋白基因片段,ATPS_ND108为质体ATP硫酸化酶基因片段.
- 朱超王保莉曲东
- 关键词：玉米根系ATP硫酸化酶
